溺死相关浮游生物基因座的复合扩增体系

发布时间：2021-05-21 16:59

　　目的构建溺死相关浮游生物基因座的复合扩增体系,验证体系特异性并评估其在法医溺死诊断中的应用价值。方法针对溺死相关浮游生物同源基因序列,设计特异性引物,并用FAM、HEX、TAMRA、ROX、SIZ荧光染料分组标记,构建复合扩增体系;进行体系特异性验证;以16例实验猪样本评估体系检验效能;复合扩增体系、硅藻形态学MD-VF-Auto SEM检测法及硅藻rbc L基因PCR-CE检测法分别检测28例案件样本,比较分析应用效果。结果该复合扩增体系共包含14个基因座,可特异性扩增35种浮游藻类和3种浮游细菌,人、3种人体共生菌及8种浮游细菌均为阴性。以该体系检测溺死实验猪,阳性率为90%,非溺死实验猪均未检出;检测溺死案件样本,阳性率为96%,非溺死案件均未检出。复合扩增体系与MD-VF-Auto SEM法检测案件尸体肺、肝和肾的阳性率均不具有统计学差异（P> 0.05）,但其与硅藻rbcL基因PCR-CE法检测案件肝和肾的阳性率均具有统计学差异（P<0.05）。结论本文针对多种溺死相关浮游生物14个基因建立的复合扩增体系,具备多种靶物种的特异性遗传标记,且所需检材量小,提高了检测... 

【文章来源】：中国法医学杂志. 2020,35(01)CSCD

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 样本及仪器
        1.1.1 特异性检测样本
        1.1.2 测试样本
        1.1.3 试剂仪器
    1.2 方法
        1.2.1 复合扩增体系的构建
        1.2.2 体系特异性验证
        1.2.3 实验猪评估体系检验效能
        1.2.4 实际案例分析体系应用效果
2 结果
    2.1 体系特异性结果
    2.2 实验猪检测结果
    2.3 28例案件应用效果
3 讨论
    3.1 复合扩增体系特异性分析
    3.2 复合扩增体系的应用评估


【参考文献】：
期刊论文
[1]实时荧光定量PCR检测硅藻UPA基因在溺死诊断中的研究[J]. 刘向东,刘超,徐曲毅,彭帆,胡孙林,麦柏盛,刘宏,李越,胡慧英,徐际超,张书睿,韩雅莉,谭竹钧.  中国法医学杂志. 2018(02)
[2]溺死相关硅藻rbcL基因检测技术研究[J]. 彭帆,刘超,徐曲毅,刘向东,赵建,刘宏,李越,胡孙林,宋旭恒,李明,韩雅莉.  重庆医科大学学报. 2018(01)
[3]PCR毛细管电泳法检测嗜水气单胞菌gyrB和16SrRNA基因:溺死诊断方法[J]. 麦柏盛,徐曲毅,刘超,赵建,韩雅莉.  南方医科大学学报. 2016(11)
[4]COX1、12SrRNA、16SrRNA基因复合扩增种属鉴定研究[J]. 蒙晓平,白晓军,梅燕,曹锡梅,张潮,成振,荆丽红,郭大玮,张更谦.  中国法医学杂志. 2015(06)
[5]嗜水气单胞菌气溶素和溶血素基因的克隆与结构预测[J]. 刘明智,叶星,田园园,邓国成,马冬梅,白俊杰.  江西农业大学学报. 2010(02)



本文编号：3200062