联合心理应激致小鼠心肌Cx43表达变化的实验研究

发布时间：2017-10-23 10:00

  本文关键词：联合心理应激致小鼠心肌Cx43表达变化的实验研究

  更多相关文章： 心理应激 缝隙连接蛋白43(Cx43) 动物模型

【摘要】：目的:探讨心理应激对小鼠心肌Cx43表达的影响,旨在研究心理应激过程中心肌Cx43的分子生物学变化,为心理应激诱发心脏性猝死的病理诊断提供实验依据。方法:通过联合应激法(隔离应激、天敌应激、社会失败应激)建立心理应激小鼠模型,应激后通过旷场行为学检测及血清中CRH、ACTH及CORT水平的测定,进行心理应激动物模型评判。选取成功构建的联合心理应激小鼠,提取心肌组织进行常规HE染色、免疫组织化学染色、蛋白质免疫印迹法(Western Blot,WB)、RT-qPCR等技术检测心理应激后Cx43基因和蛋白的表达及分布变化。结果:小鼠经联合心理应激后,5 min旷场活动减少(心理应激组:水平运动110.00±42.30,垂直运动14.93±7.91,嗅探7.33±3.42;对照组:水平运动185.20±42.77,垂直运动31.93±10.33,嗅探14.27±4.35),血清中CRH、ACTH及CORT水平升高(心理应激组:CRH 39.97±3.97,ACTH 75.80±6.63,CORT209.16±16.80;对照组:CRH 26.74±3.66,ACTH 39.02±8.73,CORT 154.48±23.22),P0.05,差异均具有统计学意义。显微镜下观察,各组心肌细胞HE染色形态结构未见明显异常。免疫组织化学检测:对照组心肌Cx43阳性表达主要位于心肌闰盘处,分布均匀;联合心理应激组心肌闰盘中Cx43的阳性表达减少,细胞膜两侧阳性表达明显增多,且分布紊乱。各组平均光密度:心理应激组(0.11±0.01)、对照组(0.17±0.02),t=10.041,P0.05,差异具有统计学意义。Western Blot检测:各组Cx43表达水平分别为:心理应激组(3.90±0.78)、对照组(6.11±1.60)。t=4.018,P0.05,差异具有统计学意义。RT-qPCR检测:各组Cx43mRNA水平分别为:心理应激组(0.33±0.24)、对照组(0.26±0.07),T=154.00,P0.05,差异无统计学意义。结论:1.联合应激法可有效地构建心理应激小鼠模型。旷场活动及血清中CRH、ACTH、CORT水平能有效反映动物应激状态。2.Cx43在联合心理应激小鼠心肌组织中的表达显著降低,分布发生明显变化。
【关键词】：心理应激 缝隙连接蛋白43(Cx43) 动物模型
【学位授予单位】：贵州医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：D919
【目录】：

• 中文摘要4-5
• 英文摘要5-8
• 英文缩略词表8-9
• 0 引言9-13
• 1 材料与方法13-27
• 2 结果27-36
• 3 讨论36-42
• 4 结论42-44
• 参考文献44-50
• 综述50-72
• 参考文献62-72
• 作者简历72-73
• 致谢73-74
• 学位论文数据集74

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本文编号：1082785