褪黑素在有氧运动改善自发性高血压大鼠微动脉舒缩功能中的作用

发布时间：2017-09-25 07:01

  本文关键词：褪黑素在有氧运动改善自发性高血压大鼠微动脉舒缩功能中的作用

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【摘要】：研究目的：探讨褪黑素在有氧运动改善自发性高血压大鼠(SHR)肠系膜动脉功能中的作用及可能的外周血管机制。研究方法：选用12周龄雄性SHR 34只和正常血压对照组Wistar-Kyoto (WKY)8只,SHR随机分为5个组,即安静空白对照组(SHR-SED, n=8).安静生理盐水注射组(SHR-SED+vehicle, n=6)、安静褪黑素受体阻断剂luzindole (1 mg/kg/day)注射组(SHR-SED+luz, n=6)、有氧运动组(SHR-EX,n=8)、有氧运动luzindole注射组(SHR-EX+1uz, n=6)。运动组进行8周有氧训练,坡度0°,18-20m/min,60min/day,5d/wk。8周有氧运动后,采用尾动脉无创法测量大鼠血压与心率;WKY、SHR-SED、SHR-EX三组采用ELISA竞争法测定血清褪黑素水平、微血管环张力测定二级肠系膜动脉的舒缩特性、Western blotting和免疫荧光共定位法检测肠系膜动脉的褪黑素受体MT1、MT2和eNOS蛋白的表达和分布。研究结果：(1)8周有氧运动后,SHR-EX组的收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、平均动脉压(MAP)和心率(HR)与SHR-SED组相比显著降低。SHR-EX+luz组的SBP和HR明显高于SHR-EX组,却低于SHR-SED+luz组,而SHR-SED组与SHR-SED+vehicle和SHR-SED+luz组无差异；(2)WKY组和SHR-SED组血清褪黑素浓度在21：00-22：00pmm时最高,明显高于12：00-13：00pmm和8：00-9：00am；但SHR-EX组8：00-9：00am最高。在三个时间段内,WKY组血清褪黑素浓度始终显著高于SHR-SED组；但在8：00-9：00am时间段,SHR-EX组明显高于WKY和SHR-SED组；(3)①微血管环在NE(10-5 M)预收缩后,对褪黑素(melatonin,即MT,10-6～10-3M)呈浓度依赖性舒张反应,pICso值为WKYSHR-EXSHR-SED,且各组无L-NAME (10-4 M)内皮完整血管舒张幅度大于有L-NAME (10"4 M)内皮不完整血管；②有氧运动可增加肠系膜动脉对ACh的舒张反应,其pICso值为WKYSHR-EXSHR-SED; MT (10-4M)预孵育微血管环20min,可明显的增加ACh (10-9～10-5M)的舒张反应,但对sodium nitroprusside (SNP,10-9～10-5 M)无明显效果；③luzindole (2×10-6 M)预孵育微血管环20mmin,可阻断褪黑素的舒张作用；(4)与WKY组相比,组肠系膜动脉内SHR-SED和MT1、MT2表达均显著下eNOS调,有氧运动后,组SHR-EX和MT1、MT2表达均明显上调,但仍然低eNOS于WKY组;(5)免疫荧光共定位检测MT2蛋白位于整个肠系膜动脉的血管层,存在细胞外膜、血管平滑肌细胞层和内皮细胞层,蛋白主要存在于肠系eNOS膜动脉的内皮细胞层,MT2和蛋白二者共定位于肠系膜动脉的内皮细胞eNOS层。研究结论：有氧运动可有效降低SHR的基础血压,增强肠系膜动脉血管舒张作用,其中褪黑素是其重要机制之一,后者可能是通过血管褪黑素受体及内皮途径起作用。
【关键词】：有氧运动 褪黑素 褪黑素受体 白发性高血压大鼠 肠系膜动脉
【学位授予单位】：北京体育大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：G804.2
【目录】：

• 摘要5-7
• ABSTRACT7-11
• 1 前言11-14
• 2 文献综述14-26
• 2.1 高血压14-18
• 2.1.1 动脉血压14
• 2.1.2 高血压定义14-15
• 2.1.3 高血压的发病机制15-16
• 2.1.4 高血压与血管壁重塑16-18
• 2.2 褪黑素18-24
• 2.2.1 褪黑素及其受体18-21
• 2.2.2 褪黑素与高血压21-22
• 2.2.3 褪黑素的降压机制22-24
• 2.3 有氧运动24-26
• 2.3.1 有氧运动与高血压24-25
• 2.3.2 有氧运动与褪黑素25-26
• 3 研究对象与方法26-38
• 3.1 研究对象26
• 3.2 研究方法26-35
• 3.2.1 大鼠尾动脉无创血压测定28
• 3.2.2 ELISA竞争法测定大鼠血清内源性褪黑素水平28-29
• 3.2.3 大鼠二、三级肠系膜动脉离体微血管环制备及张力测定29-31
• 3.2.4 蛋白免疫印迹法检测大鼠肠系膜动脉MT1、MT2及eNOS蛋白表达31-34
• 3.2.5 免疫荧光共染检测大鼠肠系膜动脉MT2和eNOS蛋白分布34-35
• 3.3 试剂和仪器35-38
• 3.3.1 主要试剂35-36
• 3.3.2 常用试剂溶液的配制36-37
• 3.3.3 主要仪器37-38
• 3.4 统计分析38
• 4 实验结果38-47
• 4.1 有氧运动和luzindole对SHR体重、血压及心率的影响38-39
• 4.2 有氧运动对SHR内源性血清褪黑素的影响39-40
• 4.3 有氧运动对SHR肠系膜动脉血管反应性的影响40-45
• 4.3.1 有氧运动对MT诱导的肠系膜动脉舒张反应的影响40-42
• 4.3.2 有氧运动对luzindole抑制MT血管舒张反应的影响42
• 4.3.3 有氧运动对ACh诱导的内皮依赖性血管舒张反应的影响42-43
• 4.3.4 有氧运动对SNP诱导的非内皮依赖性血管舒张反应的影响43-44
• 4.3.5 luzindole对MT增强ACh血管舒张反应的影响44-45
• 4.4 有氧运动对SHR肠系膜动脉MT1和MT2蛋白表达的影响45-46
• 4.5 有氧运动对SHR肠系膜动脉eNOS蛋白表达的影响46
• 4.6 有氧运动对SHR肠系膜动脉eNOS和MT2蛋白共定位分布的影响46-47
• 5 分析与讨论47-53
• 5.1 有氧运动对SHR血压及内源性血清褪黑素的影响48-50
• 5.2 有氧运动对SHR肠系膜动脉功能的影响50-52
• 5.3 有氧运动对褪黑素受体MT1、MT2和eNOS表的达影响52-53
• 6 结论53-54
• 致谢54-55
• 参考文献55-64
• 个人简历 在读期间发表的学术论文与研究成果64

【参考文献】

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本文编号：915991