蒙药白益母草生物碱对血管平滑肌细胞表型的干预作用及机制研究

发布时间：2021-11-04 02:40

　　目的:白益母草为唇形科脓疮草属植物脓疮草的地上部分,为特色蒙药,具有抗炎、活血调经、清热利水等功效。为揭示白益母草的药理活性,拓展白益母草临床使用,奠定白益母草制剂开发的药理学研究基础。本研究分别从细胞和动物水平展开。首先建立稳定的血管平滑肌细胞VSMCs（vascular smooth muscle cells,VSMCs）分离培养方法,比较组织块贴壁法、混合酶消化法分离培养原代VSMCs在形态、生长、表型特征蛋白表达方面的差异,为在实验中VSMCs稳定可控奠定基础。以PDGF-BB、Angll、TNF-α和LPS作用于VSMCs,从诱导VSMCs增殖和表型转化两方面进行评价,筛选最佳的诱导因子和诱导条件,建立可靠的治疗血管增生性疾病药物的体外细胞筛选模型以及评价指标。评价益母草碱、水苏碱对PDGF-BB诱导的VSMCs增殖和表型转化的干预作用以及潜在的分子作用机制。建立机械剥脱小鼠股动脉内膜致增生模型,评价白益母草总生物碱、白益母草总黄酮、水苏碱和益母草碱对血管内膜增生的干预作用,明确可能存在的作用机制,以期为血管增生性疾病的治疗提供新的研究方向和研究思路。方法:1.贴块法和酶消化... 

【文章来源】：中央民族大学北京市 211工程院校 985工程院校

【文章页数】：111 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１－１?ＶＳＭＣｓ原代培养??Ａ：组织块贴壁法分离培养的ＶＳＭＣｓ；?Ｂ：酶消化法分离培养的ＶＳＭＣｓ??（Ａ１：培养第７?ｄ，少量细胞爬出；Ａ２：培养第１０?ｄ，细胞开始融合；Ａ３：传至第３代，细胞呈？？峰谷”??Ａ４：７，Ａ５：?（２００ｘ）至７Ｂ１：５，??

ａｔ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｔｉｍｅ?（ｍｅａｎ士ｓｅ，?ｎ＝３）??３．１．４?ＬＰＳ?诱导?ＶＳＭＣｓ?±曽殖??如图２－４所示，不同浓度（０，?０．０１，０．１，５，?１０ｐｇ／ｍＬ）ＬＰＳ作用不同时间于ＶＳＭＣｓ，??并没有明显的促增殖作用，仅５?｜ａｇ／ｍＬ的ＬＰＳ在７２ｈ，相较于正常组有明显的抑制作用（ｐ??＜?０．０５），因而在模型的筛选中，ＬＰＳ将不做考虑。??表２－４不同浓度和时间ＬＰＳ诱导ＶＳＭＣｓ增殖（（ｍｅａｎ±ｓｅ，?ｎ＝３）??Ｔａｂｌｅ?２－４?Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?ＶＳＭＣｓ?ｉｎｄｕｃｅｄ?ｂｙ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ??ｏｆ?ＬＰＳ?ａｔ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｔｉｍｅ?（ｍｅａｎ±ｓｅ，?ｎ＝３）??Ｃｅｌｌ?ｖｉａｂｉｌｉｔｙ?（％）??ＬＰＳ?（吨趾）?＾４ｈ——?ｉｈ?＿?￣?７２ｈ?—??０?１００．００?１００．００?１００．００??０．０１?１０１．７９?士０．１５?９９．７４±０．１８?９４．１２土?０．１１??０．１?１０２．２３?士?０．１１?１００．０５?土?０．１４?９７．１６土０．０４??５?丨?０〗．８１±０．１７?〗０Ｌ３１±０．１９?８７．１６土?０．０８＊???１０?１００．５５士?０．１１?９９．９５土?０．１４?９０．１５±０．０５??注：与对照组比较，＜?０．０５；?Ｎｏｔｅ：?＜?０．０５?ｖｓ?Ｃｏｎｔｒｏｌ?ｇｒｏｕｐ??２２??

３．２．１?Ａｎｇ?ＩＩ对ＳＭ?ｃｃ－ａｃｔｉｎ的表达的影响??用?０．５?ｎｍｏｌ／Ｌ?和?３?ｎｍｏｌ／Ｌ?浓度的?Ａｎｇｌｌ?处理?ＶＳＭＣｓ?２４?ｈ，４８?ｈ，７２?ｈ，ＳＭ?ａ－ａｃｔｉｎ?焚??光标记结果如图２－６所示。正常组ＶＳＭＣｓ形态多呈长梭形，骨架清晰，结构完整，而Ａｎｇ??ＩＩ处理组ａ－ａｃｔｍ的荧光强度和表达量并未显示出明显的减弱或降低，清晰可见微丝排列整??齐和细胞骨架完整，因而Ａｎｇｌ丨在ＶＳＭＣｓ表型转化方面未有明显的促进作用。??２４??

【参考文献】：
期刊论文
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博士论文
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硕士论文
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本文编号：3474832