低拷贝DNA模板检验方法探讨
本文选题:法医物证学 + 低拷贝模板 ; 参考:《中国法医学杂志》2009年06期
【摘要】:目的探讨扩增及检测方法对低拷贝DNA模板分型检测灵敏度的影响。方法Control DNA 9947A按比例稀释,采用IdentifilerTM和DNATyper15TM试剂扩增,循环参数设置为28和28+6个循环,平行扩增3次,分别单独检测及3次合并检测,使用310及3130分析仪检测。结果28+6个循环的基因座检出率高于28个循环;等位基因不平衡及丢失与基因座没有特异性的关联,随着DNA模板量的减少,等位基因不平衡及丢失增多;将3次扩增产物混合后检测,等位基因不平衡及丢失情况减少,分型正确率增高。结论模板DNA分3次扩增后混合检测、循环数为28+6,可提高低拷贝模板基因座的检出率。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of amplification and detection methods on the sensitivity of low copy DNA template typing. Methods Control DNA 9947A was diluted in proportion and amplified with IdentifilerTM and DNATyper15TM reagents. The cycle parameters were set at 28 and 286 cycles, and three times parallel amplification. Results the detection rate of allelic loci in 286 cycles was higher than that in 28 cycles. There was no specific association between allelic imbalance and loss of alleles, and with the decrease of DNA templates, the imbalance and loss of alleles increased. The results showed that the allelic imbalance and loss were decreased, and the accuracy of typing was increased. Conclusion the mixed detection of template DNA by 3 times amplification can increase the detection rate of low copy template loci.
【作者单位】: 中国政法大学证据科学教育部重点实验室;中国人民公安大学;公安部物证鉴定中心;
【基金】:北京市教育委员会共建项目建设计划资助
【分类号】:D919
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【共引文献】
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,本文编号:2041699
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