针刺疗法对2型糖尿病患者疗效和肠道菌群影响的观察

发布时间：2020-09-10 20:37

　　 目的:观察以“清热润燥,养阴生津”为治则的针刺疗法对2型糖尿病患者的临床疗效,同时注意其对患者肠道菌群的调节效应,探讨肠道微生物与2型糖尿病的关系,为针刺防治2型糖尿病提供客观的理论依据。方法:57例符合纳入标准的2型糖尿病患者经简单随机化分组法分为两组,针刺组29例,对照组28例。对照组给予医院规范药物治疗、健康知识宣教、饮食控制配合适当运动。针刺组在对照组的基础上予以每日1次,1周6次,持续2周的针刺干预。本研究使用Illumina HiSeq2500PE250测序平台对患者粪便样品进行16S rDNA测序和聚类,分析治疗前后两组患者肠道菌群的变化,同时观察其空腹血糖、餐后2小时血糖、糖化血清蛋白、糖化血红蛋白的临床指标和中医症状量化积分的变化。所得数据使用SPSS 22.0统计软件进行统计学分析。结果:(1)临床指标:治疗前,2型糖尿病患者的空腹血糖、餐后2小时血糖、糖化血清蛋白和糖化血红蛋白均高于正常值,两组间差异无统计学意义(P0.05)。治疗后两组的空腹血糖、餐后2小时血糖和糖化血清蛋白均显著低于治疗前(P0.05),具有统计学意义。针刺组的空腹血糖和糖化血清蛋白明显低于对照组(P0.05),其餐后2小时血糖与对照组之间无显著差异(P0.05)。虽然治疗前后两组的糖化血红蛋白存在差异,但差异不显著,无统计学意义(P0.05)。(2)中医症状积分:两组中医症状积分与治疗前比较差异有统计学意义(P0.01),针刺组的积分明显低于对照组(P0.01)。(3)临床疗效:治疗后,针刺组显效7例,有效19例,无效3例,总有效率为89.66%;对照组1例显效,21例有效,无效6例,总有效率为78.57%;针刺组与对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。(4)16S rDNAAmplicon测序结果:治疗前,针刺组与对照组的OTU总数差异无统计学意义(P0.05)。治疗后,两组肠道菌群的丰度和多样性均呈减少趋势,但与治疗前对比差异无统计学意义(P0.05)。针刺组的菌群丰度减少程度较对照组少,但组间差异不显著(P0.05)。针刺治疗后,患者肠道厚壁菌门(Firmicutes)的相对丰度显著降低,而拟杆菌门(Bacteroidetes)、变形杆菌门(Proteobacteria)和放线菌门(Actinobacteria)的相对丰度增加,增加了患者的拟杆菌门/厚壁菌门(B/F)比值。在细菌属、种水平上,针刺组的埃希菌属(Escherichia)、肠球菌属(Enterococcus)、明串珠菌属(Leuconostoc)、霍尔德曼氏菌属(Holdemania)、罗氏菌属(Rothia)、普雷沃氏菌属(Prevotella)、罗斯氏菌属(Roseburia)、弯曲杆菌属(Campylobacter)、厌氧棍状菌属(Anaerotruncus)、厌氧消化链球菌(Peptostreptococcus anaerobius)和Shuttleworthia satelles的丰度下降,而双歧杆菌属(Bifidobacterium)和梭菌属(Clostridium)的丰度增加。结论:(1)清热润燥,养阴生津的针刺疗法对2型糖尿病患者空腹血糖和糖化血清蛋白的调节效果显著。针刺能有效减轻2型糖尿病患者因机体长期处于高血糖状态引起的不适临床症状。(2)针刺疗法可以改善2型糖尿病患者肠道菌群结构紊乱。主要表现为:1、调节肠道微生物的物种丰度和多样性,主要减少了肠内的革兰氏阳性菌,例如:厚壁菌门(Firmicutes)、肠球菌属(Enterococcus)、明串珠菌属(Leuconostoc)、霍尔德曼氏菌属(Holdemania)、罗氏菌属(Rothia)、梭菌属(Clostridium)、罗斯氏菌属(Roseburia)、厌氧消化链球菌(Peptostreptococcus anaerobius)和Shuttleworthia satelles;2、调节参与脂类代谢的细菌丰度,例如减少厚壁菌门(Firmicutes)、肠球菌属(Enterococcus)和罗斯氏菌属(Roseburia)的丰度,增加了拟杆菌门(Bacteroidetes)和双歧杆菌属(Bifidobacterium)的丰度,使肠内拟杆菌门/厚壁菌门(B/F)值提高;3、调节参与短链脂肪酸和中链脂肪酸生成的菌群丰度,例如减少霍尔德曼氏菌属(Holdemania)、罗斯氏菌属(Roseburia)和普雷沃氏菌属(Prevotella)的相对丰度;4、调节与机体炎症反应相关的菌群,例如增加了抗炎的梭菌属(Clostridium)和双歧杆菌属(Bifidobacterium)丰度,减少了致炎的普雷沃氏菌属(Prevotella)丰度;5、抑制可引发机体感染的条件致病菌和有害菌的增多繁殖,例如降低了埃希菌属(Escherichia)、肠球菌属(Enterococcus)、明串珠菌属(Leuconostoc)、罗氏菌属(Rothia)、普雷沃氏菌属(Prevotella)、弯曲杆菌属(Campylobacter)和厌氧消化链球菌(Peptostreptococcus anaerobius)的相对丰度。(3)肠道菌群与2型糖尿病的发生发展关系密切。肠内菌群的失衡是引发2型糖尿病的关键机制之一。针刺疗法调节2型糖尿病的机理或许是通过调整患者肠道菌群的组成结构,使其恢复到发病前的动态平衡,来纠正机体异常的血糖和脂肪代谢。
【学位单位】：南京中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R246.1
【部分图文】：

