采用流式细胞术分析过敏性休克大鼠嗜碱性粒细胞活化试验

发布时间：2017-11-01 05:12

  本文关键词：采用流式细胞术分析过敏性休克大鼠嗜碱性粒细胞活化试验

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【摘要】：目的应用流式细胞术(FCM)检测过敏性休克大鼠血中嗜碱性粒细胞CD63的表达，确定过敏性休克时嗜碱性粒细胞的活化情况，探讨FCM及嗜碱性粒细胞活化试验（BAT）在过敏性休克诊断中的应用价值。 方法40只Wistar-Hokkaido大鼠，雌雄不限，体重200～220g。将40只大鼠随机分为对照组和实验组，实验组包括致敏不激发组、过敏性休克死亡组、过敏性休克死后12h组、过敏性休克死后24h组，每组8只。采用卵蛋白腹腔注射建立过敏性休克大鼠动物模型，在休克死亡后的不同时间点提取各组大鼠右心室血及其肺组织。用三色免疫荧光标记流式细胞技术和CD63/CD45/CD203c组合抗体检测各组大鼠血嗜碱性粒细胞活化情况。以CD45和CD203c联合设门，CD63作为嗜碱性粒细胞活化标志物，检测各组大鼠血液中嗜碱性粒细胞表面CD63表达率，以代表各组大鼠血嗜碱性粒细胞的活化情况。提取的肺组织于10%的中性甲醛固定，，石蜡切片，常规HE染色，并采用免疫荧光染色法观察各组大鼠肺组织CD63的表达情况，BI-2000病理图像分析仪对图像进行分析，并采用SPSS17.0统计软件进行统计学分析。 结果（1）过敏性休克死亡组CD63的表达率为17.341±2.044%，休克死亡后12h组CD63的表达率为13.631±2.199%，休克死亡后24h组CD63的表达率为12.236±1.646,对照组CD63表达率为1.423±0.383%，致敏不激发组CD63表达率为1.465±0.337%。结果表明，过敏性休克死亡组、休克死亡后12h组、休克死亡后24h组CD63的表达率均明显高于对照组（P=0.000,P0.01），其差异具有统计学意义。致敏不激发组与对照组相比，结果没有显著性差异。而实验组中休克死亡组CD63表达率最高，随着死后经过时间的延长CD63的表达率逐渐降低。（2）免疫荧光染色法在显微镜下观察到CD63的阳性染色为绿色，观察到过敏性休克组都有CD63的表达，说明嗜碱性粒细胞发生活化，且随着时间的延长，阳性染色逐渐减少。 结论 （1）大鼠过敏性休克时血嗜碱性粒细胞存在异常活化。 （2）CD63可作为I型过敏反应中嗜碱性粒细胞特异性激活标志物，为过敏性疾病的诊断提供辅助的检测指标。 （3）嗜碱性粒细胞活化试验有望作为过敏反应体内试验的补充，为临床诊断及法医学鉴定过敏性休克提供新的方法和途径。
【关键词】：过敏性休克 嗜碱性粒细胞活化试验 流式细胞术 CD63 CD203c
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：D919.1
【目录】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 英文缩略语9-10
• 前言10-12
• 材料和方法12-15
• 结果15-18
• 讨论18-21
• 小结21-22
• 附图22-23
• 参考文献23-26
• 综述26-33
• 参考文献30-33
• 个人简介33-34
• 致谢34

【参考文献】

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1 徐

本文编号：1125377