碳酸盐矿化菌的分离筛选及生物注浆实验研究

发布时间：2024-04-11 01:59

　　传统岩土工程加固材料的高能耗，高污染问题成为了世界各国关注的焦点。研发能耗低、环境友好的岩土工程加固新技术，具有重要的现实意义。微生物诱导碳酸钙沉积（MICP）技术以其环境友好、能耗低的优点，成为岩土工程加固领域的研究热点。 本文开展了碳酸盐矿化菌的分离筛选及生物注浆实验研究，取得的主要研究成果如下： 采用选择性富集培养、平板分离的方法，从土壤中分离出5株尿素分解菌，研究了其生长特性，确定了其最适培养条件为：培养基初始pH9，接种量4%，温度35℃，摇床转速200r/min。 通过对所分离菌株的脲酶活性和诱导矿化沉积能力的研究，筛选出了1株脲酶活性高、沉积量大的菌株。对沉积物的扫描电镜（SEM）、能谱（EDS）和X射线衍射（XRD）检测结果表明，其诱导沉积物为碳酸钙。采用形态学、革兰氏染色和16S rDNA序列同源性分析，确定该菌株为巴斯德芽孢杆菌。该株巴斯德芽孢杆菌在对数中后期的脲酶活性最高，单体脲酶活性达1.05mmol/(min·OD)。适量的Ni2+可明显提高脲酶活性，当培养基中NiCl2含量为10mg/L，单体脲酶活性提高66%。 钙源种类和浓度影响细菌诱导碳酸钙沉积能力。以...

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1-1技术路线如图

菌株脲酶活性和诱导沉积能力的检测，筛选出脲酶活性高、沉积量大的菌株。研究Ni2+、钙源种类和浓度对脲酶活性及诱导沉积能力的影响，并对其沉积物进行扫描电镜（SEM）、能谱（EDS）及X射线衍射（XRD）表征。（3）菌种鉴定参照生理生化鉴定方法[50]及16SrDNA菌种....

图2-1采集的土样

图2-1采集的土样将土壤样品上清液进行富集培养，无菌的富集培养液清澈透亮，培养24h后选择性富集培养基变得浑浊，轻轻摇动时看见云雾状的菌体，由此可知富集培养液中有大量的细菌被富集。牛皮纸分口的锥形瓶口可以闻到浓烈的氨气味，可知培养基内存在可以将尿素分解产生氨气的细菌。富集前....

图2-2无菌的培养基与富集后的培养基

可知培养基内存在可以将尿素分解产生氨气的细菌。富集前后的富集培养基见图2-2。富集培养前富集培养后图2-2无菌的培养基与富集后的培养基2.3.2细菌的分离与纯化将选择性富集培养后的菌悬液涂布于NA-尿素固体培养基上，培养48h后，固体培养基上可见大量菌落。目的细菌....

图2-3分离结果

色的变化初步区分目的菌株与杂菌。碱性条件下溴甲酚紫显紫色。用无菌牙签挑取固体培养基上的紫色菌落进行纯化。实验共分离纯化得到5柱菌株尿素分解菌，细菌分离结果见图2-3。

本文编号：3950700