一种快速测定牦牛皮胶和牛皮胶中18种氨基酸的PITC柱前衍生HPLC法

发布时间：2017-10-10 22:41

  本文关键词：一种快速测定牦牛皮胶和牛皮胶中18种氨基酸的PITC柱前衍生HPLC法

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【摘要】：建立一种有效测定牦牛皮胶与牛皮明胶中18种氨基酸含量的异硫氰酸苯酯(PITC)柱前衍生-高效液相色谱法。对PITC衍生方法进行了优化,方法无需干燥和有机溶剂萃取过量PITC的步骤。牦牛皮使用胃蛋白酶在37℃下酶解72 h,酶解物冷冻干燥保存。样品用6.0 mol/L盐酸,110℃水解后,以PITC为衍生试剂进行衍生处理。采用Shiseido Capcell Pak C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为0.14 mol/L乙酸钠-0.5 m L/L三乙胺水溶液(p H 6.08)和60%乙腈,梯度洗脱,流速为1 m L/min,检测波长为254 nm。18种氨基酸在0.2~80 mg/L浓度范围内与峰面积间的线性关系良好(r2≥0.999 2),检出限为0.01~0.39 mg/kg,平均回收率为78.7%~121.0%,相对标准偏差(RSD)为0.05%~12.0%。结果表明,该方法衍生化步骤简单、灵敏度高、前处理时间短,可用于牛科动物皮胶中多种氨基酸成分和含量的测定。
【作者单位】： 中国科学院西北高原生物研究所青海省藏药药理学和安全性评价研究重点实验室;中国科学院藏药重点实验室;中国科学院大学;
【关键词】： 牦牛皮明胶 牛皮明胶 氨基酸 柱前衍生 异硫氰酸苯酯 高效液相色谱法
【基金】：青海省自然科学基金青年项目(2015-ZJ-924Q) 中国科学院“西部之光”人才培养引进计划
【分类号】：R284.1;O657.72
【正文快照】： 牦牛(Bos grunniens)是世界上除了人类之外生活在海拔最高处的哺乳动物,是高原畜牧业最重要的优势畜种[1-3]。牦牛皮胶由牦牛皮经科学方法提炼而成,可益气生血、健脾补肾,主要用于营养性贫血、久病气虚无力等症[4]。新鲜牛皮中蛋白质高达30%~35%,氨基酸是蛋白质的基本组成单位，

本文编号：1009049