解淀粉芽孢杆菌YP6磷酸酯酶的基因克
发布时间：2020-12-31 05:23
磷酸酯酶可使含磷物质中的磷酯键水解,释放磷酸基团,生成相应的糖、醇及酚等,因而普遍应用于分子、医药和工业领域。对于微生物溶磷能力的研究多集中于有机酸类,而对磷酸酯酶的溶磷作用及磷酸酯酶降解农药的研究不多,论文从筛选高磷酸酯酶活性菌株出发,对其磷酸酯酶基因进行克隆异源表达,研究其酶学特性、其溶磷能力和在有机磷农药降解方面的应用,具有一定意义和价值。论文的主要研究结果如下:（1）从贵州磷矿上生长的植物根际,分离得到118株菌株,用磷酸苯二钠比色法筛选出7株具有磷酸酯酶活性的菌株,复筛得到一株高产磷酸酯酶的菌株YP6,通过对其16S rRNA进行鉴定,并命名为Bacillus amyloliquefaciens YP6;（2）根据B.amyloliquefaciens全基因组序列预测了B.amyloliquefaciens YP6中5个磷酸酯酶的基因,分别命名为ap1（684 bp）,ap2（1752 bp）,ap3（1380 bp）,ap4（1740 bp）和ap5（489 bp）;对5个基因克隆诱导表达之后进行纯化,酶活验证后AP2、AP3、AP4和AP5均表现出磷酸酯酶酶活;其中AP3...
【文章来源】：江南大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：53 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
磷酸酯酶的作用机制Fig.1-1Themechanismofphosphatases
图 1-2 OPs 的结构式Fig. 1-2 The structural formula of OPs早在 1973 年，科学家首次报道 OP 降解菌 Flavobacterium sp.[75]。Chen 等以微生土壤中的残留丁草胺发现，大多数的毛霉可将其降解，青霉和曲霉则能够大量吸胺[76]。随即，多种具有降解农药能力的微生物被发现，OP 降解菌主要为假单胞真菌[78]。由于毒死蜱应用广，对 OP 降解的研究，主要集中于对毒死蜱降解的研究ho 等研究了乳酸菌对毒死蜱的降解[79]；Anwar 等发现 Bacillus pumilus C2A1 对毒降解作用[80]；Ghanem 等人则发现 Klebsiella sp.对毒死蜱有高效降解能力和高耐]。目前，酶解农药已成研究热点。细菌降解 OP 的实质是由于酶促反应，通过体内酶，断裂 OP 中的磷酯键来达到目的。Munnecke 和 Hsieh 在 1975 年发现，磷酯酶具有水解对硫磷的作用[82]。近来研究表明，OP 水解酶主要为磷酸酶[83]和羧酸]。来源于 Spirulina platensis 中的 AP 可将毒死蜱降解为 3,5,6-三氯吡啶-2-酚[85]。OP 因其具有磷酯键，决定了磷酯键水解酶对其降解的广谱性，所以一种 OP 降解解多种 OP[86]。高明华等发现，环境中 pH 越高，OP 被降解越快[87]。AP 因其嗜
中的残留丁草胺发现，大多数的毛霉可将其降解，青霉和曲霉则能够]。随即，多种具有降解农药能力的微生物被发现，OP 降解菌主要为[78]。由于毒死蜱应用广，对 OP 降解的研究，主要集中于对毒死蜱降研究了乳酸菌对毒死蜱的降解[79]；Anwar 等发现 Bacillus pumilus C2作用[80]；Ghanem 等人则发现 Klebsiella sp.对毒死蜱有高效降解能力，酶解农药已成研究热点。细菌降解 OP 的实质是由于酶促反应，通断裂 OP 中的磷酯键来达到目的。Munnecke 和 Hsieh 在 1975 年发现有水解对硫磷的作用[82]。近来研究表明，OP 水解酶主要为磷酸酶[83源于 Spirulina platensis 中的 AP 可将毒死蜱降解为 3,5,6-三氯吡啶-2其具有磷酯键，决定了磷酯键水解酶对其降解的广谱性，所以一种 种 OP[86]。高明华等发现，环境中 pH 越高，OP 被降解越快[87]。AP被研究人员所关注。有机磷农药降解机制如图 1-3 所示，AP 通过水 1-3)，使之生成无毒或低毒产物，达到清理环境的效果[71]。因此，境的监测，还是一种非常有效的降解环境污染物的酶。
本文编号：2949049
【文章来源】：江南大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：53 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
磷酸酯酶的作用机制Fig.1-1Themechanismofphosphatases
图 1-2 OPs 的结构式Fig. 1-2 The structural formula of OPs早在 1973 年，科学家首次报道 OP 降解菌 Flavobacterium sp.[75]。Chen 等以微生土壤中的残留丁草胺发现，大多数的毛霉可将其降解，青霉和曲霉则能够大量吸胺[76]。随即，多种具有降解农药能力的微生物被发现，OP 降解菌主要为假单胞真菌[78]。由于毒死蜱应用广，对 OP 降解的研究，主要集中于对毒死蜱降解的研究ho 等研究了乳酸菌对毒死蜱的降解[79]；Anwar 等发现 Bacillus pumilus C2A1 对毒降解作用[80]；Ghanem 等人则发现 Klebsiella sp.对毒死蜱有高效降解能力和高耐]。目前，酶解农药已成研究热点。细菌降解 OP 的实质是由于酶促反应，通过体内酶，断裂 OP 中的磷酯键来达到目的。Munnecke 和 Hsieh 在 1975 年发现，磷酯酶具有水解对硫磷的作用[82]。近来研究表明，OP 水解酶主要为磷酸酶[83]和羧酸]。来源于 Spirulina platensis 中的 AP 可将毒死蜱降解为 3,5,6-三氯吡啶-2-酚[85]。OP 因其具有磷酯键，决定了磷酯键水解酶对其降解的广谱性，所以一种 OP 降解解多种 OP[86]。高明华等发现，环境中 pH 越高，OP 被降解越快[87]。AP 因其嗜
中的残留丁草胺发现，大多数的毛霉可将其降解，青霉和曲霉则能够]。随即，多种具有降解农药能力的微生物被发现，OP 降解菌主要为[78]。由于毒死蜱应用广，对 OP 降解的研究，主要集中于对毒死蜱降研究了乳酸菌对毒死蜱的降解[79]；Anwar 等发现 Bacillus pumilus C2作用[80]；Ghanem 等人则发现 Klebsiella sp.对毒死蜱有高效降解能力，酶解农药已成研究热点。细菌降解 OP 的实质是由于酶促反应，通断裂 OP 中的磷酯键来达到目的。Munnecke 和 Hsieh 在 1975 年发现有水解对硫磷的作用[82]。近来研究表明，OP 水解酶主要为磷酸酶[83源于 Spirulina platensis 中的 AP 可将毒死蜱降解为 3,5,6-三氯吡啶-2其具有磷酯键，决定了磷酯键水解酶对其降解的广谱性，所以一种 种 OP[86]。高明华等发现，环境中 pH 越高，OP 被降解越快[87]。AP被研究人员所关注。有机磷农药降解机制如图 1-3 所示，AP 通过水 1-3)，使之生成无毒或低毒产物，达到清理环境的效果[71]。因此，境的监测，还是一种非常有效的降解环境污染物的酶。
本文编号：2949049
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