靶向SUR2B/Kir6.1通道防治慢性心力衰竭分子机制的研究

发布时间：2021-04-13 10:14

　　慢性心力衰竭（chronic heart failure,CHF）是心血管疾病中高致死性疾病。高血压、心肌缺血（MI）、心律失常、药物（异丙肾上腺素,ISO）和其他常见的心血管疾病由于长期压力超负荷（PO）、心肌损伤和心肌收缩力的减弱等不同诱因,超出心脏的代偿能力,最终可导致心功能减弱,发展为慢性心力衰竭。目前,临床常用的CHF防治药物存在药物毒性大、治疗窗口窄、长期服用增加死亡率等严重不良反应。因此,寻求能够防治慢性心力衰竭的新结构、新靶点药物以及新的治疗途径具有重要的意义。内皮细胞分布于血管壁的表面,是整个心血管系统的重要功能单元。它不仅是血管的第一道屏障,而且本身也能释放生物活性物质,参与物质的交换,调节血管的紧张度和血管的生成。内皮细胞的完整性与心血管疾病关系密切,内皮功能紊乱可促进心血管疾病的发生;心血管疾病的发生发展可导致内皮功能的紊乱,加速疾病的发展,两者相辅相成。内皮功能紊乱主要表现为内皮细胞释放血管舒缩因子的失衡,如NO和内皮素。内皮功能紊乱在CHF病理过程起着关键的作用。文献报道,CHF病人伴有NO和内皮素失衡,NO是心血管重塑的重要调节剂,ET-1是心肌肥大和CH... 

【文章来源】：中国人民解放军军事科学院北京市

【文章页数】：100 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
缩略词表
中文摘要
英文摘要
前言
材料与方法
    1 材料
        1.1 实验动物
        1.2 试剂与仪器
    2 方法
        2.1 实验动物分组
        2.2 大鼠血流动力学检测
        2.3 心肌肥厚指数的测定
        2.4 心肌病理学观察
        2.5 NT-proBNP、NO与ET-1 的测定
        2.6 iNOS、eNOS和ET-1 mRNA的RT-PCR检测
        2.7 iTRAQ样品准备、酶解和iTRAQ标记
        2.8 SCX分离
        2.9 基于Triple TOF 5600 的LC-ESI-MS/MS分析
        2.10 信息处理流程和分析
        2.11 候选蛋白的ELISA验证
        2.12 细胞的培养和NO的测定
        2.13 Western blot（WB）测定细胞VASP的表达
        2.14 RT-PCR检测心肌组织microRNA表达
        2.15 miR13p的生物信息学预测
        2.16 qRT-PCR检测Nat对RPCMEC miR13p和ET-1 的影响
        2.17 miR13p靶点的验证
        2.18 慢病毒载体的构建和包装
        2.19 miR13p对内皮细胞ET-1 的影响
        2.20 统计学分析方法
实验结果
    第一部分 靶向SUR2B/Kir6.1 通道新型KCOs纳他卡林对CHF的防治作用
        1. 纳他卡林对体重、血压和心率的影响
        2. 纳他卡林对血流动力学指标的影响
        3. 纳他卡林对心脏重塑的影响
        4. 纳他卡林对大鼠心力衰竭标志物的影响
        5. 纳他卡林对心力衰竭时的内皮功能的改善
        结语
    第二部分 基于iTRAQ技术分析靶向SUR2B/Kir6.1 通道纳他卡林防治CHF的分子机制
        1. 蛋白质表达谱概述
        2. 鉴定的差异蛋白
        3. 差异蛋白的GO功能富集分析
        4. 差异蛋白的Pathway分析
        5. 蛋白与蛋白之间相互作用
        6. 关键蛋白的验证
        7. eNOS/VASP途径的证实
        结语
    第三部分 miR13p在纳他卡林防治CHF中的作用及其分子途经
        1. Nat对心肌组织特异性miRNAs表达的影响
        2. miR13p靶点的预测和生物信息学分析
        3. Nat和Ipt对RPCMEC miR13p和ET-1 mRNA表达的影响
        4. miR13p与靶基因ET-1 mRNA结合的验证
        5. 慢病毒载体的构建和包装
        6. 稳转慢病毒载体RPCMEC的建立
        7. 感染RPCMEC miR13p表达
        8. miR13p与ET-1 相互作用验证
        结语
讨论
    1. 靶向SUR2B/Kir6.1 开放剂抗CHF的药理学证据
        1.1 Nat和Ipt改善CHF具有相同的药理学效果
        1.2 KCB Gli拮抗SUR2B/Kir6.1 开放剂Nat的作用
        1.3 激活SUR2B/Kir6.1 通道的KCOs与ACEI Lis作用机制不同
    2. 基于iTRAQ技术揭示Nat抗CHF的分子机制
    3. microRNA13 抑制ET-1 在Nat改善CHF中的作用
全文结论
参考文献
个人简历
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]ATP敏感钾通道调节血管张力的分子机制（英文）[J]. 施巍巍,杨洋,石云,姜淳.  生理学报. 2012(01)
[2]埃他卡林对大鼠尾动脉平滑肌细胞[Ca2+]i,PKA和PKC活性的影响[J]. 高敏,王玉,汪海.  药学学报. 2005(10)



本文编号：3135110