电针对大脑中动脉梗阻大鼠神经再生影响
本文关键词:电针对大脑中动脉梗阻大鼠神经再生影响
【摘要】:目的:缺血性脑卒中其发病率普遍,患者致残率和死亡率较高使其成为一种严重威胁人类健康的疾病。尽管,随着医疗技术地进步和治疗手段的完善,缺血性脑卒中的死亡率已明显降低,但疾病导致的后遗症依然是患者的巨大负担。近年来的一些研究表明,缺血性脑卒中所导致的神经功能损伤是可逆的,损伤的组织和细胞是可以再生的。本研究使用大脑中动脉梗阻(MCAO)模型的SD大鼠作为实验对象,从电针改善缺血性脑卒中的神经损害症状着手,进而从组织水平及细胞水平观察电针对脑组织缺血的影响,结合当前内源性神经干细胞再生领域的研究进展,尝试探讨电针改善缺血性脑卒中症状,促进神经再生的可能机制。为针灸治疗缺血性脑卒中提供相应理论依据及临床参考。方法:将54只大鼠随机分为电针组、模型组和假手术组,每组18只,每组又分为3批,每批6只,分别在干预3天、7天、14天后取材。电针组、模型组采用Zealonga法制作大鼠右侧大脑中动脉梗阻(MCAO)模型,电针组大鼠选取“百会”穴、“大椎”穴进行电针,治疗时间20分钟,模型组不予针刺,假手术组仅予手术创伤处理。分别于造模后1天、造模后3天、造模后7天、造模后14天四个时间点对大鼠的神经。损害症状进行评分,7天组大鼠于取材后观察其脑部梗死灶大小,14天组大鼠于取材后使用免疫荧光双标法观察右侧室管膜中的巢蛋白(Nestin)及BrdU阳性细胞的数量,从而评价电针对于MCAO大鼠神经干细胞再生的影响,并尝试探讨其机制。实验数据采用SPSS 20.0进行统计学分析。成果:与模型组对比,电针组大鼠在造模7天及以内,其神经损害症状评分无显著性差异(P>0.05);造模14天之后,其神经损害症状评分差异具有显著性(P<0.01)。在缺血-再灌注损伤后7天,电针组(7d)大鼠的脑梗死灶体积相比模型组大鼠明显缩小,差异具有统计学意义(P<0.01)。缺血-再灌注损伤14天后,电针组(14d)大鼠的电针组大鼠室管膜中的Nestin及BrdU阳性细胞表达数量高于模型组(14d),差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:电针“百会”、“大椎”可以促进MCAO大鼠的神经学损害症状的恢复,其效果于大脑中动脉缺血-再灌注损伤后的7-14天时开始逐渐明显。电针“百会”、“大椎”能够缩小MCAO大鼠大脑梗死灶的范围。电针刺激“百会”、“大椎”能够促进MCAO大鼠大脑的侧脑室室管膜中的内源性神经干细胞的增殖。
【关键词】:电针 内源性神经干细胞 脑梗死
【学位授予单位】:广州中医药大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R245
【目录】:
- 摘要3-5
- Abstract5-9
- 引言9-11
- 第一章 文献综述11-17
- 1.1 传统中医对脑卒中的认识11-12
- 1.2 现代医学对缺血性脑卒中的认识12-13
- 1.2.1 ACI与远隔损害12
- 1.2.2 脑卒中与缺血-再灌注损伤12-13
- 1.3 中西医对缺血性脑卒中治疗的研究进展13-14
- 1.3.1 中医药治疗缺血性脑卒中的研究进展13-14
- 1.3.2 现代医学治疗缺血性脑卒中的研究进展14
- 1.3.3 针灸治疗缺血性脑卒中的研究进展14
- 1.4 神经再生的相关研究进展14-16
- 1.4.1 神经再生的概念14-15
- 1.4.2 神经再生的发生机制15
- 1.4.3 缺血-再灌注损伤与神经再生的关系15
- 1.4.4 Nogo-A抑制因子15
- 1.4.5 可塑性相关蛋白PRG515-16
- 1.5 总结与展望16-17
- 第二章 材料与方法17-21
- 2.1 实验材料17-18
- 2.1.1 实验动物选择17
- 2.1.2 主要实验试剂17
- 2.1.3 主要实验仪器设备17-18
- 2.1.4 实验场所18
- 2.2 实验方法18-21
- 2.2.1 动物购置及分组18
- 2.2.2 MCAO模型制作18-19
- 2.2.3 干预措施19
- 2.2.4 取材与组织固定19
- 2.2.5 TTC染色及脑梗死面积计算19-20
- 2.2.6 冰冻切片制作20
- 2.2.7 免疫荧光双标染色20
- 2.2.8 细胞计数20
- 2.2.9 统计学分析20-21
- 第三章 实验结果21-26
- 3.1 电针对MCAO大鼠神经学症状评分的影响21-23
- 3.1.1 不同干预措施大鼠在造模后1天时神经学症状评分21
- 3.1.2 不同组别大鼠在造模后第3、7、14天的神经学症状评分组间比较21-22
- 3.1.3 大鼠神经学症状评分的改善情况22-23
- 3.2 电针对MCAO大鼠脑梗死体积的影响23-24
- 3.2.1 三组实验大鼠(7d)在制备MCAO模型后7天的脑梗死体积23-24
- 3.2.2 统计结果24
- 3.3 电针对MCAO模型大鼠内源性神经干细胞增殖的作用24-26
- 3.3.1 三组大鼠(14d)造模后14天SEZ的BrdU/Nestin阳性细胞数24-25
- 3.3.2 统计结果25-26
- 第四章 讨论26-29
- 4.1 结果分析26
- 4.1.1 电针对MCAO模型大鼠神经学症状的作用26
- 4.1.2 电针对MCAO大鼠脑梗死体积的影响26
- 4.1.3 电针对MCAO模型大鼠内源性神经干细胞增殖的作用26
- 4.2 理论探讨26-28
- 4.2.1 穴位选择的意义26-27
- 4.2.2 研究结果的意义27-28
- 4.3 不足与展望28-29
- 结语29-30
- 参考文献30-33
- 附录33-38
- 致谢38-39
- 统计学审核证明39
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