苯并芘和镉单一及复合暴露下厚壳贻贝抗氧化反应以及CYP3A基因的表达
发布时间：2022-12-05 17:05
近年来,我国沿海海域环境有逐渐恶化的趋势,重金属、有机及无机污染日趋严重。厚壳贻贝是浙江舟山海域重要的特色经济贝类,具有较高的经济价值和营养价值。作为一种滤食附着生存的生物,厚壳贻贝对海洋环境中的污染物具有很强的生物富集作用。一方面贝类富集的重金属和持久性有机物可通过食物链传递,进而对人体造成伤害;另一方面当富集超标时,对厚壳贻贝自身也会造成伤害,以致抗病力减弱,病害频发。深入了解厚壳贻贝响应外界环境刺激的应激机制,筛选抗逆分子靶标,可为厚壳贻贝抗逆育种提供理论支持,对厚壳贻贝产业可持续发展意义重大。鉴于细胞色素P450超家族是一种亚铁血红素-硫醇盐蛋白,在内源性化合物的生物合成和外源性物质的代谢转化中起着关键作用,本研究克隆了厚壳贻贝CYP450家族重要成员CYP3A的两个亚型:McCYP3A1和McCYP3A2,鉴定了其分子特征,分析了McCYP3A1和McCYP3A2在镉和苯并芘单一及复合暴露下的时空表达模式。同时分析了镉和苯并芘单一及复合暴露下厚壳贻贝脂质过氧化水平（通过测定丙二醛MDA含量）以及抗氧化酶系统包括超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）的抗氧化反应。主要研...
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
引言
第一章 文献综述
1.1 厚壳贻贝及其养殖现状
1.2 主要海洋污染物及相关研究进展
1.2.1 海洋重金属污染
1.2.2 海洋有机物污染
1.2.3 重金属有机物污染的相关研究
1.3 细胞色素P450 的结构和功能
1.3.1 细胞色素P450 的结构特征
1.3.2 细胞色素P450 的功能
1.4 细胞色素P4503A
1.5 抗氧化防御系统
1.5.1 超氧化物歧化酶(SOD)
1.5.2 过氧化氢酶(CAT)
1.5.3 脂质过氧化(LPO)与丙二醛(MDA)
1.6 研究目的和意义
第二章 厚壳贻贝CYP3A基因CDNA克隆
2.1 实验材料
2.1.1 样品材料
2.1.2 实验试剂及仪器
2.2 实验方法
2.2.1 总RNA的提取与质量检测
2.2.2 逆转录合成cDNA
2.2.3 厚壳贻贝CYP3A核心序列扩增
2.2.4 PCR产物的鉴定和胶回收
2.2.5 生物信息学分析
2.3 结果与讨论
2.3.1 厚壳贻贝基因克隆及分子特征分析
2.3.2 厚壳贻贝系统进化树分析
第三章 厚壳贻贝CYP3A基因在苯并芘和镉暴露下在鳃和消化腺组织的表达模式
3.1 实验材料
3.1.1 实验样品
3.1.2 实验仪器及试剂
3.2 实验方法
3.2.1 苯并芘胁迫
3.2.2 重金属镉胁迫
3.2.3 RNA的提取与cDNA的合成
3.2.4 荧光定量PCR
3.2.5 数据分析
3.3 实验结果
3.3.1 厚壳贻贝CYP3A基因在鳃组织的表达模式
3.3.2 厚壳贻贝CYP3A基因在消化腺组织的表达模式
3.4 讨论
第四章 苯并芘和镉暴露对厚壳贻贝鳃和消化腺组织抗氧化系统的影响
4.1 实验材料
4.1.1 实验样品
4.1.2 实验仪器和试剂
4.1.3 样品制备
4.2 解毒代谢指标测定方法
4.3 数据处理和分析
4.4 实验结果
4.4.1 厚壳贻贝鳃组织SOD,CAT活力及MDA含量的影响
4.4.2 厚壳贻贝消化腺组织SOD,CAT活力及MDA含量的影响
4.5 讨论
结论
参考文献
致谢
在读期间发表的学术论文及研究成果
附录
【参考文献】：
期刊论文
[1]多环芳烃的海洋环境行为及其代谢产物的研究进展[J]. 李先国,张庆红,刘思敏,东野长旭. 中国海洋大学学报(自然科学版). 2009(03)
[2]大黄鱼（Pseudosciaena crocea）细胞色素P450 CYP4F7基因的克隆及表达分析[J]. 娄绘芳,黄艳青,吴信忠. 海洋学报(中文版). 2008(04)
[3]厚壳贻贝人工繁殖技术的研究[J]. 常抗美,吴剑锋. 南方水产. 2007(03)
[4]PAH（多环芳烃）的危害及产生的途径[J]. 王桂山,仲兆庆,王福涛. 山东环境. 2001(02)
[5]细胞色素P450的研究进展[J]. 夏伟. 国外医学(卫生学分册). 2000(01)
[6]药物代谢中的肝细胞色素P450[J]. 骆文香,张银娣. 药学进展. 1999(01)
[7]翡翠贻贝人工育苗技术[J]. 丁勇,游克仁. 水产科学. 1993(06)
[8]厚壳贻贝室内人工育苗初获成功[J]. 水产科技情报. 1978(07)
博士论文
