典型新烟碱类杀虫剂对人骨髓间充质干细胞的遗传毒性及机制研究
发布时间：2021-08-22 04:50
新烟碱类杀虫剂（Neonicotinoids,NEOs）是目前全球杀虫剂市场中用量最大的一类杀虫剂,由于其高效、广谱而被广泛应用。但研究表明该类杀虫剂对蜜蜂、鸟类乃至小鼠等非靶标生物产生毒性效应,其对人类健康的潜在危害尚不清楚。本研究选择三种代表性化合物吡虫啉（Imidacloprid,IMI）、烯啶虫胺（Nitenpyram,NIT）和啶虫脒（Acetamiprid,ACE）作为受试物,利用人骨髓间充质干细胞（Human bone marrow mesenchymal stem cells,HBMSCs）作为测试模型,分别从细胞水平和分子水平对NEOs的遗传毒性及机制进行研究。主要得到以下研究结果:（1）利用彗星实验对NEOs的遗传毒性进行检测,结果显示在不影响细胞存活的暴露浓度范围内（12.5-100μg/m L）,三种化合物均引起了HBMSCs的DNA损伤,且产生的DNA损伤存在剂量依赖关系,随暴露浓度的升高彗星尾部DNA所占比例（TailDNA%）变大、尾长（TL）和尾矩（OTM）增加。IMI最高暴露组产生的彗星TailDNA%、TL和OTM分别是对照组的4.67、2.64和5...
【文章来源】：大连理工大学辽宁省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：81 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
1 绪论
1.1 新烟碱类杀虫剂的应用现状及毒性效应研究进展
1.1.1 新烟碱类杀虫剂概述
1.1.2 新烟碱类杀虫剂的结构特点
1.1.3 新烟碱类杀虫剂的应用现状
1.1.4 新烟碱类杀虫剂对靶标生物的毒性作用机制
1.1.5 新烟碱类杀虫剂对非靶标生物的潜在毒性
1.2 人骨髓间充质干细胞在毒理学中的应用
1.3 环境污染物遗传毒性的检测方法
1.4 本文的研究思路及主要研究内容
1.4.1 选题背景及依据
1.4.2 研究目的和意义
1.4.3 研究内容
2 NEOs暴露对人骨髓间充质干细胞的DNA损伤
2.1 材料与方法
2.1.1 主要实验仪器与试剂
2.1.2 人骨髓间充质干细胞的体外培养
2.1.3 细胞存活率检测
2.1.4 细胞暴露
2.1.5 彗星实验
2.1.6 实验结果统计学分析
2.2 结果与讨论
2.2.1 NEOs暴露2天对HBMSCs增殖的影响
2.2.2 NEOs暴露对HBMSCs的DNA损伤
2.3 小结
3 NEOs暴露对HBMSCs成脂/成骨分化的影响
3.1 材料与方法
3.1.1 主要实验仪器与试剂
3.1.2 细胞存活率检测
3.1.3 成骨分化诱导及成骨标志物的检测
3.1.4 成脂分化诱导及成脂标志物的检测
3.1.5 实验结果统计学分析
3.2 结果与讨论
3.2.1 NEOs暴露7天对HBMSCs增殖的影响
3.2.2 NEOs的暴露对HBMSCs成骨分化的影响
3.2.3 NEOs的暴露对HBMSCs成脂分化的影响
3.3 小结
4 利用基因芯片研究NEOs的毒性机制
4.1 材料与方法
4.1.1 主要实验仪器与试剂
4.1.2 细胞暴露
4.1.3 基因芯片检测
4.1.4 实验结果统计学分析
4.2 结果与讨论
4.2.1 基因芯片结果的验证
4.2.2 差异表达基因及所富集通路的比较
4.2.3 差异表达基因的功能分析和通路分析
4.3 小结
结论
参考文献
附录A NEOs与Nicotine共同差异表达基因的GO分析
攻读硕士学位期间发表学术论文情况
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]蔬菜水果中的新烟碱类农药残留量与人群摄食暴露健康风险评价[J]. 谭颖,张琪,赵成,王心怡,李敬尧,王丹,周萤,卢晓霞. 生态毒理学报. 2016(06)
[2]新烟碱类杀虫剂对蜜蜂健康的影响[J]. 蔺哲广,孟飞,郑火青,周婷,胡福良. 昆虫学报. 2014(05)
[3]欧盟新烟碱类农药限用政策对我国农药相关产业的风险分析[J]. 段丽芳,李贤宾,柯昌杰,张宏军,季颖. 农药科学与管理. 2013(09)
[4]新烟碱杀虫剂在我国的登记情况(续)[J]. 山东农药信息. 2010(04)
