源于一株高效溶藻菌的活性物质对中肋骨条藻的溶藻作用过程

发布时间：2020-07-02 03:29

【摘要】：随着工业化进程速度的加快,海洋污染问题日益突出,赤潮问题更是严峻。中肋骨条藻作为赤潮优势藻之一,广泛分布于我国近海海域,曾多次引发赤潮,对海洋生态、鱼类养殖造成严重危害,寻找环保高效的赤潮治理方法刻不容缓。本课题组筛选得到一株对中肋骨条藻具有高效抑藻活性的菌株Chitinimonas prasina LY03,为了探究其抑藻机理,本研究以从LY03中提取的杀藻活性物质为研究对象,探究中肋骨条藻在杀藻物质胁迫下形态变化以及生理生化响应,主要研究结果如下:(1)LY03杀藻活性物质作用时间短,且效果稳定。杀藻活性物质添加浓度为0.2μg/mL即可对藻细胞造成严重破坏,48h内细胞密度为106/mL的中肋骨条藻几乎全部死亡,这种低剂量、短时间达到明显的溶藻效果,暗示其为一种具有潜在开发价值的溶藻物质。(2)用扫描电子显微镜观察发现,处理组藻细胞3h内连接刺断裂,分成单个细胞,之后细胞膜破裂,硅质壳打开,内容物流出。透射电子显微镜则可以看到叶绿体片层结构遭到破坏,线粒体膜结构逐渐破裂,最终只剩一个空壳。说明杀藻活性物质对藻细胞损伤严重。(3)检测藻细胞的叶绿素含量,发现在溶藻物质加入期间,藻细胞的叶绿素含量一直下降。检测藻细胞的最大光合效率和电子传递速率,相比对照组,处理组的含量都显著下降。由此可见LY03杀藻活性物质对藻细胞的光合系统造成严重影响,导致其无法进行光合作用。(4)在杀藻活性物质胁迫下,藻细胞内大分子物质如蛋白质、糖类均显著下降,脂肪酸种类变少,饱和脂肪酸含量升高。抗氧化系统反应迅速,但是由于长期的氧化压力,抗氧化系统崩溃无法清除过多的ROS,导致细胞内物质被氧化,MDA含量升高,细胞膜系统损伤,最后死亡。(5)用实时定量PCR检测细胞内光合基因的表达状况,结果显示,光合系统相关基因psbD和rcbS在3h时出现上调,来以此抵御外界环境对藻细胞造成的影响。但是由于藻细胞受到的损伤太严重,已经无法修复。最后藻细胞光合基因几乎不表达,说明藻细胞光合系统崩溃,藻细胞已无法进行光合作用。
【学位授予单位】：厦门大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：X55
【图文】：

曲线,中肋骨条藻,曲线,生长周期

逦第三章结果与分析逦逡逑第三章结果与分析逡逑１．中肋骨条藻生长周期的测定逡逑对中肋骨条藻的生长周期进行测定，接种量为５％。如图３．１所示，接种的逡逑第１天藻细胞就进入指数生长期，到１８天达到生长的稳定期，细胞呈现下降的逡逑趋势，细胞死亡数大于新生数。综合考虑藻细胞的生长活性，选择培养ｌ0ｄ的藻逡逑细胞作为研究对象。逡逑２逡逑

杀藻,物质,肋骨,处理效果

逡逑杀藻活性物质的杀藻率。如图３．３所示，杀藻活性物质刚刚加入的时侯，就对藻逡逑细胞有抑制作用，但是低浓度处理组（０．１邋ｇｇ／ｍＬ）在１２邋ｈ后对藻的抑制较低，逡逑最终杀藻率在３０％左右，经ＳＰＳＳ软件计算得出杀藻活性物质的半致死浓度为逡逑０．１２３邋ｇｇ／ｍＬ。高浓度处理组对藻细胞抑制强烈，４８邋ｈ杀藻率即可达到９０％以上。逡逑因０．２呢／ｍＬ终浓度就可以达到９０％以上杀藻率，以投放成木最低为原则，选择逡逑０．２邋ｐｇ／ｍＬ作为本研究的活性物质终浓度。逡逑ＣＫ逦０．１邋ｎｇ／ｍＬ逦０．２邋ｎｇ／ｍＬ逦０．４邋ｎｇ／ｍＬ逡逑图３．２不同浓度杀藻活性物质对

【参考文献】