松果菊苷通过抑制Wnt/β-catenin信号通路发挥抗乳腺癌效应的作用机制研究
发布时间：2021-03-02 05:37
目的本课题拟通过体内、体外实验证实松果菊苷抗乳腺肿瘤的能力,并探究其可能的作用机制。方法首先,通过采用MTT试验,克隆形成试验,划痕试验,侵袭以及迁移试验,以不同浓度的松果菊苷处理乳腺癌细胞系MDA-MB-231和MDA-MB-468,综合判断松果菊苷的抗乳腺肿瘤能力。然后,通过采用荧光素酶报告基因系统,检测松果菊苷对不同信号通路的抑制或激活效应。并在此结果基础上,我们以不同浓度的松果菊苷处理MDA-MB-231和MDA-MB-468细胞,收集细胞并提取蛋白,western blotting检测Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白表达;同时收集细胞提取RNA,并反转录后采用实时荧光定量PCR检测相关靶基因的表达,综合判断松果菊苷对Wnt/β-catenin信号通路的抑制效果。进一步,我们以MDA-MB-231裸鼠移植瘤模型评估松果菊苷的体内抗肿瘤能力,并验证了其对Wnt/β-catenin信号通路的抑制效果。结果通过采用MTT试验,克隆形成试验,划痕试验,侵袭以及迁移试验,我们发现松果菊苷能呈浓度依赖性的抑制MDA-MB-231和MDA-MB-468细胞系细胞增殖能力,细胞侵袭以...
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：72 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
松果菊苷抑制MDA-MB-231和MDA-MB-468乳腺癌细胞系细胞活力
重庆医科大学博士研究生学位论文16力，结果如图5C、5D所示。因此我们得到结论，松果菊苷能在体外显著抑制乳腺癌细胞转移能力。图2.松果菊苷抑制MDA-MB-231和MDA-MB-468乳腺癌细胞系细胞增殖能力。分别于96孔板接种MDA-MB-231和MDA-MB-468乳腺癌细胞（3×103个细胞每孔），按图示浓度松果菊苷处理24h或48h（n=4），并于收集细胞前4h加入EdU，收集细胞检测EdU含量。A.松果菊苷处理MDA-MB-231细胞24h；B.松果菊苷处理MDA-MB-468细胞24h。C.松果菊苷处理MDA-MB-231细胞48h。D.松果菊苷处理MDA-MB-468细胞48h。p*<0.05。
重庆医科大学博士研究生学位论文17图3.松果菊苷抑制MDA-MB-231乳腺癌细胞系克隆形成。A．于6孔板中每孔加入1×103MDA-MB-231细胞，同时加入0、50、100μM松果菊苷处理8天，撤去培养基，多聚甲醛固定细胞后，用0.1%结晶紫染色，并拍照。B.统计细胞个数大于50的克隆数，并计算相对克隆形成比例。n=6，p*<0.05。2.4松果菊苷促进乳腺癌细胞系MDA-MB-231和MDA-MB-468细胞凋亡相比于正常细胞，肿瘤细胞往往更容易耐受凋亡，而通过促进肿瘤细胞凋亡对抑制肿瘤生长具有十分重要的意义。Caspase-3是一种介导细胞凋亡十分重要的蛋白分子。在发生凋亡时，Caspase-3会发生切割，生成Cleavedcaspase-3，因此Cleavedcaspase-3常用于评判细胞凋亡水平[63,64]。已有研究表明，松果菊苷能促进结直肠癌细胞凋亡发生[19]，而松果菊苷能否引起乳腺癌细胞凋亡发生尚未报道。因此，我们评估了松果菊苷是否具有促进乳腺癌细胞凋亡的能力，通过采用不同浓度的松果菊苷分别处理乳腺癌细胞系MDA-MB-231和MDA-MB-468，24h
【参考文献】：
期刊论文
[1]Garlic-derived compound S-allylmercaptocysteine inhibits hepatocarcinogenesis through targeting LRP6/Wnt pathway[J]. Jia Xiao,Feiyue Xing,Yingxia Liu,Yi Lv,Xiaogang Wang,Ming-Tat Ling,Hao Gao,Songying Ouyang,Min Yang,Jiang Zhu,Yu Xia,Kwok-Fai So,George L.Tipoe. Acta Pharmaceutica Sinica B. 2018(04)
[2]松果菊苷通过上调miR-34a减轻心肌细胞缺血再灌注损伤[J]. 蔡华,张领,李满生,李新峰. 中国循证心血管医学杂志. 2018(06)
[3]松果菊苷对醋酸铅致生精功能损伤小鼠的治疗作用[J]. 赵东海,赵贵芳,马帅,陈雪,王莺,康晶. 上海中医药杂志. 2018(06)
[4]松果菊苷对2型糖尿病小鼠血脂代谢的影响[J]. 张雪,郝亚荣,唐凤娟. 医学研究杂志. 2018(03)
[5]松果菊苷对低氧性肺动脉高压大鼠血管生长因子的影响[J]. 刘洋,罗兰,代红燕,屠鹏飞,陶义存. 中南药学. 2016(03)
[6]松果菊苷对鱼藤酮诱导的大鼠帕金森病模型黑质多巴胺能神经元的选择性保护作用(英文)[J]. 封新影,朱敏,张琦琪,陈依萍,李文伟. 中西医结合学报. 2012(07)
[7]松果菊苷对帕金森病模型小鼠黑质纹状体蛋白表达影响的双向电泳分析[J]. 赵欣,蒲小平,耿兴超. 中国药理学通报. 2008(01)
