电针预处理对小鼠脑缺血后谷氨酸转运体2的影响

发布时间：2020-11-20 05:35

　　 目的探索谷氨酸转运体2(EAAT2)在电针预处理减轻小鼠脑缺血中的作用。方法 32只雄性C57BL/6小鼠,随机法分4组(n=8):全脑缺血再灌注(BCCAO)组、电针预处理(EA)+BCCAO组、EAAT2抑制剂二氢卡因酸盐(DHK)+EA+BCCAO组、EAAT2激动剂头孢曲松钠(CXT)+BCCAO组。BCCAO组仅结扎双侧颈总动脉,DHK+EA+BCCAO组和EA+BCCAO组行电针预处理,30 min/次,1次/d,连续5 d,其中DHK+EA+BCCAO组缺血前1 h侧脑室注射DHK 200μg/kg。CXT+BCCAO组腹腔注射头孢曲松钠600 mg/kg,1次/d,连续5 d。预处理后24 h全脑缺血20 min,神经行为学评分和HE染色计算海马CA1区凋亡神经元。Western blot法检测EAAT2蛋白表达,免疫荧光双标染色检测EAAT2和星形胶质细胞活化标志物(GFAP)。结果与BCCAO组比较,EA+BCCAO组和CXT+BCCAO组行为学评分升高,凋亡神经元数目减少(P0.05);DHK+EA+BCCAO组与EA+BCCAO组比较,神经行为学评分降低,凋亡神经元数目增多(P0.05)。Western blot结果:与BCCAO组比较,EA+BCCAO组和CXT+BCCAO组EAAT2蛋白表达水平升高(P0.05);DHK+EA+BCCAO组与EA+BCCAO组比较,EAAT2蛋白表达水平下降(P0.05)。免疫荧光双标染色:与BCCAO组比较,EA+BCCAO组和CXT+BCCAO组EAAT2和GFAP蛋白表达增加(P0.05);DHK+EA+BCCAO组与EA+BCCAO组比较,EAAT2和GFAP蛋白表达降低(P0.05)。结论电针预处理通过调节星形胶质细胞膜上EAAT2产生脑缺血耐受作用。
【部分图文】：

与BCCAO组(36.1±3.0)个比较,EA+BCCAO组(15.2±2.0)个和CXT+BCCAO组(12.5±2.0)个凋亡神经元数目减少(t=19.96,t=24.31,P<0.05);与EA+BCCAO组比较,DHK+EA+BCCAO组(38.0±1.0)个凋亡神经元数目增加(t=18.22,P<0.05)。见图1。2.3 电针预处理对全脑缺血-再灌注小鼠海马CA1区EAAT2表达的影响

Western blot结果:与BCCAO组比较,EA+BCCAO组和CXT+BCCAO组EAAT2蛋白表达增加(t=7.028,t=4.243,P<0.05);与EA+BCCAO组比较,DHK+EA+BCCAO组EAAT2蛋白表达降低(t=4.692,P<0.05)。见图2A。免疫荧光双标染色结果:BCCAO组EAAT2蛋白表达较少,EA+BCCAO组和CXT+BCCAO组EAAT2表达增加,而DHK+EA+BCCAO组EAAT2表达减少。GFAP在EA+BCCAO和CXT+BCCAO组蛋白表达增加。EAAT2-GFAP荧光染色在EA+BCCAO和CXT+BCCAO组增强,说明两者蛋白表达增加。见图2B。3 讨论
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