高效液相色谱鉴别糖胺聚糖种类方法的建立和其应用.pdf文档全文免费阅读、在

  本文关键词：高效液相色谱鉴别糖胺聚糖种类方法的建立及其应用，由笔耕文化传播整理发布。

万方数据 万方数据 高效液相色谱鉴别糖胺聚糖种类方法的建立及其应用 摘要 本文利用反相高效液相色谱法建立了糖胺聚糖 glycosaminoglycans, GAGs 种类的鉴别方法。根据糖胺聚糖及其衍生物不同结构类型的单糖组成不同，采用 柱前衍生反相高效液相色谱法 reversed phase-high performance liquid chromatography, RP-HPLC 实现了甘露糖 mannose, Man 、葡萄糖胺 glucosamine, GlcN 、甘露糖胺 mannosamine, ManN 、半乳糖胺 galactosamine, GalN 、葡萄糖醛酸 glucouronic acid, GlcA 、艾杜糖醛酸 iduronic acid, IdoA 、 半乳糖醛酸 galacturonic acid, GalA 、葡萄糖 glucose, Glc 、半乳糖 galactose, Gal 和木糖 xylose, Xyl 单糖标准品混合物在C18 柱上的有效分离；利用不同 类型糖胺聚糖不完全酸水解产物中耐酸水解二糖结构不同，实现了对肝素/硫酸 乙酰肝素 heparin/heparan sulfate, Hp/HS 、硫酸软骨素/硫酸皮肤素 chondroitin sulfate/dermatan sulfate, CS/DS 和透明质酸 hyaluronic acid, HA 的鉴别。所建 立的方法成功用于依诺肝素钠中GlcN 和ManN 摩尔比及海洋鱼鳃组织中杂合硫 酸软骨素的分析测定，为低分子肝素的质量控制和海洋生物中复杂GAGs 的结构 类型鉴别提供了新的途径。 本文第一部分应用RP-HPLC 建立了GAGs 种类鉴别方法。首先，在实验室 前期工作的基础上，对柱前衍生RP-HPLC 方法的分离条件进行了优化，确定了 适于Man 、GlcN、ManN 、GalN、GlcA、IdoA 、GalA、Glc、Gal 和Xyl 单糖标 准品同时分离的最佳条件，，即在柱温30 ℃和流速1.0 mL/min 下，以流动相0.1 mol/L 磷酸盐缓冲液 pH 6.0 C 乙腈先在85 : 15 v : v 下洗脱25 min ，再在83 : 17 比例下洗脱25 min 。该方法从单糖组成的角度实现了对不同种类GAGs 的鉴 别。在此基础之上，对GAGs 不完全酸水解产物进行分析，发现了可以

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