氰乙基化废纸材料降解菌的混合培养初步研究

发布时间：2017-10-02 18:19

  本文关键词：氰乙基化废纸材料降解菌的混合培养初步研究

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【摘要】：随着塑料的用量与日俱增,传统塑料所带来的弊病也越发凸显,白色污染问题已经成为全球关注的社会性问题。本研究对氰乙基化改性纸材的针对性降解菌的复配进行了实验探究,主要研究内容和结果如下：(1)用纤维素刚果红培养基,经过富集培养和多次涂布、划线分离提纯,从不同菌源中筛选出18株具有氰乙基化改性纸材降解能力的菌株,将它们分别编号为A、A2、A3、A4、A5、A6、B、B2、B3、B4、B5、B6、C2、C3、C4、C5、 C6、C7。(2)分别测定这18个样本的纤维素酶活性,结果显示羧甲基纤维素酶活性较强的是C2、A5、C5；滤纸酶活性较强的是A、B、A4;β-葡萄糖苷酶活性较强的是C2、A5、A2,共7个菌株。对菌株进行生理生化检测和16s rRNA测序分析,结合菌落形态特征和生理生化特性,鉴定结果显示A1样本属于Alcaligenes sp.,A2菌属于Ochrobactrum sp.,A4菌属于Brevibacillus sp., A5菌属于Pseudomonas Mendocina sp., B1菌属于Pseudomonas sp., C2和C5属于Brevibacillus sp.。(3)以降解菌降解产生的还原糖含量和改性纸材的降解率为指标进行实验条件的优化。研究培养温度、吐温-80含量、pH值、复配接种比、培养时间、氮源种类和氮源含量对降解菌降解纸材的能力的影响,并通过正交试验检验了培养温度、吐温-80含量、pH值和摇床转速对降解能力影响的大小。结果表明产酶效果最高的菌株组合和最佳接种比为C2:A4:C5=1:2:1.最佳培养基为：蛋白胨1g/L,吐温-80 0.3%,氰乙基化改性纸材lOg, MgSO_40.5g,K_2HPO_41g,NaC10.5g,pH=8,蒸馏水水 1OOOmL,121℃灭菌20min;最佳培养环境为：温度33℃,摇床转速140rpm,培养时间为3d。实验得到了一个具有较高降解能力的降解菌混合培养体系,并初步探明了该培养体系的基本特性使降解能力优化,最终降解率为3d降解38%。提高了改性纸材在生活中运用的环保性,为新型热塑性材料在生物降解领域的实验提供了数据。
【关键词】：氰乙基化改性纸 降解菌 酶活性 降解率
【学位授予单位】：云南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：X172
【目录】：

• 摘要3-4
• Abstract4-8
• 第一章 绪论8-18
• 1.1 可降解材料的研究进展8-11
• 1.1.1 光降解材料8-9
• 1.1.2 可生物降解材料9-10
• 1.1.3 光-生物双降解、复合降解材料10-11
• 1.2 生物降解纤维素的研究进展11-14
• 1.2.1 纤维素生物降解机理11-12
• 1.2.2 微生物降解纤维素12-14
• 1.3 微生物降解氰乙基化废纸14-15
• 1.4 课题来源和研究目的、意义及研究内容和研究思路15-18
• 1.4.1 课题来源15
• 1.4.2 课题研究的目的和主要创新点15-16
• 1.4.3 主要研究内容16
• 1.4.4 课题思路16-18
• 第二章 实验方法18-31
• 2.1 材料与方法18-20
• 2.1.1 实验材料18-20
• 2.2 实验方法20-31
• 2.2.1 降解菌的培养与筛选20-22
• 2.2.2 降解菌的生理生化特性测试22-27
• 2.2.3 降解菌系统发育树绘制27
• 2.2.4 降解菌的混合培养研究27-28
• 2.2.5 混合培养培养条件优化28-31
• 第三章 降解菌的分离鉴定31-41
• 3.1 引言31
• 3.2 实验试剂与仪器31
• 3.3 实验方法31
• 3.4 实验结果31-40
• 3.4.1 初步筛选结果31-32
• 3.4.2 降解菌的筛选和纯化32-34
• 3.4.3 降解菌纤维素酶活性测试34-36
• 3.4.4 降解菌形态观察和鉴定36-40
• 3.5 本章小结40-41
• 第四章 降解菌混合培养条件优化41-61
• 4.1 引言41
• 4.2 实验试剂和仪器41
• 4.3 实验方法41
• 4.4 实验结果41-60
• 4.4.1 混菌培养各组合降解性能41-43
• 4.4.2 混合培养条件优化43-60
• 4.5 本章小结60-61
• 第五章 结论与展望61-63
• 5.1 实验结果61-62
• 5.2 展望62-63
• 参考文献63-68
• 附录68-78
• 致谢78

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