死亡大鼠组织中总RNA提取的质量控制及方法评价

发布时间：2018-08-18 07:57

【摘要】：目的探讨不同商品化试剂盒在提取组织总RNA过程中的优劣与适用范围,为实验室的质量控制提供依据。方法采用以膜提取技术为基础(SV total RNA isolation system)和以异硫氰酸胍/苯酚法为原理(TRIzol总RNA提取试剂盒)的两种试剂盒对死亡大鼠心、肝、脾、肺、肾、脑组织进行总RNA的提取与评价鉴定,并使用琼脂糖变性凝胶电泳和2100芯片生物分析仪对提取的总RNA进行完整性鉴定和质量控制评价。结果两种商品化试剂盒提取的总RNA纯度与得率均可满足实验要求。各组织脏器中总RNA得率依次为脾脏肝脏肾脏大脑肺脏心脏。结论与TRIzol总RNA提取试剂盒相比,SV Total RNA Isolation System提取时对操作人员熟练度要求较低,2100芯片生物分析仪有望替代凝胶电泳技术用于总RNA提取时的质量控制。
[Abstract]:Objective to explore the advantages and disadvantages of different commercial kits in the process of extracting tissue total RNA and to provide basis for quality control in laboratory. Methods the heart, liver, spleen, lung and kidney of dead rats were treated with (SV total RNA isolation system) based on membrane extraction technique and guanidine isothiocyanate / phenol method (TRIzol total RNA extraction kit). The total RNA was extracted and evaluated in brain tissue, and the integrity and quality control of total RNA were evaluated by agarose denaturing gel electrophoresis and 2100 microarray bioanalyzer. Results the purity and yield of total RNA extracted by two commercial kits could meet the experimental requirements. The yield rate of total RNA was spleen, liver, kidney, brain, lung and heart. Conclusion compared with the TRIzol total RNA extraction kit, SV Total RNA Isolation System extraction requires lower proficiency of the operators. The bioanalyser can be used to substitute gel electrophoresis technology for the quality control of total RNA extraction.
【作者单位】： 山西医科大学法医学院;太原市公安局;广州市公安局交警大队;
【基金】：山西省高校科技研究开发项目(20051224) 山西医科大学博士启动基金(03200716)
【分类号】：D919

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