纳米富勒烯双加成RGD肽的合成制备及自由基活性
本文关键词:纳米富勒烯双加成RGD肽的合成制备及自由基活性
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【摘要】:富勒烯因特殊的笼型结构而具有独特的物理化学性质,使其能够应用在生物医学领域,尤其在抗菌、抗氧化、药物载体等方面有相当好的应用前景。富勒烯的疏水性阻碍了其在生物医学领域的研究,为此我们采用化学修饰的方法来改善其水溶性,拟采用靶向性较好的RGD肽与富勒烯进行连接。本论文设计合成了富勒烯双加成RGD肽,旨在改善富勒烯水溶性的同时提高其在生物学方面的性能。本文采用固液相结合的方法合成了两种富勒烯RGD肽衍生物:富勒烯单加成RGD肽衍生物(FP(RGD))、富勒烯双加成RGD肽衍生物(FbP(RGD)),并且应用有机溶剂交换法把以上两种富勒烯衍生物制备成纳米颗粒水悬液。最后使用邻苯三酚自氧化的方法测定了纳米颗粒对超氧阴离子自由基的作用,用甲基紫-Fenton体系的方法测定了纳米颗粒对羟基自由基的作用。研究成果如下所示:1.用固液相结合的方法顺利合成了目标产物:FP(RGD)和FbP(RGD),并用MALDI-TOF、FT-IR、UV-Vis等测试对其结构进行了表征确认。2.采用有机溶剂交换的方法,成功制备了FP(RGD)和FbP(RGD)的纳米颗粒水悬液。并利用粒度分布、表面Zeta-电位和透射电子显微镜(TEM)对其进行了表征检测,其结果表明这两种纳米颗粒水悬液颗粒大小均匀,分散良好,体系稳定,且TEM显示两种纳米颗粒均有良好的形貌特征。3.用邻苯三酚自氧化的方法测定纳米颗粒水悬液对超氧阴离子自由基的作用,实验表明,FP(RGD)、FbP(RGD)、FPy(富勒烯单加成吡咯烷)和FbPy(富勒烯双加成吡咯烷)的纳米颗粒水悬液在黑暗条件下对超氧阴离子自由基有清除作用。清除能力排序分别为:FP(RGD)FPy,FbP(RGD)FbPy1,且FP(RGD)和FbP(RGD)的清除能力远远大于同浓度的VC。4.用甲基紫-Fenton体系的方法测定纳米颗粒水悬液对羟基自由基的作用,实验表明,FPy、FbPy、FP(RGD)和FbP(RGD)的纳米颗粒水悬液在黑暗条件下对羟基自由基有清除作用。清除能力排序分别为:FP(RGD)FPy,FbP(RGD)FbPy1,且FP(RGD)、FbP(RGD)的清除能力远远大于同浓度的甘露醇。在光照条件下,四种衍生物的纳米颗粒水悬液均可以产生羟基自由基,产生能力排序分别为:FP(RGD)FPy,FbP(RGD)FbPy1。结果证实,本文所合成的两种富勒烯RGD肽衍生物的水溶性都有所改善,并且对超氧阴离子自由基和羟基自由基都有很强的清除能力。RGD肽的引入使得富勒烯在自由基清除能力方面有了很大改观,从而也进一步说明我们所设计的富勒烯RGD肽类衍生物在生物医学领域有很好的应用前景。
【关键词】:富勒烯 RGD肽 双加成 纳米颗粒 自由基清除
【学位授予单位】:郑州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:O629.72
【目录】:
- 缩写词汇表4-5
- 摘要5-7
- Abstract7-12
- 1 绪论12-26
- 1.1 引言12-13
- 1.2 水溶性富勒烯衍生物的制备13-20
- 1.2.1 共价键结合法制备水溶性富勒烯衍生物13-19
- 1.2.2 非共价键结合法制备水溶性富勒烯衍生物19
- 1.2.3 有机溶剂介导法制备富勒烯纳米颗粒水悬液19-20
- 1.3 RGD肽的功能和应用20-21
- 1.4 富勒烯及其衍生物的生物学效应21-24
- 1.4.1 抗菌性21
- 1.4.2 抗氧化活性21-22
- 1.4.3 细胞毒性22-23
- 1.4.4 药物载体23-24
- 1.5 本课题的选题意义24-25
- 1.6 本课题的研究内容25-26
- 2 富勒烯双加成RGD肽衍生物的合成26-48
- 2.1 引言26-27
- 2.2 实验部分27-36
- 2.2.1 试剂与仪器27-28
- 2.2.2 合成路线及反应机理28-33
- 2.2.3 固相合成RGD肽33-34
- 2.2.4 富勒烯单加成RGD肽的合成34-35
- 2.2.5 富勒烯双加成RGD肽的合成35-36
- 2.2.6 溶解度实验36
- 2.3 结果与讨论36-46
- 2.3.1 固液相合成方法的选择36-37
- 2.3.2 树脂的选择与溶胀37-38
- 2.3.3 氨基酸保护基的选择38-39
- 2.3.4 富勒烯中间体原料的选择39
- 2.3.5 反应过程监测39-40
- 2.3.6 反应条件的确定40-41
- 2.3.7 产物的结构分析41-46
- 2.4 本章小结46-48
- 3 富勒烯RGD肽衍生物纳米颗粒水悬液的制备48-55
- 3.1 引言48
- 3.2 实验部分48-49
- 3.2.1 试剂与仪器48-49
- 3.2.2 富勒烯RGD肽类衍生物纳米颗粒水悬液的制备49
- 3.2.3 激光动态光衍射(DLS)测定粒度分布49
- 3.2.4 表面Zeta-电位测定49
- 3.2.5 透射电子显微镜(TEM)拍照49
- 3.3 结果与讨论49-53
- 3.3.1 制备方法的研究49-50
- 3.3.2 粒度分布测定结果50-51
- 3.3.3 Zeta电位分析测定结果51
- 3.3.4 透射电子显微镜测定结果51-53
- 3.4 本章小结53-55
- 4 富勒烯RGD肽衍生物纳米颗粒水悬液的自由基效应55-68
- 4.1 引言55
- 4.2 富勒烯RGD肽纳米颗粒水悬液对超氧阴离子自由基的清除55-59
- 4.2.1 原理55
- 4.2.2 试剂与仪器55-56
- 4.2.3 实验部分56-57
- 4.2.4 结果与讨论57-59
- 4.3 富勒烯RGD肽纳米颗粒水悬液对羟基自由基的清除59-67
- 4.3.1 原理59-60
- 4.3.2 试剂与仪器60
- 4.3.3 实验部分60-61
- 4.3.4 结果与讨论61-67
- 4.4 本章小结67-68
- 5 结论与展望68-70
- 5.1 结论68-69
- 5.2 创新点69
- 5.3 展望69-70
- 参考文献70-75
- 个人简历及在学期间发表的学术论文与研究成果75-76
- 致谢76
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