[1]镉、铜分别胁迫虾夷扇贝的毒性作用机制研究[D]. 孟晓林.中国科学院研究生院（海洋研究所） 2013
[2]几种重金属和有机污染物对文蛤Meretrxi meretrix生态毒理效应的研究[D]. 王清.中国科学院研究生院（海洋研究所） 2010
硕士论文
[1]重金属与苯并芘在贻贝体内的复合毒性效应[D]. 张翼飞.浙江大学 2017
[2]汞和镉对紫贻贝（Mytilus edulis）的单一与联合作用效应[D]. 潘京津.中国海洋大学 2015
[3]多环芳烃化合物对栉孔扇贝致毒机理的研究[D]. 苗晶晶.中国海洋大学 2006
本文编号：3710094
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
引言
第一章 文献综述
1.1 厚壳贻贝及其养殖现状
1.2 主要海洋污染物及相关研究进展
1.2.1 海洋重金属污染
1.2.2 海洋有机物污染
1.2.3 重金属有机物污染的相关研究
1.3 细胞色素P450 的结构和功能
1.3.1 细胞色素P450 的结构特征
1.3.2 细胞色素P450 的功能
1.4 细胞色素P4503A
1.5 抗氧化防御系统
1.5.1 超氧化物歧化酶(SOD)
1.5.2 过氧化氢酶(CAT)
1.5.3 脂质过氧化(LPO)与丙二醛(MDA)
1.6 研究目的和意义
第二章 厚壳贻贝CYP3A基因CDNA克隆
2.1 实验材料
2.1.1 样品材料
2.1.2 实验试剂及仪器
2.2 实验方法
2.2.1 总RNA的提取与质量检测
2.2.2 逆转录合成cDNA
2.2.3 厚壳贻贝CYP3A核心序列扩增
2.2.4 PCR产物的鉴定和胶回收
2.2.5 生物信息学分析
2.3 结果与讨论
2.3.1 厚壳贻贝基因克隆及分子特征分析
2.3.2 厚壳贻贝系统进化树分析
第三章 厚壳贻贝CYP3A基因在苯并芘和镉暴露下在鳃和消化腺组织的表达模式
3.1 实验材料
3.1.1 实验样品
3.1.2 实验仪器及试剂
3.2 实验方法
3.2.1 苯并芘胁迫
3.2.2 重金属镉胁迫
3.2.3 RNA的提取与cDNA的合成
3.2.4 荧光定量PCR
3.2.5 数据分析
3.3 实验结果
3.3.1 厚壳贻贝CYP3A基因在鳃组织的表达模式
3.3.2 厚壳贻贝CYP3A基因在消化腺组织的表达模式
3.4 讨论
第四章 苯并芘和镉暴露对厚壳贻贝鳃和消化腺组织抗氧化系统的影响
4.1 实验材料
4.1.1 实验样品
4.1.2 实验仪器和试剂
4.1.3 样品制备
4.2 解毒代谢指标测定方法
4.3 数据处理和分析
4.4 实验结果
4.4.1 厚壳贻贝鳃组织SOD,CAT活力及MDA含量的影响
4.4.2 厚壳贻贝消化腺组织SOD,CAT活力及MDA含量的影响
4.5 讨论
结论
参考文献
致谢
在读期间发表的学术论文及研究成果
附录
【参考文献】：
期刊论文
[1]多环芳烃的海洋环境行为及其代谢产物的研究进展[J]. 李先国,张庆红,刘思敏,东野长旭. 中国海洋大学学报(自然科学版). 2009(03)
[2]大黄鱼（Pseudosciaena crocea）细胞色素P450 CYP4F7基因的克隆及表达分析[J]. 娄绘芳,黄艳青,吴信忠. 海洋学报(中文版). 2008(04)
[3]厚壳贻贝人工繁殖技术的研究[J]. 常抗美,吴剑锋. 南方水产. 2007(03)
[4]PAH（多环芳烃）的危害及产生的途径[J]. 王桂山,仲兆庆,王福涛. 山东环境. 2001(02)
[5]细胞色素P450的研究进展[J]. 夏伟. 国外医学(卫生学分册). 2000(01)
[6]药物代谢中的肝细胞色素P450[J]. 骆文香,张银娣. 药学进展. 1999(01)
[7]翡翠贻贝人工育苗技术[J]. 丁勇,游克仁. 水产科学. 1993(06)
[8]厚壳贻贝室内人工育苗初获成功[J]. 水产科技情报. 1978(07)
博士论文
[1]镉、铜分别胁迫虾夷扇贝的毒性作用机制研究[D]. 孟晓林.中国科学院研究生院（海洋研究所） 2013
[2]几种重金属和有机污染物对文蛤Meretrxi meretrix生态毒理效应的研究[D]. 王清.中国科学院研究生院（海洋研究所） 2010
硕士论文
[1]重金属与苯并芘在贻贝体内的复合毒性效应[D]. 张翼飞.浙江大学 2017
[2]汞和镉对紫贻贝（Mytilus edulis）的单一与联合作用效应[D]. 潘京津.中国海洋大学 2015
[3]多环芳烃化合物对栉孔扇贝致毒机理的研究[D]. 苗晶晶.中国海洋大学 2006
本文编号：3710094
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