罗丹明B酰亚胺荧光探针的pH值调控研究

发布时间：2020-09-19 20:57

　　近年来,荧光探针因具有成本低廉、选择性高、能够可视化目标区域、选择性良好等优点,被广泛应用于生物学、环境科学等各个领域。荧光探针中基于罗丹明内酰胺结构更是被大量报道。基于该结构的荧光探针对pH敏感的特性也使其常用于生物细胞内pH的实时监测,并取得了良好的效果。本论文以罗丹明B为荧光母体,通过对罗丹明B螺内酰胺的结构进行修饰,设计合成了基于罗丹明B内酰胺结构的邻苯二胺系列探针和氨基吡啶系列探针。其中,邻苯二胺系列探针中对具有不同识别基团的三个探针进行了pH、金属离子干扰、可逆性的测试。对三个探针的性质讨论分析后认为,三个探针均具有成为pH荧光探针的潜力。氨基吡啶系列探针分为RAP系列和RAPI系列两组。本论文中对这两组探针之间也进行了比较,并进行了pH、金属离子干扰、可逆性、溶剂效应、细胞共定位等一系列测试。得到了对氢离子敏感的具有良好选择性和抗干扰性的线粒体pH荧光探针。由于对探针pH值的设计调控,我们得到了探针RAPI2与RAPI3两个未见报道的pH不敏感探针,具有一定的研究意义。
【学位单位】：辽宁大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：X703
【部分图文】：

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针 RDBS 在乙腈-水（4:6,v/v）中的荧光光谱图（b）探针 RDB（c）探针 RDBS 的紫外吸收光谱图（d）探针 RDBS 最大吸光度 RDBS 溶液的荧光和吸收光谱如图 1-4 所示。取荧光强值分别作图绘制出其与 pH 值之间的关系曲线，得到（吸收峰在 561 nm 处，在 5-12 的 pH 范围内，荧光强度时，探针 RDBS 的螺环处于“闭合”状态，融也没有明的状态。随着 pH 的逐渐降低，氢离子诱导螺环发生吸光度逐渐增加，溶液逐渐出现粉红色并随着 pH 的降光强度最强时约为最弱时的 8 倍，变化明显。探针 RD光强度、吸光度与 pH 值呈线性相关（荧光 R2=，拟合后得到 pKa 值为 3.36±0.05。

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22针 RDBB 在乙腈-水（4:6,v/v）中的荧光光谱图（b）探针 RDB（c）探针 RDBB 的紫外吸收光谱图（d）探针 RDBB 最大吸光度5 所示，探针 RDBB 在乙腈-水溶液体系中随 pH 的减液颜色也逐渐加深。在 2-6 的 pH 范围内荧光逐渐增

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针 RDSR 在乙腈-水（4:6,v/v）中的荧光光谱图（b）探针 RDS（c）探针 RDSR 的紫外吸收光谱图（d）探针 RDSR 最大吸光度6 中可以看出，探针 RDBS 还原后得到的探针 RDSR 与值略小于还原前的探针 RDBS。同样，探针在 2-5 的 p度与 pH 值呈线性相关（荧光 R2=0.99172,；紫外 R2=0探针没有明显荧光和吸收，此时溶液无明显颜色，探的荧光强度最大时比最小时高约 80 倍，发生了明显的应用中对 pH 变化的识别。 1-4、图 1-5 和图 1-6 可以发现，外接苯环上羟基的有 pKa 值有明显的影响，这可能是外接基团变化影响了但总体上来看，三个探针均表现出了 pH 探针常见的特对 pH 值有明显响应并在一定范围内与 pH 值呈现线性有成为酸性 pH 探针的潜力。

【参考文献】