逑２．４．邋２邋ＯＴＵ邋ＰＬＳ－ＤＡ邋分析（Ｐａｒｔｉａｌ邋ｌｅａｓｔ邋ｓｑｕａｒｅｓ邋ｄｉｓｃｒｉｍｉｎａｔｉｏｎ邋ａｎａｌｙｓｉｓ）逡逑图２－２为对照组和针刺组治疗前后的ＰＬＳ－ＤＡ分析图。相对于ＰＣＡ，ＰＬＳ－ＤＡ逡逑更侧重于分组和对组间差异的样本分析，故能更好地区分各组间的差异。不同的逡逑颜色代表着不同的组别。图中，英文字母Ｐ代表对照组治疗前（蓝色）；Ｑ代表逡逑对照组治疗后（橘色）；Ｒ代表针刺组治疗前（灰色）；Ｓ代表针刺组治疗后（青逡逑色）。每个点代表着一个样本，两点或两组之间的距离表明两组之间的差异。逡逑ＯＴＵ邋巳ＡＳＥＤ邋ＰＬＳ－ＤＡ邋ＡＮＡＬＹＳＩＳ逡逑ＯＴＵ邋ＢＡＳＥＤ邋ＰＬＳ－ＤＡ邋ＡＮＡＬＹＳＩＳ逡逑＇Ｉ逡逑Ｉ邋Ｘ邋Ｘ＾Ｘ逦ｘ逡逑＂逦ＸＳ逡逑－５－ｊ逡逑－１０－逡逑逦逦１逦１逦１逦１逦逡逑－１０逦－５逦０逦５逡逑Ｘ．ａｌｌ逡逑图２－２基于ＯＴＵ丰度的ＰＬＳ－ＤＡ分析逡逑图２－２中的横坐标（Ｘ．ａｌｌ）代表第一主成分；纵坐标（Ｙ．ａｌｌ）则代表第二主成逡逑分。从图中可以观察到，Ｐ和Ｑ之间的差异最小；Ｒ和Ｓ之间的差异较大；Ｑ和Ｓ逡逑之间的差异最大。这表明针刺疗法联合药物干预比单纯用药治疗更能影响患者肠逡逑道菌落的结构。逡逑２．邋４．邋３物种注释和分析结果逡逑图２－３和表２－９展示了参与本研宄的所有２型糖尿病患者不同门类物种在样品逡逑中所占的比例。其中，英文字母Ｐ表示对照组治疗前；Ｑ表示对照组治疗后；Ｒ逡逑表示针刺组治疗前；Ｓ表示针刺组治疗后。逡逑２６逡逑

型糖尿病患者治疗前显著性差异菌的LDA分值图

型糖尿病患者治疗后显著性差异菌的LOA分值图

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本文编号：2816298