镉和毒死蜱单一及联合中毒导致鲤鱼肝脏自噬的研究

发布时间：2020-11-15 09:02

　　 镉是工业生产和日常生活中广泛使用的有毒重金属之一。毒死蜱是农业生产中广泛使用的有机磷农药之一。镉和毒死蜱能够造成环境污染,通过污染的空气、土壤、水和食物积累于人类和动物体内,影响人类和动物健康。肝脏为镉和毒死蜱中毒的靶器官之一。本试验旨在研究镉和毒死蜱单一及联合中毒对鲤鱼肝脏的有害影响,为镉和毒死蜱单一及联合中毒导致鲤鱼肝脏自噬提供基础数据,为镉和毒死蜱单一及联合中毒对鲤鱼肝脏的影响提供参考。将120条健康鲤鱼随机分为4组,对照组、镉组、毒死蜱组和镉毒死蜱联合组。对照组饲养于去氯自来水中;镉组饲养于添加CdCl_2·2.5H_2O(含Cd为0.26 mg/L)的去氯自来水中;毒死蜱组饲养于添加毒死蜱(含毒死蜱为14.5μg/L)的去氯自来水中;镉毒死蜱联合组饲养于添加CdCl_2·2.5H_2O(含镉0.26 mg/L)和毒死蜱(含毒死蜱14.5μg/L)的去氯自来水中。每日各组饲喂标准日粮。在试验的第15、30和45天,每组分别随机取6条鱼处死,迅速切除肝脏组织。观察鲤鱼肝脏组织显微结构和超微结构,检测氧化应激指标(H_2O_2、MDA和GSH含量、CAT、SOD、GPx、GST和T-AOC活性)和自噬相关基因(TOR、LC3-II、Beclin 1、Dynein、ATG12和ATG5)mRNA表达。结论如下:(1)镉和毒死蜱单一及联合中毒引起鲤鱼肝脏形态学变化。显微结构变化包括肝细胞空泡化,核致密,胞质浓缩,细胞出现坏死,排列凌乱,细胞间隙红细胞渗出。超微结构变化包括核膜融合,线粒体空泡化,染色质边集,出现自噬体。镉和毒死蜱导致鲤鱼肝脏损伤和自噬,且镉毒死蜱联合组肝细胞损伤程度和自噬程度强于镉组和毒死蜱组,表明镉和毒死蜱具有联合毒性。(2)镉和毒死蜱单一及联合中毒增加鲤鱼肝脏内H_2O_2和MDA含量,减少GSH含量,抑制CAT、SOD、GPx、GST和T-AOC活性,导致鲤鱼肝脏氧化应激。镉毒死蜱联合组鲤鱼肝脏H_2O_2和MDA含量显著高于镉组和毒死蜱组,GSH含量、CAT、SOD、GPx、GST和T-AOC活性显著低于镉组和毒死蜱组。镉和毒死蜱单一及联合中毒导致鲤鱼肝脏氧化应激,且镉毒死蜱联合组鲤鱼肝脏氧化应激强于镉组和毒死蜱组,表明镉和毒死蜱具有联合毒性。此外,镉毒死蜱联合组中H_2O_2含量,镉组、毒死蜱组和镉毒死蜱联合组中CAT活性具有时间效应。(3)镉和毒死蜱单一及联合中毒抑制鲤鱼肝脏内TOR mRNA表达,诱导LC3-II、Beclin1、Dynein、ATG12和ATG5 mRNA表达,导致鲤鱼肝脏自噬。镉毒死蜱联合组中鲤鱼肝脏TOR的mRNA表达显著低于镉组和毒死蜱组,LC3-II、Beclin 1、Dynein、ATG12和ATG5mRNA表达显著高于镉组和毒死蜱组。镉和毒死蜱单一及联合中毒导致鲤鱼肝脏自噬,且镉毒死蜱联合组自噬强于镉组和毒死蜱组,表明镉和毒死蜱具有联合毒性。此外,镉组、毒死蜱组和镉毒死蜱联合组TOR和ATG12 mRNA表达,镉组LC3-II mRNA表达,镉毒死蜱联合组Beclin 1、Dynein和ATG5 mRNA表达具有时间效应。镉和毒死蜱单一及联合中毒通过氧化应激导致鲤鱼肝脏自噬,且镉和毒死蜱具有联合毒性。
【学位单位】：东北农业大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：X503.225
【部分图文】：

