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心梗大鼠心肌ALCAT1在运动抑制心肌细胞钙代谢异常及细胞凋亡中的作用及机制探讨

发布时间:2020-12-16 07:59
  研究目的:探讨大鼠心梗急性期心肌ALCAT1表征的时间窗及其在运动抑制心肌细胞凋亡中的作用及机制,为运动防治心梗疾病的有效手段和方法筛选提供新思路、新靶点以及实验依据。研究方法:雄性3月龄SD大鼠60只,随机分为:正常组(C)、假手术组(S)、心梗1h 组(MI-1h)、心梗 6h 组(MI-6h)、心梗 12h 组(MI-12h)、心梗 24h 组(MI-24h)和心梗5d组(MI-5d)。术后成活56只,每组8只。国家标准饲料喂养大鼠,自由饮食。另购70只3月龄SD雄性大鼠,随机分为5组:正常组(C)、假手术组(S)、心梗组(MI)、正常+有氧运动组(CE)、心梗+有氧运动组(ME),每组8只。采用左冠状动脉前降支结扎法制备急性心梗模型,造模成功后,大鼠安静饲养1wk后进行有氧运动训练。CE组和ME组进行为期4wk的小动物有氧跑台训练。训练开始先以10m/min速度进行10min的适应性训练,然后递增至13m/min速度运动 10min,最后以 16m/min 速度运动 40min,1h/d,5d/wk×4wk。C 组、S组和MI组安静饲养4wk,不进行跑台运动。大鼠4wk跑台运动... 

【文章来源】:陕西师范大学陕西省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:106 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
Abstract
缩略词表
第一章 文献综述与选题依据
2+调控过程">    1.1 心肌细胞Ca2+调控过程
2+瞬变">        1.1.1 心肌细胞Ca2+瞬变
2+调控障碍">        1.1.2 心梗心肌细胞Ca2+调控障碍
    1.2 运动与心肌细胞凋亡
        1.2.1 细胞凋亡及相关机制
        1.2.2 运动与细胞凋亡
    1.3 运动对缺血心脏的保护效应
        1.3.1 缺血心脏研究
        1.3.2 运动对缺血心脏保护效应
    1.4 心磷脂生物学表征与代谢调控
        1.4.1 心磷脂的生物学表征
        1.4.2 心磷脂的重构与病态重构
        1.4.3 心磷脂的代谢调控
        1.4.4 心磷脂与细胞凋亡
    1.5 心磷脂病态重塑与慢性疾病
        1.5.1 巴氏综合症
        1.5.2 心血管疾病相关研究
        1.5.3 糖尿病和肥胖
    1.6 运动与CL
        1.6.1 运动通过降低ROS水平可能改善CL的病态重塑
        1.6.2 运动改善CL的病态重塑的可能机制
    1.7 选题依据
        1.7.1 选题思路
        1.7.2 实验设计思路
第二章 大鼠心梗急性期心肌ALCAT1表征
    2.1 材料与方法
        2.1.1 主要仪器和试剂
        2.1.2 实验动物分组和心肌梗死模型制备及心功能测定
        2.1.3 取材及样品制备
        2.1.4 心肌Masson染色方法
        2.1.5 心肌lclat1的RT-qPCR实验方法
        2.1.6 心肌局部和血清ALCAT1的WB蛋白印迹实验方法
        2.1.7 心梗大鼠血清CK、CKMB和LDH测定方法
        2.1.8 数据采集与统计学处理
    2.2 实验结果
        2.2.1 心梗大鼠心肌局部和血清ALCAT1基因和蛋白表达变化
        2.2.2 心梗大鼠血清CK、CKMB及LDH检测结果
        2.2.3 心梗大鼠心肌间质胶原观察与心功能测定结果
    2.3 讨论与分析
        2.3.1 心肌梗死上调ALCAT1基因及蛋白表达
        2.3.2 心梗大鼠血清CK、CKMB和LDH变化特征分析
        2.3.3 心梗大鼠心肌间质胶原及心功能测定结果
    2.4 小结
第三章 有氧运动对心梗大鼠ALCAT1表征的影响及其与心功能改善的关系
    3.1 材料与方法
        3.1.1 主要仪器和试剂
        3.1.2 动物分组、心梗模型制备和运动方案
        3.1.3 心功能测定、取材及样品制备、心肌Masson染色与RT-qPCR实验
        3.1.4 WB蛋白印迹实验和Elisa检测方法
        3.1.5 数据采集与统计学处理
    3.2 实验结果
        3.2.1 有氧运动对心梗大鼠心肌局部和血清ALCAT1的影响
        3.2.2 有氧运动降低心梗大鼠心肌局部和循环氧化应激水平
        3.2.3 有氧运动降低心梗大鼠心肌功能性损伤
        3.2.4 有氧运动降低心梗大鼠心肌胶原纤维化,改善心功能
    3.3 讨论与分析
        3.3.1 有氧运动下调心梗大鼠心肌局部和血清ALCAT1水平
        3.3.2 有氧运动降低心梗大鼠心肌和循环的氧化应激水平
        3.3.3 有氧运动降低心梗大鼠心肌损伤,提高心功能
    3.4 小结
第四章 有氧运动对心梗大鼠心肌细胞钙瞬变与细胞凋亡的影响
    4.1 材料与方法
        4.1.1 主要仪器和试剂
        4.1.2 实验动物分组、心肌梗死模型制备与大鼠运动训练方案、取材及样品制备(同第三章)
        4.1.3 Caspase3活性检测试剂盒
        4.1.4 WB蛋白印迹实验方法
        4.1.5 心肌细胞急性分离、心肌细胞钙瞬变及收缩功能测定
        4.1.6 数据采集与统计学处理
    4.2 实验结果
        4.2.1 有氧运动抑制心梗大鼠心肌凋亡
        4.2.2 大鼠单个心肌细胞钙瞬变和心肌细胞收缩同步测定结果
        4.2.3 有氧运动改善心梗大鼠单个心肌细胞钙瞬变
        4.2.4 有氧运动改善心梗大鼠单个心肌细胞的收缩功能
        4.2.5 有氧运动显著上调心梗心肌PI3K-Akt-PKG-PLN/SERCA2a通路
    4.3 讨论与分析
        4.3.1 有氧运动抑制心梗大鼠心肌凋亡
        4.3.2 有氧运动改善心梗大鼠心肌细胞的钙瞬变
        4.3.3 有氧运动改善心梗大鼠心肌细胞的收缩与舒张能力
    4.4 小结
全文总结
参考文献
致谢
攻读学位期间的科研成果



本文编号:2919817

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