TRAIL、IL-10参与损伤大鼠骨骼肌细胞凋亡机制及其与气血变化相关性探索

发布时间：2020-05-31 10:04

【摘要】：目的:本研究从TRAIL、IL-10免疫因子入手,观察它们参与损伤大鼠骨骼肌细胞凋亡的机制,对比凋亡过程中血液与骨骼肌中TRAIL与IL-10表达水平的变化趋势,探寻其中的变化规律,并结合中医的气血理论分析变化原理。通过数据分析和讨论,从新的视野揭示TRAIL和IL-10参与急性闭合性软组织损伤修复过程中细胞凋亡的机制以及在血液和骨骼肌中的对比变化;同时,创新性地运用中医气血理论分析不同时相点细胞凋亡和免疫因子波动变化规律,从变化规律中探寻损伤修复过程中可能存在的新的影响因素,为临床伤科治疗中更加准确地把握治疗的介入时机和中医气血理论的运用提供基础性研究依据。方法:选用80只SPF级SD大鼠,用抽签法对大鼠随机分组,分组包括:空白组、1H组、12H组、24H组、2D组、3D组、7D组、14D组。每10只大鼠编入一组,雌、雄各半。使用定量打击法进行造模,按照相应的时相点处死造模大鼠,最后处死空白组,并取血液和骨骼肌组织,用TUNEL法测试骨骼肌细胞凋亡情况,并作病理切片镜下观察,用ELISA检测血液和骨骼肌组织中TRAIL和IL-10的表达水平。利用统计学手段分析实验数据,结合中医气血理论进行分析讨论。结果:1)损伤后12小时,细胞凋亡的执行阶段未被全面激活,血液中TRAIL剧烈增长出现峰值,同时IL-10水平下降达到谷值;2)损伤后12小时到3天的时相区间,损伤细胞的凋亡剧烈增长,血液和骨骼肌中TRAIL和IL-10的表达平行发展,出现病理情况下的临时稳态;3)损伤后14天时相区间,血液中TRAIL和IL-10水平回到正常值,但骨骼肌的指标水平和细胞凋亡率未接近正常值;4)TRAIL和IL-10比值比均值在多个时相点呈现共轭变化趋势。结论:损伤后12小时,血液中免疫因子出现剧烈的上下波动变化,骨骼肌中的免疫表达不激烈,可能预示着整体气血原有的动态平衡首先遭到破坏;而在细胞凋亡执行程序启动的过程中,血液和骨骼肌中免疫因子的稳态变化,可能受整体和局部气血在病理情况下的临时稳态调控;损伤后14天,病理过程导致的全身免疫反应基本结束,但局部的细胞凋亡和免疫反应还未完全终止,这可能与该时相点整体和局部的气血新平衡建立与否有关;整体与局部气血平衡的破旧立新有可能是免疫因子在不同时相点呈现共轭变化趋势的调控因素。
【图文】：

TUNEL凋亡检测原理

图 2 细胞凋亡检测主要流程5.1.3 图像采集和报告采用数码三目摄像显微摄像系统对封片制作完成的切片进行图像采集。骤为：先用 100 倍镜观察全部组织情况，，再根据组织大小及细胞凋亡表达
【学位授予单位】：成都体育学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R274;R-332

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本文编号：2689684