腐败血中若干种毒品及其代谢物的检验方法研究

发布时间：2020-05-15 02:20

【摘要】：在公安工作实践中,涉毒生物检材越来越复杂,给检验工作带来了许多挑战,也为法庭科学鉴定人员开发和建立新的检材处理方法提出了更高的要求。其中,由于案件发现不及时、检材储存不当等原因,可能会导致血、肝、骨髓等生物检材发生腐败,对腐败生物检材的处理一直是法庭毒物学领域的难题。腐败生物检材由于基质复杂,内源性物质较新鲜生物检材更多,采用常规的液液萃取和固相萃取进行前处理,往往回收率低、基质效应高、检出限高,无法满足法庭毒物学的分析检验要求。因此,急需建立一种适用于腐败生物检材的检验方法。本文以腐败血作为研究基质,针对腐败血的特点,采用改良的QuEChERS(quick,easy,cheap,effective,rugged,and safe)前处理方法,结合超高效液相色谱-串联质谱检测,建立了腐败血中甲基苯丙胺等11种毒品及其代谢物的QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱检验方法。主要研究内容如下:1.建立了腐败血中甲基苯丙胺、苯丙胺、3,4-亚甲二氧基甲基苯丙胺(MDMA)、3,4-亚甲二氧基苯丙胺(MDA)、氯胺酮、去甲氯胺酮、4-甲基甲卡西酮、甲卡西酮、芬太尼等9种毒品及代谢物的QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱检验方法。500.0μL腐败血中加入2 mL乙腈-水混合溶液(4:1,v/v),60 mg无水乙酸钠(NaAc)和180 mg无水硫酸镁(MgSO_4)盐析促进相分离,最后经25 mg N-丙基乙二胺(PSA)和25 mg MgSO_4净化。选择ZORBAX Eclipse Plus C18色谱柱分离,0.1%(v/v)甲酸-水(5mM乙酸铵)缓冲液和甲醇作为流动相进行梯度洗脱。电喷雾电离,正离子模式,多反应监测(MRM)扫描。QuEChERS方法能够有效去除腐败血中的内源性物质,9种毒品的线性关系良好,相关系数(r~2)"g0.9930,检出限0.1~5.0 ng/mL,定量限为0.5~5.0 ng/mL。对腐败10天、20天和30天的腐败血在3种加标水平(5.0ng/mL、50.0 ng/mL和100.0 ng/mL)下检验,9种毒品的回收率在80.27%~119.05%之间,日内和日间精密度(RSD)均小于15%,基质效应为79.95%~116.91%。2.建立了腐败血中吗啡和6-单乙酰吗啡的QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱检验方法。500.0μL腐败血中加入2 mL乙腈-水混合溶液(4:1,v/v),30 mg无水氯化钠(NaCl)和60 mg无水MgSO_4盐析促进相分离,最后经25 mg PSA和25 mg MgSO_4净化。选择ZORBAX Eclipse Plus C18色谱柱分离,0.01%氨水(v/v)和乙腈作为流动相进行梯度洗脱。电喷雾电离,正离子模式,多反应监测(MRM)扫描。结果表明,吗啡和6-单乙酰吗啡线性范围为5.0~200.0 ng/mL,相关系数(r~2)"g0.9957,检出限均为1.0 ng/mL,定量限均为5.0 ng/mL。对腐败10天、20天和30天的腐败血在3种加标水平(5.0 ng/mL、100.0 ng/mL和200.0 ng/mL)下检验,吗啡和6-单乙酰吗啡的回收率为81.03%~104.46%,日内和日间精密度(RSD)均小于12.3%,基质效应为83.04%~107.61%。3.通过大鼠动物实验和实际案例检材的检验,验证了本文建立的方法的可行性与有效性。
【图文】：

分离效果和响应强度均较好，色谱峰峰形对称、峰宽窄、干扰峰v/v）甲酸-水（5mM 乙酸铵）缓冲液（A 相）和甲醇（B 相）作为较了4 种梯度洗脱程序分离目标物的效果。（1）0.0~0.5 min，1n，10%B~25%B；2.0~4.5 min，25~80%B；4.5~5.0 min，80%B~95n，95%B；6.0～7.0 min，95%B～10%B。（2）0.0~0.2 min，2%B~25%B；1.0~4.0 min，25%B；4.0～7.5 min，25%B～70%B；7.5～9～8.0 min，70%B～2%B；8.0～9.0 min，2%B。（3）0.0~0.2 minn，2%B~25%B；1.0~4.0 min，，25%B；4.0～7.5 min，25%B～80%B；7.9～8.0 min，80%B～2%B；8.0～9.0 min，2%B。（4）0.0~0~4 min，2%B~25%B；4~6.5 min，25%B～80%B；6.5~7 min，80%～2%B；7.1～8min，2%B。实验结果显示，第 4 种梯度洗脱程序对，且能够在更短的时间内完成对各物质的分离检测。9 种毒品的色

图 2.2 甲卡西酮（20.00 ng/mL）的 MRM 色谱图g. 2.2 Multiple-reaction monitoring (MRM) chromatograms of methc(20.00 ng/mL)2.79
【学位授予单位】：中国人民公安大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：D918.9;O657.63

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本文编号：2664314