假单胞菌NyZ12降解环己胺初始步骤冗余机制研究

发布时间：2021-01-22 10:05

　　环己胺作为一种重要的精细化工中间体,给大气和水体带来了严重的污染,该化合物还具有一定的致癌性。Pseudomonas plecoglossicida NyZ12是一株能利用环己胺为唯一碳源、氮源和能源生长的菌株,其环己胺代谢的分子生物学机理仍未阐述清楚。本实验室在前期研究假单胞菌NyZ12中环己胺的降解途径中,将amo2631克隆到广宿主表达载体pVLT33,在假单胞菌PaW340中表达和纯化,最终成功得到amo2631所表达蛋白,在其转化的过程中,也成功检测到产物环己酮的生成,验证了该基因的功能。然而,采用无痕敲除技术敲除了amo2631后,突变体仍然能够以环己胺为唯一碳氮源良好的生长,仅生长速率受到了一定的影响,表明了该菌株在环己胺的初始代谢步骤中存在代谢冗余机制,即可能含有两个或两个以上的基因共同完成环己胺到环己酮的代谢过程。本论文的目的在于探究环己胺的初始代谢步骤的冗余基因,充分揭示假单胞菌NyZ12代谢环己胺的分子机理。为了达到该目的,采用了生物信息学分析、基因组建库筛选和转座子插入突变体库三种方式筛选环己胺降解相关基因,得到了基因 orf671、orf5356、orf566... 

【文章来源】：武汉轻工大学湖北省

【文章页数】：75 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

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【参考文献】：
期刊论文
[1]Pseudomonas plecoglossicida NyZ12基因无痕敲除方法的建立[J]. 毛灵琪,李存治,闫达中.  生物技术通报. 2016(04)
[2]水体中基因组提取方法的比较及水体中铜绿假单胞菌检测技术的研究[J]. 张淑红,许文涛,石慧,程国灵,罗云波,黄昆仑.  食品工业科技. 2012(09)
[3]2,4-二硝基苯肼显色法测定环己酮含量[J]. 李凌凌,吕早生,黄乐繁,侯亚利,庹保华,刘郭飞.  化学与生物工程. 2010(05)

硕士论文
[1]环己胺降解菌NyZ12胺氧化酶基因敲除突变体的构建及特性研究[D]. 毛灵琪.武汉轻工大学 2016
[2]假单胞菌NyZ12中环己胺氧化酶基因的克隆、表达与纯化[D]. 李存治.武汉轻工大学 2016



本文编号：2993036