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吴生元辨治OA用药规律及益气养血方抗OA体外机制研究

发布时间:2020-05-22 01:03
【摘要】:目的:1.结合现代数据挖掘方法,探讨吴生元教授治疗骨关节炎用药规律,更好地继承名老中医学术思想及临床经验,为临床治疗骨关节炎提供借鉴。2.探讨益气养血方对Wnt/β-catenin信号通路的调控作用,为益气养血方治疗骨关节炎提供理论依据。方法:1.选取2016年3月-2016年9月本人跟师记录及1997年-2016年期间就诊于云南省中医医院吴生元教授门诊的骨关节炎患者处方共395例。录入中医传承辅助系统(V2.5)软件,对筛选出的医案进行数据挖掘,分析其处方规律。2.常规制备含药血清。40只SD大鼠建立离体培养的软骨细胞体系,抽签法随机分为正常组和诱导组。应用HE染色、阿利新兰染色及免疫荧光检测进行形态学鉴定,绘制软骨细胞生长曲线。将IL-1β诱导的软骨细胞分成8个组:益气养血方药物血清组(20%、10%、5%)、生理盐水血清组(20%、10%、5%)、阳性对照组(药物DKK-1 30ng/ml)和IL-1β(10ng/ml)诱导组,并设置凋亡阳性对照组(用DNA酶处理)及细胞培养基对照组。观察各组含药血清对软骨细胞增殖情况的影响。应用RT-qPCR和Western Blot分别从mRNA基因水平和蛋白水平探讨益气养血方对IL-1β诱导的大鼠骨关节炎模型β-catenin、WISP-1、MMP-1、MMP-13的因子的影响。结果:1.对筛选出的395张处方进行分析,得到治疗骨关节炎的频率大于10次的药物46种,其中归脾肺肝肾四经的药物最多。温性药及甘味药应用最为广泛。得到药物核心组合33组,治疗骨关节炎的新处方1首。2.与正常组组相比,诱导组大鼠软骨形态明显改变,细胞生长缓慢。与IL-1β诱导组相比,10%、20%益气养血方含药血清组软骨增殖有明显差异(P㩳0.05,P㩳0.01),β-catenin、WISP-1、MMP-1、MMP-13mRNA及蛋白表达表达下调(P㩳0.05,P㩳0.01)。结论:1.“调补中焦”“甘温补虚”乃吴生元教授辨治骨关节炎的用药特色;“善用经方,活用药对”为吴生元教授遣方规律,形成独特的诊疗经验。2.益气养血方可能通过下调β-catenin、WISP-1调控Wnt/β-catenin信号通路,抑制下游MMP-1、MMP-13水平,促进软骨细胞增殖,可能是益气养血方减轻关节软骨破坏的机制之一。
【图文】:

统计图,四气,药物,统计图


药物四气统计图

统计图,五味,药物,统计图


药物五味统计图
【学位授予单位】:云南中医药大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2019
【分类号】:R274.9

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