Micro-RNA在肿节风多糖促进骨骼肌损伤及修复过程中的作用和机制研究
发布时间：2023-04-01 10:11
研究目的:骨骼肌损伤是运动损伤中常见的损伤,关于其治疗一直是一个研究热点。本研究通过离心运动复制大鼠骨骼肌损伤模型,观察肿节风多糖对大鼠骨骼肌愈合过程中micro-RNA、炎症因子、超微结构的变化,探讨肿节风多糖在骨骼肌运动损伤愈合中的作用及可能机制。研究方法:选用24只8周龄Wistar健康雄性大鼠,按照体重随机分为4组,每组6只。分组:安静对照组(A)、离心损伤组(B)、自然恢复组(C)、肿节风干预组(D)。通过大强度离心运动建立运动损伤模型,用时四周,每周运动时间、速度不断递增。造模成功后,再进行为期一周的灌药及自然恢复。用戊巴比妥钠进行麻醉,腹腔注射。腹主动脉取血,离心得到血清后置于超低温冰箱保存;迅速取少量比目鱼肌,放入多聚甲醛中进行固定;取比目鱼肌,如米粒大小快速投入3%的戊二醛固定液中固定;再取比目鱼肌,快速放入EP管锡纸包裹置于超低温冰箱等待匀浆。(1)血清CK、LDH、MDA、T-AOC采用比色法进行检测。(2)骨骼肌中的miR-155-5p、miR-133a-5p、SOCS1m RNA、IL-1βm RNA采用RT-PCR法检测。(3)骨骼肌中SOCS1蛋白表达水平...
【文章页数】：74 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
英文缩略词表(Abbreviations)
1.绪论
1.1 选题依据
1.2 研究意义
1.3 研究设计
2.文献综述
2.1 骨骼肌损伤
2.1.1 骨骼肌损伤概述
2.1.2 骨骼肌损伤的分类
2.1.3 骨骼肌损伤机制的研究进展
2.1.4 离心运动对骨骼肌形态结构的影响
2.2 骨骼肌损伤的治疗研究进展
2.2.1 骨骼肌损伤修复的相关方法
2.2.2 肌卫星细胞对骨骼肌损伤后产生的影响
2.3 MicroRNA在骨骼肌损伤后修复中与炎症的关系
2.3.1 MiR-155在骨骼肌损伤后修复中与炎症的关系
2.3.2 MiR-223在骨骼肌损伤后修复中与炎症的关系
2.3.3 MiR-133在骨骼肌损伤后修复中与炎症的关系
2.4 中药通过调节Micro RNAs对机体炎症的影响
2.5 肿节风的药理作用研究
2.5.1 肿节风的抑菌与抗炎作用
2.5.2 肿节风的抗病毒作用
2.5.3 肿节风的抗肿瘤作用
2.5.4 肿节风的保肝作用
2.5.5 肿节风抑制血小板的作用
2.6 肿节风多糖促进骨骼肌损伤后修复的可能机制
2.6.1 肿节风多糖对骨骼肌、血液相关生化指标的影响
2.6.2 肿节风多糖对巨噬细胞的免疫调节作用
3.研究内容与方法
3.1 实验对象及分组
3.1.1 实验对象
3.1.2 动物分组
3.2 动物实验模型
3.2.1 离心运动损伤实验模型
3.2.2 损伤及损伤后恢复处理
3.2.3 大鼠样本提取
3.3 实验仪器、试剂及方法
3.3.1 实验仪器
3.3.2 实验试剂
3.3.3 制作石蜡组织切片
3.3.4 石蜡切片免疫荧光实验
3.3.5 石蜡切片免疫组化实验
3.3.6 大鼠血清CK、LDH、MDA与 T-AOC变化的检测
3.3.7 大鼠骨骼肌免疫印迹实验
3.3.8 RT-PCR实验
3.3.9 大鼠骨骼肌透射电镜实验
3.4 数据统计分析
4 研究结果
4.1 不同组别大鼠血液CK、LDH水平比较
4.2 不同组别大鼠血液MDA、T-AOC水平的比较
4.3 不同组别大鼠骨骼肌microRNA-155-5p、microRNA-133a-5p表达水平的结果
4.4 不同组别大鼠骨骼肌SOCS1m RNA表达水平的比较
4.5 不同组别大鼠骨骼肌SOCS1蛋白表达水平(免疫印迹)的比较
4.6 不同组别大鼠骨骼肌SOCS1蛋白表达水平(免疫组化)的比较
4.7 不同组别大鼠骨骼肌IL-1βm RNA表达水平比较
4.8 不同组别大鼠骨骼肌Pax7蛋白表达水平(免疫荧光)的比较
