玉红油纱条对创伤模型大鼠创面愈合的影响及其作用机制研究

发布时间：2017-03-21 17:10

  本文关键词：玉红油纱条对创伤模型大鼠创面愈合的影响及其作用机制研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:观察中药外用制剂玉红油纱条对创伤模型大鼠创面愈合的影响作用,初步探讨其促进创面愈合作用的分子生物学机制。方法:通过随机分组法将96只SD大鼠随机分为A(空白组)、B(模型组)、C(阳性对照组)、D(玉红油纱条组)四组,每组24只。对B、C、D三组大鼠通过手术方式建立创伤模型。对不同处理组大鼠创面进行换药,每天观察创面组织变化情况,记录创面愈合时间。分别于换药第4天、第10天各组随机抽取8只大鼠进行心脏取血及创面组织取材。光学显微镜下观察各组大鼠的创面组织形态、炎性细胞、肉芽组织、毛细血管、纤维的变化情况;采用ELISA法检测血清中VEGF、IL-6及TGF-β含量,免疫组化法检测创面组织中VEGF、IL-6及TGF-β的蛋白表达水平RT-PCR检测创面组织中VEG、IL-6及TGF-βm RNA的表达。结果:1创面大体观察可见换药后B、C、D组大鼠创面随着时间推移,组织水肿、渗出逐渐减轻,痂皮组织增多,创面缩小,C、D两组创面变化较B组明显,愈合时间明显缩短。2HE染色观察显示换药后不同时间点B组大鼠创面组织中炎性细胞增殖较C、D两组明显,随时间推移逐渐减少;B、C、D组大鼠创面新生毛细血管、成纤维细胞及肉芽组织逐渐增多,且C、D两组较B组增加明显。3免疫组化SP法及RT-PCR检测换药后不同时间点各组大鼠创面组织VEGF、IL-6和TGF-β的表达结果显示:C、D两组大鼠创面组织中TGF-β和VEGF的表达高于B组,差异具有统计学意义(P0.05),且随愈合时间的推移呈增长趋势;C、D两组药物对模型大鼠创面组织中IL-6的表达具有明显控制作用,与B组相比差异具有统计学意义(P0.05)。4换药后不同时间点各组大鼠血清中VEGF、IL-6和TGF-β含量统计:第4天各组大鼠血清中TGF-β和VEGF的含量比较,差异无统计学意义(P0.05);换药后第10天C、D两组大鼠血清中TGF-β和VEGF的含量高于A、B两组,差异具有统计学意义(P0.05);换药后不同时间点C、D两组大鼠血清中IL-6的含量与A、B组比较,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论:1玉红油纱条能够有效减轻创面水肿及渗出,促进创面纤维及肉芽增生,缩短创面愈合的时间。2玉红油纱条可通过对创伤模型大鼠创面组织及血清中VEGF、IL-6和TGF-β表达的干预而控制创面炎症反应、促进创面毛细血管新生及肉芽增生,促进创面的快速、有效愈合。
【关键词】：玉红油纱条 创伤模型大鼠 创面愈合 作用机制
【学位授予单位】：甘肃中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R269;R-332
【目录】：

• 摘要5-6
• ABSTRACT6-9
• 序言9-11
• 第一章 实验内容11-17
• 1.材料和方法11-13
• 1.1 实验材料11-12
• 1.2 试验方法12-13
• 2. 指标观察及检测方法13-16
• 2.1 创面大体情况观察13
• 2.2 创面组织病理学观察13
• 2.3 免疫组化检测创面组织VEGF、IL-6 及TGF-β蛋白表达13-14
• 2.4 ELISA法检测大鼠血清VEGF、IL-6 及TGF-β表达14
• 2.5 RT-PCR检测各组创面组织中VEGF、IL-6 及TGF-β的相对表达量14-16
• 3. 统计方法16-17
• 第二章 实验结果17-24
• 1. 大鼠创面大体观察17
• 2. 组织学HE描述17-18
• 3. 创面愈合时间比较18
• 4. 免疫组化染色结果18-20
• 4.1 不同时间点创面VEGF免疫组化染色结果18-19
• 4.2 不同时间点创面组织IL-6 免疫组化染色结果19
• 4.3 不同时间点创面组织TGF-β免疫组化染色结果19-20
• 5. 大鼠血清因子检测结果20-22
• 5.1 各组大鼠不同时间点血清VEGF含量20-21
• 5.2 各组大鼠不同时间点血清IL-6 含量21
• 5.3 各组大鼠不同时间点血清TGF-β含量21-22
• 6. 大鼠创面组织mRNA表达结果22-24
• 6.1 不同时间点各组大鼠创面组织VEGFmRNA表达结果22
• 6.2 不同时间点各组大鼠创面组织IL-6mRNA表达结果22-23
• 6.3 不同时间点各组大鼠创面组织TGF-βmRNA表达结果23-24
• 第三章 讨论24-31
• 1. 中医药对伤科创面愈合的认识及干预24-25
• 1.1 创伤初期24
• 1.2 创伤中期24-25
• 1.3 创伤后期25
• 2. 玉红油纱条方解及现代研究25-27
• 3.创面组织愈合的病理学过程27-28
• 4.玉红油纱条对创面愈合中不同因子的影响28-31
• 4.1 玉红油纱条对IL-6 的影响28-29
• 4.2 玉红油纱条对VEGF的影响29
• 4.3 玉红油纱条对TGF-β的影响29-31
• 结语31-32
• 1.结论31
• 2.存在的问题31
• 3.展望31-32
• 参考文献32-35
• 附录一：不同时间点各组大鼠创面愈合情况（肉眼观察）35-36
• 附录二：不同时间点各组大鼠创面组织HE染色结果36-37
• 附录三：不同时间点各组大鼠创面组织SP免疫组化阳性表达图37-40
• 附录四：不同时间点各基因RT-PCR中的扩增及溶解曲线40-42
• 附录五：实验过程照片42-43
• 附录六：实验动物质量合格证43
• 附录七：实验动物设施使用证明43-44
• 文献综述 中医药外用促进创面愈合的研究进展44-59
• 参考文献54-59
• 在学期间主要研究成果59-61
• 致谢61

【参考文献】

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本文编号：260005