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Fas/FasL对镉致PC12细胞凋亡MAPK通路和线粒体通路的调控作用

发布时间:2021-08-11 04:08
  镉是一种常见的环境和工业重金属污染物,急性或慢性的镉蓄积均能引起多种组织和器官的损伤。大脑是镉毒性作用的重要靶器官之一,现有的研究表明,镉能够通过血脑屏障,引起神经细胞凋亡。Fas/FasL信号通路是最重要的死亡受体通路之一,在细胞凋亡过程中发挥重要作用。有研究表明,Fas/FasL信号通路可以介导MAPK通路和线粒体通路引起细胞凋亡。本课题组前期研究表明,镉可以通过Fas/FasL信号通路、MAPK通路和线粒体通路引起神经细胞凋亡,但镉致神经细胞凋亡Fas/FasL信号通路与MAPK通路、线粒体通路之间的联系机制尚不清楚。本试验以神经细胞株大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12细胞)为模型,通过体外试验探究了 Fas/FasL在镉致PC12细胞凋亡中的作用以及对MAPK通路和线粒体通路的调控机制。1.慢病毒介导Fas基因沉默PC12细胞株的构建为获得Fas基因沉默PC12细胞株,本试验通过3种不同干扰靶点的Fas shRNA慢病毒感染PC12细胞12h,用含有嘌呤霉素(工作浓度为4mg/L)的完全培养液持续培养细胞48h。通过荧光显微镜观察,计数100个细胞中表达绿色荧光蛋白的细胞个数,... 

【文章来源】:扬州大学江苏省

【文章页数】:73 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

Fas/FasL对镉致PC12细胞凋亡MAPK通路和线粒体通路的调控作用


图2-1-1慢病毒载体结构示意图??

基因沉默,细胞,慢病毒,转录水平


Fas?shFRNA?2??■??Fas?shRNA?3?■??H??图2-1-2慢病毒对PC12细胞的感染效率??Fig?2-1-2?Infection?efficiency?of?PC?12?cells?infected?by?lentivas基因沉默的鉴定??Fas?mRNA表达量的变化,结果显示(图2-1-3?)的转录水平无显著差异(p>〇.05);与NC组相比,Fas下降(p<〇.〇l)。??%??

蛋白,细胞,细胞凋亡


陈洁:Fas/FasL对镉致PC12细胞凋亡MAPK通路和线粒体通路的调控作用PC12细胞Fas蛋白沉默的鉴定??Westem-blot检测Fas蛋白表达量的变化,结果显示(图2-1-4),与Control组组Fas蛋白的表达量无显著差异(p>(X05);与NC组相比,FasshRNA组Fas量极显著下降(户<〇.〇1)。??§?15-.??

【参考文献】:
期刊论文
[1]jnk3基因在金鱼和斑马鱼不同发育时期胚胎与成体不同组织中的分化表达[J]. 陈丽莉,邹立军,熊振,刘姣,廖高鹏,刘文彬,刘少军,肖亚梅,李万程.  水产学报. 2011(02)
[2]p38丝裂原激活蛋白激酶对人胚胎肾293细胞一氧化氮合酶基因转录的调控[J]. 郭爱华,龚小卫,阚文宏,秦清和,邓鹏,王静珍,姜勇.  第一军医大学学报. 2003(03)
[3]Mechanisms of caspase activation and inhibition during apoptosis[J].   Cell Research. 2002(Z1)
[4]MAPK signal pathways in the regulation of cell proliferation in mammalian cells[J]. WEI ZHANG, Hui Tu LIU The Key Laboratory of Cell Proliferation and Regulation Biology of Ministry of Education, College of Life Sciences, Beijing Normal University, Beijing 100875, China.  Cell Research. 2002(01)

博士论文
[1]镉致大鼠神经细胞凋亡的线粒体途径及NAC的保护作用[D]. 江辰阳.扬州大学 2014

硕士论文
[1]Fas/FasL信号转导通路在镉致神经细胞凋亡中的作用及NAC的保护效应[D]. 张雅静.扬州大学 2016
[2]镉对体外培养大鼠大脑皮质神经细胞的毒性损伤及NAC保护效应的研究[D]. 张英.扬州大学 2009



本文编号:3335418

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