穴位埋线干预老年性聋小鼠耳蜗螺旋神经节细胞Bcl-2及Bax表达的实验研究

发布时间：2020-06-09 09:56

【摘要】：目的:研究穴位埋线干预对老年性聋小鼠耳蜗螺旋神经节细胞凋亡因子Bcl-2和Bax表达的影响,从细胞凋亡角度探讨穴位持久性良性刺激改善老年性听力损失的可能机制,并验证肾俞、足三里在保健及延缓衰老方面的重要作用。材料和方法:选择健康雄性11周龄C57BL/6小鼠30只,适应性喂养一周后开始实验。在小鼠12周龄时麻醉,进行听性脑干反应(ABR)检测,之后随机分为青年组、自然衰老组和埋线组,每组10只。ABR检测结束后,迅速将10只青年组小鼠断头,取耳蜗,备用。将自然衰老组小鼠正常喂养16周,埋线组小鼠取双侧肾俞、足三里进行穴位埋线,2周操作一次,共8次。在小鼠28周龄时,对自然衰老组、埋线组共计20只小鼠再次进行ABR检测,检测结束后断头处死,取耳蜗,观察耳蜗形态结构,Western blot技术检测耳蜗中Bcl-2和Bax两种蛋白的表达情况。结果:1.听功能(ABR阈值)检测结果显示:与青年组相比,自然衰老组小鼠ABR阈值在各频率均出现大幅增高,且高频段增高更为显著,差异均具有统计学意义(P0.05);埋线组与自然衰老组比较,前者ABR阈值在各频率均低于后者,且差异均具有统计学意义(P0.05);与青年组相比,埋线组小鼠ABR阈值在各频率虽有增高,但增高幅度小于自然衰老组,差异具有统计学意义(P0.05)。2.耳蜗形态结构观察结果显示:青年组小鼠基底膜形态正常,细胞排列整齐,血管纹无断裂,形态正常,无红细胞渗出,螺旋韧带结构致密,染色均匀,与耳蜗外侧壁相邻,无间隙;自然衰老组可见明显的形态结构破坏,血管纹变薄、断裂,螺旋韧带部分溶解,结构紊乱、排列稀疏,与耳蜗外侧壁间距增宽;埋线组小鼠基底膜形态基本正常,血管纹偶有断裂,螺旋韧带区见少量增生,与耳蜗外侧壁间距无明显增宽。3.Western Blot结果显示:与青年组相比,自然衰老组小鼠耳蜗Bcl-2蛋白表达量明显降低,Bax蛋白表达量明显增高,两组对比差异有统计学意义(P0.05);埋线组与自然衰老组比较,埋线组Bcl-2表达量高于自然衰老组,而Bax表达量低于后者,差异均具有统计学意义(P0.05);埋线组与青年组相比,前者Bcl-2蛋白表达量虽有所降低,但降低幅度小于自然衰老组,Bax蛋白表达量虽有所增高,但增高幅度亦小于自然衰老组,两组对比差异均具有统计学意义(P0.05)。结论:1.C57BL/6小鼠在28周龄时,已出现明显听力损失,且高频听力损失尤为显著,符合老年性聋发病特点,可作为老年性聋动物模型。2.通过肾俞、足三里穴位埋线干预,可改善老年性聋小鼠听力损失情况。3.肾俞、足三里穴位埋线法防治老年性聋,其机制可能是通过上调耳蜗Bcl-2蛋白表达量、同时下调Bax蛋白表达量来实现的。4.验证了肾俞、足三里在保健及延缓老年性聋方面的重要作用。
【图文】：

小鼠耳蜗螺旋神经节Bcl-2和Bax蛋白的表达
【学位授予单位】：辽宁中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R245

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本文编号：2704522