4.9 不同组别大鼠骨骼肌电镜的观察结果
5 讨论与分析
5.1 离心运动骨骼肌损伤模型的建立
5.2 肿节风多糖对大鼠血清中CK、LDH的影响
5.3 肿节风多糖对大鼠血清中的MDA、T-AOC的影响
5.4 肿节风多糖对运动损伤大鼠骨骼肌microRNA-155-5p/SOCS1/IL-1β信号通路的影响
5.5 肿节风多糖对运动损伤大鼠Pax7蛋白表达的影响
5.6 肿节风多糖对大鼠骨骼肌纤维电镜结构的影响
6 研究结论
参考文献
致谢
攻读学位期间的发表论文目录
本文编号：3776951
【文章页数】：74 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
英文缩略词表(Abbreviations)
1.绪论
1.1 选题依据
1.2 研究意义
1.3 研究设计
2.文献综述
2.1 骨骼肌损伤
2.1.1 骨骼肌损伤概述
2.1.2 骨骼肌损伤的分类
2.1.3 骨骼肌损伤机制的研究进展
2.1.4 离心运动对骨骼肌形态结构的影响
2.2 骨骼肌损伤的治疗研究进展
2.2.1 骨骼肌损伤修复的相关方法
2.2.2 肌卫星细胞对骨骼肌损伤后产生的影响
2.3 MicroRNA在骨骼肌损伤后修复中与炎症的关系
2.3.1 MiR-155在骨骼肌损伤后修复中与炎症的关系
2.3.2 MiR-223在骨骼肌损伤后修复中与炎症的关系
2.3.3 MiR-133在骨骼肌损伤后修复中与炎症的关系
2.4 中药通过调节Micro RNAs对机体炎症的影响
2.5 肿节风的药理作用研究
2.5.1 肿节风的抑菌与抗炎作用
2.5.2 肿节风的抗病毒作用
2.5.3 肿节风的抗肿瘤作用
2.5.4 肿节风的保肝作用
2.5.5 肿节风抑制血小板的作用
2.6 肿节风多糖促进骨骼肌损伤后修复的可能机制
2.6.1 肿节风多糖对骨骼肌、血液相关生化指标的影响
2.6.2 肿节风多糖对巨噬细胞的免疫调节作用
3.研究内容与方法
3.1 实验对象及分组
3.1.1 实验对象
3.1.2 动物分组
3.2 动物实验模型
3.2.1 离心运动损伤实验模型
3.2.2 损伤及损伤后恢复处理
3.2.3 大鼠样本提取
3.3 实验仪器、试剂及方法
3.3.1 实验仪器
3.3.2 实验试剂
3.3.3 制作石蜡组织切片
3.3.4 石蜡切片免疫荧光实验
3.3.5 石蜡切片免疫组化实验
3.3.6 大鼠血清CK、LDH、MDA与 T-AOC变化的检测
3.3.7 大鼠骨骼肌免疫印迹实验
3.3.8 RT-PCR实验
3.3.9 大鼠骨骼肌透射电镜实验
3.4 数据统计分析
4 研究结果
4.1 不同组别大鼠血液CK、LDH水平比较
4.2 不同组别大鼠血液MDA、T-AOC水平的比较
4.3 不同组别大鼠骨骼肌microRNA-155-5p、microRNA-133a-5p表达水平的结果
4.4 不同组别大鼠骨骼肌SOCS1m RNA表达水平的比较
4.5 不同组别大鼠骨骼肌SOCS1蛋白表达水平(免疫印迹)的比较
4.6 不同组别大鼠骨骼肌SOCS1蛋白表达水平(免疫组化)的比较
4.7 不同组别大鼠骨骼肌IL-1βm RNA表达水平比较
4.8 不同组别大鼠骨骼肌Pax7蛋白表达水平(免疫荧光)的比较
4.9 不同组别大鼠骨骼肌电镜的观察结果
5 讨论与分析
5.1 离心运动骨骼肌损伤模型的建立
5.2 肿节风多糖对大鼠血清中CK、LDH的影响
5.3 肿节风多糖对大鼠血清中的MDA、T-AOC的影响
5.4 肿节风多糖对运动损伤大鼠骨骼肌microRNA-155-5p/SOCS1/IL-1β信号通路的影响
5.5 肿节风多糖对运动损伤大鼠Pax7蛋白表达的影响
5.6 肿节风多糖对大鼠骨骼肌纤维电镜结构的影响
6 研究结论
参考文献
致谢
攻读学位期间的发表论文目录
本文编号：3776951
本文链接：https://www.wllwen.com/jiaoyulunwen/tylw/3776951.html
