携带靶向抑制囊泡谷氨酸转运体3干扰RNA的单纯疱疹病毒载体可减弱小鼠触诱发痛（英文）

发布时间：2018-05-07 21:08

  本文选题：RNA干扰 + 囊泡谷氨酸转运体　； 参考：《南方医科大学学报》2016年11期

【摘要】：目的构建含靶向囊泡谷氨转运体3(Vglut 3)的特异性RNA干扰序列的1型单纯疱疹病毒载体,并观察其经坐骨神经接种后缓解小鼠触诱发痛的作用。方法首先构建携带Vglut3特异性短发卡RNA(sh RNA)的重组1型单纯疱疹病毒载体。将重组载体通过坐骨神经接种,检测其在小鼠触诱发痛模型中的镇痛效果。分别用von Frey丝和Hargreaves'实验测试小鼠的机械性触诱发痛和热痛敏,通过免疫组织化学和免疫印迹法评估背根神经节中VGLUT3的表达。结果成功构建了重组1型单纯疱疹病毒载体HSV-1-shvglut3。经坐骨神经接种后,该载体可将Vglut3特异性sh RNA逆行运输至背根神经节。触诱发性疼痛模型小鼠接种HSV-1-shvglut3载体2周后,背根神经节中VGLUT3表达下调,小鼠的机械性缩爪阈值回升至大致基础水平。这种镇痛效应持续超过两个星期,未出现明显的系统副作用,且小鼠热痛阈没有明显变化。结论表达于背根神经节中的Vglut3是一个针对触诱发痛极具前景的干扰靶点。我们构建的HSV-1-shvglut3载体通过外周接种,对触诱发痛有特异、安全、高效、持久的镇痛作用。
[Abstract]:Objective to construct a herpes simplex virus type 1 vector containing a specific RNA interference sequence targeting vesicular glutamine transporter (3(Vglut 3) and to observe the effect of herpes simplex virus (HSV 1) inoculated with sciatic nerve on relieving the tactile pain in mice. Methods Recombinant herpes simplex virus type 1 vector carrying Vglut3 specific short hairpin RNA(sh was constructed. The recombinant vector was inoculated with sciatic nerve to detect the analgesic effect of the recombinant vector in the mouse model of touch-induced pain. The expression of VGLUT3 in dorsal root ganglion (DRG) was evaluated by immunohistochemistry and immunoblotting, respectively, by using von Frey wire and Hargreaves' test. Results the recombinant herpes simplex virus (HSV-1-shvglut3) vector was successfully constructed. After sciatic nerve inoculation, Vglut3 specific sh RNA could be transported retrograde to dorsal root ganglion. The expression of VGLUT3 in dorsal root ganglion was down-regulated and the mechanical claw threshold increased to the basic level 2 weeks after inoculation with HSV-1-shvglut3 carrier. The analgesic effect lasted for more than two weeks without obvious systemic side effects and no significant changes in thermal pain threshold in mice. Conclusion Vglut3 expressed in dorsal root ganglion is a promising target for tactile pain. The HSV-1-shvglut3 vector we constructed has a specific, safe, efficient and lasting analgesic effect on Touch induced pain through peripheral inoculation.
【作者单位】： 华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉科;中南民族大学生物医学工程学院国家民族事务委员会认知科学重点实验室膜离子通道医学实验室;武汉大学中南医院麻醉科;华中科技大学同济医学院附属同济医院生殖医学科;
【基金】：Supported by National Natural Science Foundation of China(81050023,81271234)~~
【分类号】：R402

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