机械牵拉改善C2C12肌管胰岛素抵抗

发布时间：2023-12-09 12:18

　　目的:运动能改善胰岛素抵抗,但是相关机制一直不太明确。在此基础上,本课题建立C2C12肌管胰岛素抵抗模型,并用机械牵拉模拟运动,探索运动对胰岛素信号通路,炎症,内质网应激,脂肪酸氧化的调节作用,以此证明机械牵拉改善C2C12肌管状态的可能作用机制。方法:1.将C2C12小鼠成肌细胞用2%的马血清分化培养6天,变成肌管。除正常组外,用0.5mM棕榈酸诱导16h建立胰岛素抵抗模型。2.用油红O放射检测脂肪沉积,ROS荧光染色检测氧化应激,糖摄取方法检测上清葡萄糖含量,荧光定量PCR法检测胰岛素信号通路相关因子,包括胰岛素受体底物1、磷酸肌醇3-激酶、蛋白激酶B、葡萄糖转运体4的基因表达,鉴定胰岛素抵抗模型建立成功。3.胰岛素抵抗组用15%,1HZ,6h的牵拉参数进行牵拉,采用荧光定量PCR法检测普通对照组,胰岛素抵抗组,机械牵拉组胰岛素信号通路相关因子(GLUT4,PI3K,IRS-1,AKT),炎症因子(IL-6,TNFα,TGF-β,NF-κB),内质网应激因子(ATF3,BIP,CHOP,HSP70,TRB3),脂肪酸代谢因子PGC1α、PPARα和Acox1的基因表达;采用糖摄取方...

【文章页数】：46 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
abstract
符号与说明
引言
文献综述
    1.胰岛素抵抗
    2.骨骼肌葡萄糖转运的途径
        2.1 胰岛素依赖性途径
        2.2 非胰岛素依赖性葡萄糖摄取
    3.影响骨骼肌胰岛素抵抗的因素
        3.1 胰岛素抵抗与氧化应激
        3.2 胰岛素抵抗与内质网应激
        3.3 胰岛素抵抗与炎症
        3.4 胰岛素抵抗与脂肪沉积
        3.5 胰岛素抵抗与脂肪酸代谢
    4.运动改善胰岛素抵抗
        4.1 运动抗氧化改善骨骼肌胰岛素抵抗
        4.2 运动抗炎症改善骨骼肌胰岛素抵抗
        4.3 运动抗脂肪酸氧化改善胰岛素抵抗
        4.4 运动抗内质网应激改善胰岛素抵抗
    5.总结
1.实验材料
    1.1 细胞株
    1.2 仪器
    1.3 实验试剂
2.实验方法
    2.1 C2C12 小鼠成肌细胞的培养
        2.1.1 细胞复苏
        2.1.2 细胞传代培养
        2.1.3 细胞冻存
    2.2 C2C12 小鼠成肌细胞分化
    2.3 棕榈酸诱导IR模型
    2.4 周期性机械牵拉
    2.5 上清葡萄糖含量的测定
    2.6 油红O的测定
    2.7 ROS活性氧测试方法
    2.8 细胞的提取与检测(Trizol法)
3.技术路线图
4.统计学分析
5.实验结果
    5.1 C2C12 细胞诱导分化为肌管
    5.2 C2C12 肌管胰岛素抵抗模型的鉴定
        5.2.1 C2C12 肌管油红0 染色
        5.2.2 C21C2 肌管ROS荧光染色
        5.2.3 C2C12 肌管上清葡萄糖含量
        5.2.4 C2C12 肌管胰岛素信号通路的基因表达
    5.3 机械牵拉改善胰岛素抵抗
        5.3.1 机械牵拉后C2C12 肌管的形态变化
        5.3.2 机械牵拉提高了葡萄糖的摄取
        5.3.3 机械牵拉改善胰岛素信号通路的基因表达
        5.3.4 机械牵拉改善IR肌细胞炎症因子表达
        5.3.5 机械牵拉改善IR及细胞内质网应激因子表达
        5.3.6 机械牵拉改善脂防酸氧化
6.讨论
    6.1 C2C12 肌管胰岛素抵抗模型的建立
    6.2 机械牵拉参数的选择
    6.3 C2C12 肌管胰岛素抵抗模型的鉴定
        6.3.1 C2C12 肌管胰岛素抵抗模型出现脂肪沉积
        6.3.2 C2C12 肌管胰岛素抵抗模型出现氧化应激
        6.3.3 C2C12 肌管胰岛素抵抗模型葡萄糖摄取减少
        6.3.4 C2C12 肌管胰岛素抵抗模型中胰岛素信号通路异常
    6.4 机械牵拉对IR肌管的改善效应
        6.4.1 机械牵拉对IR肌管糖摄取的改善效应
        6.4.2 机械牵拉改善IR肌细胞胰岛素信号通路的因子表达
        6.4.3 机械牵拉改善IR肌细胞炎症因子表达
        6.4.4 机械牵拉改善IR肌细胞内质网应激因子表达
        6.4.5 机械牵拉改善IR肌细胞脂防酸氧化的因子表达
7.结论
8.参考文献
致谢



本文编号：3871561