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辛开苦降法代表方剂治疗溃疡性结肠炎细胞机制研究

发布时间:2021-03-11 07:36
  目的:应用辛开苦降法代表方剂喂养大鼠提取含药血清,以脂多糖(LPS)损伤Caco-2细胞的方式模拟溃疡性结肠炎(UC)模型。通过细胞活力,免疫荧光、Western blot等方法检测蛋白表达,探索辛开苦降法治疗溃疡性结肠炎细胞的作用机制。方法:以Caco-2细胞作为研究对象,采用脂多糖(LPS)制作细胞炎症模型。将20只WB大鼠分为:空白组、西药对照组(即柳氮磺吡啶组)、乌梅丸方药组、半夏泻心汤方药组、甘草泻心汤方药组。正常组给予饮水、进食,不给予任何药物、其余组给予柳氮磺吡啶、乌梅丸方药、半夏泻心汤方药、甘草泻心汤方药,连续给药7天。禁食禁水,提取血清。Caco-2细胞用脂多糖造模,用CCK-8检测细胞活力,选择最佳时间、最佳脂多糖(LPS)浓度后,同时给予含药血清,细胞分组为正常组、模型组、西药对照组(柳氮磺吡啶)、乌梅丸方药组、半夏泻心汤方药组、甘草泻心汤方药组。(1)用CCK-8检测细胞活力;(2)用免疫荧光法检测细胞TLR4/NF-κBp65蛋白的表达。(3)用Western blot法检测细胞中TLR4/NF-κBp65/IKB蛋白表达高低。结果:(1)细胞活力:相较于正常... 

【文章来源】:长春中医药大学吉林省

【文章页数】:55 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

辛开苦降法代表方剂治疗溃疡性结肠炎细胞机制研究


细胞计数示意图

Caco-2细胞


各组Caco-2细胞中TLR4表达比较

Caco-2细胞


图 5 各组 Caco-2 细胞中 NF-κB-P65 表达比较 小结本章实验用脂多糖(LPS)诱导 Caco-2 细胞炎症模型,应用辛开苦降法代方剂乌梅丸、半夏泻心汤和甘草泻心汤喂养大鼠 7 天后,分别提取血清后进行组干预溃疡性结肠炎细胞模型,用免疫荧光检测 TLR4/NF-κBp65 蛋白表达情。结果:与正常组相比较模型组 TLR4 NF-κBp65 蛋白表达较强,与模型组相对照组 TLR4 NF-κBp65 蛋白表达降低,辛开苦降法代表方剂组 TLR4 蛋白表也有不同程度的降低。

【参考文献】:
期刊论文
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博士论文
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[2]乌梅丸及其拆方对溃疡性结肠炎大鼠细胞因子、炎性介质及TLR4/NF-κB信号通路影响的实验研究[D]. 闫曙光.成都中医药大学 2012



本文编号:3076113

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