[8]松果菊苷改善SAM-P/8小鼠学习记忆能力作用机制初探[J]. 田枫,张阔,康爱君,姜勇,周淑佩,郑振辉. 实验动物科学与管理. 2006(02)
[9]松果菊苷抗衰老作用机理研究[J]. 古力努尔·木特列夫,雷丽,屠鹏飞,果德安,卢景芬. 生物物理学报. 2004(03)
[10]用脉冲辐解法研究海胆苷对DNA碱基损伤的修复作用[J]. 郑荣梁,李雯艳,姜岳,林念芸. 中国科学C辑:生命科学. 1996(06)
硕士论文
[1]松果菊苷抑制蛋白质淀粉样纤维化及对UVB所致皮肤损伤的保护作用研究[D]. 张迪.第四军医大学 2015
本文编号：3058712
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：72 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
松果菊苷抑制MDA-MB-231和MDA-MB-468乳腺癌细胞系细胞活力
重庆医科大学博士研究生学位论文16力，结果如图5C、5D所示。因此我们得到结论，松果菊苷能在体外显著抑制乳腺癌细胞转移能力。图2.松果菊苷抑制MDA-MB-231和MDA-MB-468乳腺癌细胞系细胞增殖能力。分别于96孔板接种MDA-MB-231和MDA-MB-468乳腺癌细胞（3×103个细胞每孔），按图示浓度松果菊苷处理24h或48h（n=4），并于收集细胞前4h加入EdU，收集细胞检测EdU含量。A.松果菊苷处理MDA-MB-231细胞24h；B.松果菊苷处理MDA-MB-468细胞24h。C.松果菊苷处理MDA-MB-231细胞48h。D.松果菊苷处理MDA-MB-468细胞48h。p*<0.05。
重庆医科大学博士研究生学位论文17图3.松果菊苷抑制MDA-MB-231乳腺癌细胞系克隆形成。A．于6孔板中每孔加入1×103MDA-MB-231细胞，同时加入0、50、100μM松果菊苷处理8天，撤去培养基，多聚甲醛固定细胞后，用0.1%结晶紫染色，并拍照。B.统计细胞个数大于50的克隆数，并计算相对克隆形成比例。n=6，p*<0.05。2.4松果菊苷促进乳腺癌细胞系MDA-MB-231和MDA-MB-468细胞凋亡相比于正常细胞，肿瘤细胞往往更容易耐受凋亡，而通过促进肿瘤细胞凋亡对抑制肿瘤生长具有十分重要的意义。Caspase-3是一种介导细胞凋亡十分重要的蛋白分子。在发生凋亡时，Caspase-3会发生切割，生成Cleavedcaspase-3，因此Cleavedcaspase-3常用于评判细胞凋亡水平[63,64]。已有研究表明，松果菊苷能促进结直肠癌细胞凋亡发生[19]，而松果菊苷能否引起乳腺癌细胞凋亡发生尚未报道。因此，我们评估了松果菊苷是否具有促进乳腺癌细胞凋亡的能力，通过采用不同浓度的松果菊苷分别处理乳腺癌细胞系MDA-MB-231和MDA-MB-468，24h
【参考文献】：
期刊论文
[1]Garlic-derived compound S-allylmercaptocysteine inhibits hepatocarcinogenesis through targeting LRP6/Wnt pathway[J]. Jia Xiao,Feiyue Xing,Yingxia Liu,Yi Lv,Xiaogang Wang,Ming-Tat Ling,Hao Gao,Songying Ouyang,Min Yang,Jiang Zhu,Yu Xia,Kwok-Fai So,George L.Tipoe. Acta Pharmaceutica Sinica B. 2018(04)
[2]松果菊苷通过上调miR-34a减轻心肌细胞缺血再灌注损伤[J]. 蔡华,张领,李满生,李新峰. 中国循证心血管医学杂志. 2018(06)
[3]松果菊苷对醋酸铅致生精功能损伤小鼠的治疗作用[J]. 赵东海,赵贵芳,马帅,陈雪,王莺,康晶. 上海中医药杂志. 2018(06)
[4]松果菊苷对2型糖尿病小鼠血脂代谢的影响[J]. 张雪,郝亚荣,唐凤娟. 医学研究杂志. 2018(03)
[5]松果菊苷对低氧性肺动脉高压大鼠血管生长因子的影响[J]. 刘洋,罗兰,代红燕,屠鹏飞,陶义存. 中南药学. 2016(03)
[6]松果菊苷对鱼藤酮诱导的大鼠帕金森病模型黑质多巴胺能神经元的选择性保护作用(英文)[J]. 封新影,朱敏,张琦琪,陈依萍,李文伟. 中西医结合学报. 2012(07)
[7]松果菊苷对帕金森病模型小鼠黑质纹状体蛋白表达影响的双向电泳分析[J]. 赵欣,蒲小平,耿兴超. 中国药理学通报. 2008(01)
[8]松果菊苷改善SAM-P/8小鼠学习记忆能力作用机制初探[J]. 田枫,张阔,康爱君,姜勇,周淑佩,郑振辉. 实验动物科学与管理. 2006(02)
[9]松果菊苷抗衰老作用机理研究[J]. 古力努尔·木特列夫,雷丽,屠鹏飞,果德安,卢景芬. 生物物理学报. 2004(03)
[10]用脉冲辐解法研究海胆苷对DNA碱基损伤的修复作用[J]. 郑荣梁,李雯艳,姜岳,林念芸. 中国科学C辑:生命科学. 1996(06)
硕士论文
[1]松果菊苷抑制蛋白质淀粉样纤维化及对UVB所致皮肤损伤的保护作用研究[D]. 张迪.第四军医大学 2015
本文编号：3058712
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