痰瘀互结型多囊卵巢综合征患者的临床观察及代谢组学的研究

发布时间：2020-05-22 11:35

【摘要】：目的:通过多囊卵巢综合征(Polycystic ovary syndrome,PCOS)患者痰瘀互结型与肾虚肝郁型及健康人群之间的一般资料、检验指标及利用超高效液相色谱质谱联用技术(HPLC-MS)分析其血清代谢标志物,通过代谢途径寻找PCOS患者不同证型之间的差异性,为证型具体化、中医药辨证论治提供分子生物学依据;通过寻找PCOS患者与健康者之间的差异,试图寻找PCOS在代谢方面可能的发病机制。方法:纳入2018年10月1日至2019年1月31日至广州中医药大学第一附属医院妇科就诊的符合纳排标准的PCOS患者60例,通过辨证纳入痰瘀互结型28例,肾虚肝郁型32例,并选取同期来院体检中心符合纳排标准的健康者30例,收集其一般资料,于月经第2-3天空腹检测性激素六项,并用促凝管采集清晨空腹静脉血4-5ml,采用HPLC-MS技术检测分析血清代谢标志物,将痰瘀互结型PCOS与健康者之间、痰瘀互结型与肾虚肝郁型PCOS患者之间的各项指标进行对比。结果:1.本次研究中痰瘀互结组PCOS患者体重及BMI均高于肾虚肝郁组PCOS患者;肾虚肝郁组PCOS患者痤疮的发病率高于痰瘀互结组PCOS患者;两种证型间多毛情况、性激素检测无明显差异;PCOS患者LH、T、LH/FSH均高于健康者组,且LH/FSH比值多高于2倍以上;2.本次研究筛选出血清标志物共4371个,根据PLS-DA模型中的VIP值(VIP1)和t检验结果,根据质谱同位素匹配结果和HMDB、KEGG等数据库的检索结果及鉴别结果,本次研究中纳入分析可能的血清标志物20种;其中痰瘀互结型PCOS相比肾虚肝郁型PCOS患者有14个标志物有统计学意义;痰瘀互结型PCOS患者相比健康者经检验有18种有统计学意义。结论:1.通过临床资料的对比,体重、BMI、痤疮可被认为痰瘀互结型及肾虚肝郁型PCOS的辨证点,通过各项指标对比本次研究选取的小样本与大样本统计基本吻合,具有一定样本代表性,可作为代谢组学数据的进一步研究;2.通过血清标志物代谢通路分析发现涉及的主要代谢途径为:氨基酸代谢(组氨酸、酪氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸、缬氨酸等)、脂质代谢(脂肪酸分解、脂质转运、磷脂的分解)、糖类代谢(麦芽糖的分解、糖胺聚糖的合成、糖蛋白的合成)及其他途径(肝的生物转化、胆汁酸代谢等)。3.通过HPLC-MS技术筛选出标志物发现痰瘀互结型PCOS患者相比健康人群主要的血清标志物有组氨酸、α-生育酚、1,4-β-D-葡聚糖、十一烷基甘氨酸、甲基硒酸、3,4-Dihydroxybenzylamine、油酰胺、N-Jasmonoylisoleucine、去氧胆酸酸、硫酸角蛋白I、苯二醇、2-Oxo-4-methylthiobutan-oic acid、缴氨酸、L-岩藻糖、脂胺酰胺、LysoPC(22:1(13Z))、Glutaminylhydroxyproline、Methionyl-Glutamate;4.纳入痰瘀互结型PCOS患者相比肾虚肝郁型PCOS患者血清标志物为组氨酸、α-生育酚、Pentadecanoylcarnitine、十一烷基甘氨酸、甲基硒酸、3,4-Dihydroxybenzylamine、2-amino-4-butanoic acid、去氧胆酸、苯二醇、~T氨酸、L-岩藻糖、LysoPC(22:1(13Z))、Glutaminylhydroxyproline、Methionyl-Glutamate。
【图文】：

指纹图谱,指纹图谱,血清,第三

注：１．痰瘀互结组；２．肾虚肝郁组；３．健康者组逡逑图１血清代谢ＵＰＬＧ－Ｔ０Ｆ指纹图谱逡逑第三节方法学考察逡逑在每个血清样本中取２０邋ＵＬ至５ｍｒ离心管中，，涡旋混合，制备为样品池。在样品池逡逑

重复性,仪器方法

逦广州中医药大学２０１９届硕士学位论文逦逡逑考察仪器及样品的稳定性。重复性考察样品叠加图见图２邋（ｎ＝６），稳定性考察结果见逡逑图３邋（ｎ４０），说明样木处理重复性良好，样品及仪器方法稳定性良好，满足分析要逡逑求。选取其中１０个峰进行比较，所得图谱的峰强度与峰数目的ＲＳＤ均小于１０％，说明样逡逑本及仪器方法稳定性良好，满足分析要求。见表７、表８。逡逑
【学位授予单位】：广州中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R271.9

【参考文献】