3 结果与分析3.1 鲤鱼肝脏组织的显微结构观察如图 3-1A-D 所示为鲤鱼肝脏组织第 30 天的显微结构。对照组（图 3-1A）肝细胞（hp）正常，细胞界限明显，细胞由中央静脉（cv）向外发散，排列正常。镉组（图 3-1B）肝细胞部分空泡化（vd），细胞排列凌乱。毒死蜱组（图 3-1C）肝细胞部分空泡化，细胞排列凌乱，细胞界限不明显。镉毒死蜱联合组（图 3-1D1）肝细胞大量空泡化，核致密（nd）明显，胞质浓缩（cc），出现部分坏死（ne），细胞排列凌乱，肝细胞间隙红细胞渗出（bc）。镉毒死蜱联合组（图 3-1D2）和（图 3-1D3）肝细胞大量空泡化，出现大量坏死细胞。

核膜进一步融合，染色质边集加重，线粒体大量空泡化，自噬泡数量明显增多。镉毒死蜱联合组（图3-2D2）和（图 3-2D3）能够观察到清晰明显的自噬体，且数量较其余三组明显增加。

死蜱组（P < 0.05）；所有时间点中，镉组中 SOD 活性显著高于毒死蜱组（P < 0.05）；对照组中 GSH 含量、CAT、SOD、GPx、GST 和 T-AOC 活性显著高于镉组、毒死蜱组和镉毒死蜱联合组（P < 0.05）；镉组和毒死蜱组中的 GSH 含量、CAT、SOD、GPx、GST 和T-AOC 活性显著高于镉毒死蜱联合组（P < 0.05）。镉组和毒死蜱组在 45 天的 GSH 含量显著低于 15 天和 30 天（P < 0.05）。镉毒死蜱联合组中的 45 天和 30 天的 GSH 含量显著低于 15 天（P < 0.05）。镉组、毒死蜱组和镉毒死蜱联合组中的 CAT 和 GPx 活性随时间的增加而显著降低（P < 0.05），具有时间效应，除GPx 镉毒死蜱联合组。毒死蜱组在 30 天和 45 天的 SOD 活性显著低于 15 天（P < 0.05）。镉毒死蜱联合组在 30 天和 45 天的 GST 活性显著低于 15 天（P < 0.05）。毒死蜱组在 15天和 45 天的 T-AOC 活性显著高于 30 天（P < 0.05）。
【参考文献】

相关期刊论文 前7条

1 韩英;郝其睿;魏菁;赵荣伟;牟振波;徐革锋;刘洋;;毒死蜱和阿特拉津对鲤肝脏的影响[J];东北农业大学学报;2015年03期

2 赵颖;姚苏梅;刘毅华;肖鹏飞;耿翠敏;朱国念;;毒死蜱对我国南方稻区水域中12种淡水鱼的毒性[J];生态毒理学报;2014年06期

3 李典宝;张玮;王丽卿;郝瑞娟;;锯齿新米虾对Cu~(2+)和毒死蜱毒性响应研究[J];生态毒理学报;2014年04期

4 王棋文;胡飞飞;王涛;袁燕;顾建红;刘学忠;卞建春;刘宗平;;镉诱导PC12细胞自噬的形态学观察[J];扬州大学学报(农业与生命科学版);2013年03期

5 郝东方;孙小巍;冯志晶;杨金丹;赵秀娟;孙长颢;;乙酰甲胺磷对大鼠睾丸组织氧化应激影响[J];中国公共卫生;2012年03期

6 熊小明;戴雯;李鹏;吴树金;胡敏;刘立英;;亚慢性亚毒性有机磷酯类杀虫剂抑制抗氧化酶而致兔血管内皮功能损伤(英文)[J];生物化学与生物物理进展;2010年11期

7 李鹏;尹雅玲;卢光洲;王倩倩;朱茉莉;梁金英;赵繁荣;;长期接触有机磷农药农民体内氧化应激水平的调查[J];工业卫生与职业病;2010年05期

相关博士学位论文 前2条

1 邢厚娟;阿特拉津和毒死蜱单一及联合暴露对鲤鱼毒理作用的研究[D];东北农业大学;2010年

2 徐维娜;敌百虫对异育银鲫抗氧化应激系统的影响及抗坏血酸对鱼体的保护作用[D];南京农业大学;2009年

相关硕士学位论文 前3条

1 李楠;镉经内质网应激途径诱导鸡肝细胞自噬的机制[D];东北农业大学;2014年

2 陈德纯;阿特拉津和毒死蜱单一及联合暴露对鲤鱼免疫器官自噬的影响[D];东北农业大学;2014年

3 刘罗慧;新生鼠暴露亚中毒阈剂量毒死蜱诱导脑组织氧化损伤[D];中南大学;2008年

本文编号：2884583