典型重金属和阻燃剂类环境污染物对斑马鱼胚胎的发育毒性研究

发布时间：2020-05-31 10:08

【摘要】：随着经济的发展,全球化学品的产量和使用量日渐增加。因此,大量的化学品不可避免的通过各种途径进入到自然水体中,对人类和野生动物的健康造成潜在的威胁。因此,本研究以斑马鱼胚胎为实验模型,基于斑马鱼生长激素/胰岛素样生长因子(growth hormone/insulin-like growth factors,GH/IGFs)轴上的19个基因,建立了斑马鱼胚胎/仔鱼的GH/IGFs轴基因表达谱,研究了典型重金属类和阻燃剂类环境污染物的发育毒性。其主要结果如下:1.基于正常的培养条件下,斑马鱼仔鱼的体长在72 hpf(受精后72小时)到96hpf体长的增长速率要大于96 hpf到120 hpf体长的增长速率,说明96 hpf是斑马鱼仔鱼体长发育相对敏感的暴露窗口时期。除此之外,也检测到斑马鱼GH/IGFs轴上的一些基因在96 hpf的表达量有显著性。根据OECD斑马鱼胚胎急性毒性测试标准,本研究采取96 hpf作为评价化学品发育毒性的采样时间点。2.将斑马鱼胚胎暴露于不同浓度的双酚A(BPA),全氟辛烷磺酸(PFOS),三(1,3-二氯异丙基)磷酸酯(TDCIPP),氯化镉(CdCl_2),氯化汞(HgCl_2),乙酸铅(PbAc)六种代表性的化学污染物中,暴露时间从2 hpf至96 hpf。在96 hpf时检测斑马鱼仔鱼的发育终点指标和GH/IGFs轴的基因表达。我们发现暴露于这六种化学品后,相比存活率,孵化率,畸形率,心率等指标,斑马鱼仔鱼的体长是相对敏感的发育终点指标。伴随着仔鱼体长的减短,斑马鱼GH/IGFs轴基因的表达谱发生显著变化,进一步通过相关性分析表明观察到的仔鱼体长的降低可能是由于GH/IGFs轴的基因表达失调导致的。因此,斑马鱼胚胎/仔鱼的GH/IGFs轴基因表达谱可以用来评估化学物质对GH/IGFs内分泌系统的不良影响。
【图文】：

仔鱼,体长,斑马鱼,胚胎

鱼胚胎/仔鱼在 72, 96, 120 hpf 时的体长。每组 30 条仔鱼为一个重复，每个浓度 3 个平行标准偏差 (mean±SD )。***P< 0.001 表示实验组与对照组具有显著性差异。ody length in zebrafish/larvae in 72, 96, 120 hpf. Results are given as mean values of three replicach exposure condition at 3 or 5 dpf. Values represent mean±SD. Significant difference from thedicated by ***P<0.001.验统计了孵化后斑马鱼仔鱼在 72, 96, 120 hpf 时的鱼体长度，分析体长随时间变化的规律，结果显示：随着时间的增加，斑马鱼的体趋势（图 1）。在 72, 96 和 120 hpf 时，斑马鱼仔鱼的体长分别为 7±0.10 mm 和 3.88±0.08 mm。在 72 hpf 到 96 hpf 时，，体长的增长，在 96 hpf 到 120 hpf 时，体长的增长率为 0.05 mm/hpf。这表明斑长发育过程中，体长随时间变化显著性增加。并且体长的增长率在f 要大于 96 hpf 到 120 hpf。

仔鱼,斑马鱼,胚胎,基因表达

14图 2 在 2, 24, 48, 72, 96, 120 hpf 时斑马鱼胚胎/仔鱼的 GH/IGFs 轴基因表达情况。每组 3 个平行。数据表示为平均值±标准偏差 (mean±SD)。*P<0.05，**P< 0.01，***P< 0.001 表示实验组与对照组具有显著性差异。Figure 2 Relative gene expression in GH/IGFs aix in zebrafish in 2, 24, 48, 72, 96, 120 hpf. Values represent mean±S(n=3). Significant difference from the control group is indicated by *P < 0.05, **P < 0.01 and ***P<0.001 .
【学位授予单位】：华中农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：X171.5

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