[5]Response of Superoxide Dismutase,Catalase,and ATPase Activity in Bacteria Exposed to Acetamiprid[J]. XIAO-HUA YAO,HANG MIN,2, AND ZHEN-MEI LV College of Life Sciences, Zhejiang University, Hangzhou 310058, Zhejiang, China; College of Agriculture, Guangxi University, Nanning 530005, Guangxi, China. Biomedical and Environmental Sciences. 2006(04)
本文编号：3357034
【文章来源】：大连理工大学辽宁省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：81 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
1 绪论
1.1 新烟碱类杀虫剂的应用现状及毒性效应研究进展
1.1.1 新烟碱类杀虫剂概述
1.1.2 新烟碱类杀虫剂的结构特点
1.1.3 新烟碱类杀虫剂的应用现状
1.1.4 新烟碱类杀虫剂对靶标生物的毒性作用机制
1.1.5 新烟碱类杀虫剂对非靶标生物的潜在毒性
1.2 人骨髓间充质干细胞在毒理学中的应用
1.3 环境污染物遗传毒性的检测方法
1.4 本文的研究思路及主要研究内容
1.4.1 选题背景及依据
1.4.2 研究目的和意义
1.4.3 研究内容
2 NEOs暴露对人骨髓间充质干细胞的DNA损伤
2.1 材料与方法
2.1.1 主要实验仪器与试剂
2.1.2 人骨髓间充质干细胞的体外培养
2.1.3 细胞存活率检测
2.1.4 细胞暴露
2.1.5 彗星实验
2.1.6 实验结果统计学分析
2.2 结果与讨论
2.2.1 NEOs暴露2天对HBMSCs增殖的影响
2.2.2 NEOs暴露对HBMSCs的DNA损伤
2.3 小结
3 NEOs暴露对HBMSCs成脂/成骨分化的影响
3.1 材料与方法
3.1.1 主要实验仪器与试剂
3.1.2 细胞存活率检测
3.1.3 成骨分化诱导及成骨标志物的检测
3.1.4 成脂分化诱导及成脂标志物的检测
3.1.5 实验结果统计学分析
3.2 结果与讨论
3.2.1 NEOs暴露7天对HBMSCs增殖的影响
3.2.2 NEOs的暴露对HBMSCs成骨分化的影响
3.2.3 NEOs的暴露对HBMSCs成脂分化的影响
3.3 小结
4 利用基因芯片研究NEOs的毒性机制
4.1 材料与方法
4.1.1 主要实验仪器与试剂
4.1.2 细胞暴露
4.1.3 基因芯片检测
4.1.4 实验结果统计学分析
4.2 结果与讨论
4.2.1 基因芯片结果的验证
4.2.2 差异表达基因及所富集通路的比较
4.2.3 差异表达基因的功能分析和通路分析
4.3 小结
结论
参考文献
附录A NEOs与Nicotine共同差异表达基因的GO分析
攻读硕士学位期间发表学术论文情况
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]蔬菜水果中的新烟碱类农药残留量与人群摄食暴露健康风险评价[J]. 谭颖,张琪,赵成,王心怡,李敬尧,王丹,周萤,卢晓霞. 生态毒理学报. 2016(06)
[2]新烟碱类杀虫剂对蜜蜂健康的影响[J]. 蔺哲广,孟飞,郑火青,周婷,胡福良. 昆虫学报. 2014(05)
[3]欧盟新烟碱类农药限用政策对我国农药相关产业的风险分析[J]. 段丽芳,李贤宾,柯昌杰,张宏军,季颖. 农药科学与管理. 2013(09)
[4]新烟碱杀虫剂在我国的登记情况(续)[J]. 山东农药信息. 2010(04)
[5]Response of Superoxide Dismutase,Catalase,and ATPase Activity in Bacteria Exposed to Acetamiprid[J]. XIAO-HUA YAO,HANG MIN,2, AND ZHEN-MEI LV College of Life Sciences, Zhejiang University, Hangzhou 310058, Zhejiang, China; College of Agriculture, Guangxi University, Nanning 530005, Guangxi, China. Biomedical and Environmental Sciences. 2006(04)
本文编号：3357034
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