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游泳运动对ob/ob小鼠视网膜Akt、VEGF蛋白表达影响

发布时间:2021-10-12 15:39
  背景:糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)是临床常见的糖尿病并发症,也是世界卫生组织公布的视力损害、致盲的7大原因病因之一。DR以微血管病变作为最常见病理特点,以视网膜新生血管的形成作为发病的节点。DR严重时,临床可见玻璃体出血、视网膜脱离以及严重的视力损害,病程继续进展,甚至导致患者的视力完全丧失。血管内皮生长因(vascular endothelial growth factor,VEGF)是参与DR发病节点的重要因子,参与新生血管的形成,而Akt又是维持VEGF长期上调的重要上游因子。所以在临床上抑制Akt/VEGF通路蛋白的表达为治疗糖尿病新生血管的重要思路。临床DR发病隐匿,当患者发生明显视力障碍时,才会选择就医,失去治疗疾病的最佳时机,故本病重在预防和及时治疗,运动作为预防和治疗糖尿病的有效的辅助手段,可以有效降低糖耐量的受损程度,表明运动可以改善胰岛素抵抗。目的:探究游泳运动对糖尿病模型鼠的糖耐量血糖变化曲线及视网膜Akt/VEGF信号通路各蛋白表达水平的影响,旨在研究游泳运动对抑制DR的相关机制,为临床预防及治疗DR提供实验依据。方法:将o... 

【文章来源】:成都体育学院四川省

【文章页数】:44 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

游泳运动对ob/ob小鼠视网膜Akt、VEGF蛋白表达影响


PI3K/Akt/VEGF通路示意图

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16小鼠分笼饲养,5只一笼,共同饲养于成都体育学院SPF级实验动物房独立通气鼠箱中,温度23-25℃,湿度40~70%,不限制饮食和饮水,昼夜循环(12/12h),每周更换两次垫料。剪掉趾标记,如图1所示,分别将BTBRob/ob小鼠、C57BL/6J小鼠进行随机编号,编号为1,2,3……10。小鼠自购买至实验室后,记录原始体重及血糖,适应性喂养1周。图2小鼠剪掉趾标记示意图3.4.2实验试剂、仪器及耗材3.4.2.1主要试剂水合氯醛山东西亚化学工业有限公司多聚甲醛,RIPA裂解液(强),SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X),30%Acr-Bis(29:1),1.5MTris-HCl,pH8.8,SDS北京兰杰柯科技有限公司氯化钠福晨(天津)化学试剂有限公司盐酸四川西陇科学有限公司脱脂奶粉安佳甲醇成都科隆化学品有限公司TEMED,过硫酸铵合肥博美生物科技有限责任公司甘氨酸,Tris,Tween20德国BioFROXX公司PMSF(100mM)上海碧云天生物技术有限公司PageRulerPrestainedProteinLadder(26616)美国ThermoFisherScientific公司兔抗鼠多克隆抗体PI3K、Akt1、VEGF内参鼠抗、兔抗上海三爱思试剂有限公司SuperLumiaECLPlusHRPSubstrateKitSolutionA,SuperLumiaECLPlusHRPSubstrateKitSolutionB美国Abbkine公司3.4.2.2主要仪器恒温器创宁(ChuangNing)MILLI-Q密理博超纯水仪德国MILLI-Q公司-80℃低温冰箱青岛海尔股份有限公司4℃/-20℃冰箱青岛海尔股份有限公司

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22注:*表示与前一组之间P<0.05,△表示与第一组之间P<0.05,▲表示与第二组之间P<0.05。小鼠IGTT血糖变化曲线特征见图3,正式游泳运动17周后,游泳组小鼠(包括糖尿病ob/ob小鼠和非糖尿病C57小鼠)的葡萄糖峰值为15min;非游泳组小鼠(包括糖尿病ob/ob小鼠和非糖尿病C57小鼠)的葡萄糖峰值为30min。图3游泳运动对小鼠IGTT葡萄糖曲线特征的影响4.1.2游泳运动对体重的影响游泳运动对各组体重的影响见表4,正式运动第17周,糖尿病ob/ob小鼠和非糖尿病C57小鼠两组之间的体重差异均无统计学意义(P>0.05)。表3正式运动第17周各组小鼠体重分组体重(g)第2周第17周C57(非游泳)13.12±0.4326.83±1.96C57(游泳)13.3±0.5426.04±2.14ob(非游泳)16.74±1.26△▲52.34±1.14△▲ob(游泳)16.60±0.61△▲51.96±1.83△▲注:*表示与前一组之间P<0.05,△表示与第一组之间P<0.05,▲表示与第二组之间P<0.05。4.1.3游泳运动对VEGF、Akt蛋白表达的影响各小鼠视网膜Akt蛋白表达量如图4,小鼠视网膜Akt、VEGF蛋白相对表达量如图5,结果表明ob非游泳组视网膜Akt、VEGF蛋白表达量明显高于ob游泳组。

【参考文献】:
期刊论文
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博士论文
[1]microRNA-126通过IRS-1调控糖尿病模型鼠视网膜毛细血管内皮细胞周细胞PI3K/AKT/VEGF通路并抑制细胞增殖及侵袭作用的研究[D]. 方石峰.大连医科大学 2016

硕士论文
[1]住院糖尿病性视网膜病变患者生存质量现状及影响因素分析[D]. 李姝洁.大连医科大学 2016



本文编号:3432849

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