基于核酸放大和纳米金的卡那霉素光学生物传感方法研究

发布时间：2021-11-15 14:53

　　动物源性农产品、环境土壤以及水体中卡那霉素（Kana）残留会对人类健康以及生态环境带来严重影响,故应对农产品和环境样本中卡那霉素残留量进行严格监测。然而,传统检测方法费时、复杂且对仪器或人员要求较高,限制其推广应用。光学生物传感器具有简单便捷、响应快、检测限低、准确度好、灵敏度高以及成本低等优势在分析检测领域飞速发展;金纳米材料具有独特的光学特性,使其广泛地应用于光学传感检测中;无酶辅助的杂交链式反应（HCR）可实现常温下信号放大,以此达到对目标物痕量检测的目的。本文建立了金纳米材料为信号转换元件和HCR技术为信号放大手段的比色方法,实现对卡那霉素的检测。本文的研究内容和结果如下:（1）建立了基于金纳米球（AuNPs）和HCR辅助的光学生物传感方法,实现对牛奶中Kana的检测。首先根据Kana设计了含有其适配体HCR发夹探针,并通过凝胶电泳技术对所设计的发夹探针进行了表征。随后,分析了该检测方法的可行性,并对其关键参数进行了优化:AuNPs的较优浓度为6.5nM,AuNPs与HCR产物最佳结合时间为30 min,以及最佳测定时间为加盐后40 min。本研究建立的光学生物传感方法在2.1... 

【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：85 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
致谢
摘要
Abstract
英文缩略表
第一章 绪论
    1.1 卡那霉素及其现有检测方法的研究
        1.1.1 抗生素
        1.1.2 卡那霉素
        1.1.3 现有卡那霉素检测方法的研究现状
    1.2 基于金纳米材料的光学生物传感方法的研究
        1.2.1 金纳米材料
        1.2.2 金纳米材料应用于光学生物传感方法的研究现状
    1.3 基于核酸放大技术的光学生物传感方法的研究
        1.3.1 核酸酶辅助的核酸放大技术
        1.3.2 无酶辅助的核酸放大技术
        1.3.3 HCR应用于光学生物传感方法的研究现状
    1.4 研究目的、内容及技术路线
        1.4.1 研究目的
        1.4.2 研究内容
        1.4.3 技术路线
    1.5 本章小结
第二章 基于HCR放大策略的金纳米球比色法检测卡那霉素的研究
    2.1 引言
    2.2 实验部分
        2.2.1 实验试剂与仪器设备
        2.2.2 AuNPs的制备与表征
        2.2.3 基于HCR放大策略的金纳米球比色法的建立、表征及参数优化
        2.2.4 卡那霉素检测标准曲线的建立及其特异性评估
        2.2.5 牛奶中卡那霉素的检测
    2.3 结果与讨论
        2.3.1 AuNPs的基本特性研究
        2.3.2 基于HCR放大策略的金纳米球比色法的可行性研究
        2.3.3 基于HCR放大策略的金纳米球比色法的参数优化
        2.3.4 基于HCR放大策略的金纳米球比色法的检测性能研究
        2.3.5 基于HCR放大策略的金纳米球比色法的特异性评估
        2.3.6 基于HCR放大策略的金纳米球比色法在牛奶样品中的可行性研究
    2.4 本章小结
第三章 基于HCR放大策略的金纳米棒比色法的初步研究
    3.1 引言
    3.2 实验部分
        3.2.1 实验试剂与仪器设备
        3.2.2 AuNRs的制备、优化及表征
        3.2.3 基于HCR放大策略的金纳米棒比色法的建立、表征及参数优化
        3.2.4 DNAR检测标准曲线的建立及其特异性评估
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 AuNRs的基本特性研究
        3.3.2 基于HCR放大策略的金纳米棒比色法的可行性研究
        3.3.3 基于HCR放大策略的金纳米棒比色法的参数优化
        3.3.4 基于HCR放大策略的金纳米棒比色法的检测性能研究
        3.3.5 基于HCR放大策略的金纳米棒比色法的特异性评估
    3.4 本章小结
第四章 总结与展望
    4.1 主要研究结论
    4.2 主要创新点
    4.3 进一步展望
参考文献
个人简历


【参考文献】：
期刊论文
[1]我国水体中抗生素的污染现状、危害及防治建议(综述)[J]. 殷光权,赵扬,戴前梅.  安徽卫生职业技术学院学报. 2017(05)
[2]基于CdS纳米颗粒和HRP-AuNPs-apt的卡那霉素电化学发光适配体传感器研究[J]. 宋海燕,康天放,鲁理平,程水源.  化学研究与应用. 2017(05)
[3]鱼精蛋白-核酸适配体-金纳米技术快速检测牛奶中的卡那霉素[J]. 贾向阳,尤慧艳,付秀丽.  色谱. 2017(03)
[4]当代抗生素发展的挑战与思考[J]. 刘昌孝.  中国抗生素杂志. 2017(01)
[5]化学发光在生化分析中的应用研究进展[J]. 刘萌,王子月,张春阳.  分析化学. 2016(12)
[6]固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法测定畜禽饮用水中23种抗生素和3种β-受体激动剂[J]. 石奥.  色谱. 2016(02)
[7]养殖业抗生素滥用的控制措施[J]. 张敏.  湖北畜牧兽医. 2016(02)
[8]一种基于荧光微球标记的卡那霉素免疫层析定量方法的建立[J]. 徐飞,周洁,吴超,王建芬,丁双阳,李秀波.  中国农业科学. 2015(21)
[9]畜禽养殖过程抗生素使用与耐药病原菌及其抗性基因赋存的研究进展[J]. 隋倩雯,张俊亚,魏源送,陈梅雪,董红敏,熊继海.  生态毒理学报. 2015(05)
[10]金纳米棒的制备、生长机理及纯化[J]. 鲁闻生,王海飞,张建平,江龙.  化学进展. 2015(07)

博士论文
[1]农产品中真菌毒素检测用新型光学纳米生物传感器的研究[D]. 徐霞.浙江大学 2013

硕士论文
[1]基于纳米金颗粒和乳胶微球的卡那霉素免疫分析方法的建立及初步应用[D]. 江羚.江苏大学 2017
[2]抗卡那霉素单克隆抗体的制备及鉴定[D]. 栗宁.郑州大学 2014
[3]基于核酸信号放大技术的蛋白质测定新方法研究[D]. 陈春霏.湖南大学 2013
[4]基于核酸内切酶及RNA连接酶的循环放大检测DNA及肿瘤细胞[D]. 丁天荣.青岛科技大学 2012
[5]毛细管电泳法在手性药物分离分析中的应用研究[D]. 李艺.广东药学院 2011



本文编号：3496989