微滴喷射玻璃化的过程损伤分析及保护剂优化

发布时间：2023-04-08 22:44

　　微滴喷射玻璃化保存系统产生的微滴尺寸较小,在较低浓度的低温保护剂条件下即可实现玻璃化。本文采用微滴喷射玻璃化保存系统对Hep G2细胞进行玻璃化保存,研究保护剂加载过程、喷射过程、接收过程及玻璃化/复温过程对细胞造成的损伤程度,并通过降低保护剂中Me₂SO浓度、添加适量海藻糖来优化保护剂配方。结果表明,微滴喷射玻璃化保存各过程对细胞均有损伤,保护剂加载过程、喷射过程、玻璃化及复温过程对细胞造成的损伤较大,薄片接收过程对细胞造成的损伤小。另外,随着保护剂中Me₂SO浓度的降低,低温保存后的细胞活性明显降低;保护剂浓度相同时,玻璃化保存效果较慢速冷冻效果好;适量的海藻糖能够起到增强低温保存效果的作用,过量则起到降低作用;以5%Me₂SO+0. 3 mol/L海藻糖作为低温保护剂玻璃化保存细胞时,细胞存活率达(92. 42±0. 95)%,24 h贴壁率达到(95. 64±1. 03)%,微滴喷射玻璃化效果最好。

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料与设备
    1.2 微滴喷射玻璃化保存系统
    1.3 细胞冷冻方法
    1.4 细胞活性判断方法
        1.4.1 台盼蓝染色计算细胞存活率
        1.4.2 24 h贴壁率
    1.5 微滴喷射玻璃化各过程的损伤分析
    1.6 低温保护剂的优化
2 结果与讨论
    2.1 喷射各过程对细胞造成的损伤
    2.2 降低Me2SO浓度对细胞活性的影响
    2.3 添加海藻糖对细胞活性的影响
3 总结与展望



本文编号：3786606