基于衍生化β-环糊精液相色谱和毛细管电色谱的手性药物分析

发布时间：2017-12-02 23:09

  本文关键词：基于衍生化β-环糊精液相色谱和毛细管电色谱的手性药物分析

  更多相关文章： 高效液相色谱法 毛细管电色谱法 β-环糊精衍生物 对映体分析 手性药物和手性农药

【摘要】：手性药物和手性农药对映体在药效、药理、代谢和毒理的差异性日益受到国际社会的高度重视,手性问题已成为当今药物安全和食品安全中急需解决的两大难题。因此,发展手性分离材料和手性分析技术不仅具有重要的研究意义,也存在良好的应用前景。本论文基于衍生化β-环糊精手性配体,制备和表征β-环糊精高效液相色谱(HPLC)手性柱和开管毛细管电色谱(CEC)柱,通过优化分离条件,成功地拆分了实现了柚皮甙、尼卡地平、己唑醇、粉唑醇等几种常见手性药物和农药对映体,并分别建立了对映体含量快速测定的液相色谱和毛细管电色谱新方法,为药物安全和食品安全分析服务。利用环糊精修饰的有序介孔固定相填充的液相色谱柱手性选择性高,色谱性能稳定,通透性好等特点,有利于快速分析。同时,将带电荷环糊精修饰到毛细管内壁,能增加电渗流,借助固定相和流动相中环糊精的协同作用,提高电色谱手性分离能力,开管电色谱法是一种低成本、环境友好微分离技术。通过注重分离条件优化和实际样品测定,期望将来在手性药物分析方面得到更广泛的应用。1、高效液相色谱和毛细管电泳作为两种主要的手性分离方法己取得了重要进展。本文就近年来有关固定相的发展、手性药物分析方法和手性添加剂电泳法进行了较全面的总结,作为本论文选题和研究工作的理论依据。2、采用自制的苯氨基甲酸酯衍生化β-环糊精键合SBA-15手性固定相,以简单的甲醇-水作流动相,成功地拆分了柚皮甙对映体。考察了流动相组成、柱温、检测波长等对柚皮甙拆分和测定的影响,优化的色谱条件为:流动相为甲醇-水(55:45,v/v),流速0.5 mL/min,柱温20 oC,进样量10μL,检测波长为285 nm。基于上述条件,对中草药化橘红、香橼、枳壳及柚皮中的柚皮甙对映体进行了含量测定。测得化橘红中柚皮甙两对映体的含量分别为10.42 mg/g和15.84 mg/g;香橼中为15.39 mg/g和49.52 mg/g;枳壳中为16.53 mg/g和95.80 mg/g;柚皮中为18.47 mg/g和30.98 mg/g。柚皮甙对映体均在0.5~500μg/mL浓度范围内呈良好的线性关系(r≥0.995),最低检出限为0.04μg/mL,回收率大于91.31%,RSD为1.54%(n=5)。中草药是天然药物宝库,自然界创造了许多有活性的手性化合物。因此,中草药中天然手性药物成分监测应该引起重视。3、手性农药对映体常具有不同的杀虫活性、人体毒性和环境行为,手性农药的残留给食品安全带来了新问题。本文利用自制的脲基衍生化β-环糊精键合sba-15手性固定相(ucdsp),采用高效液相色谱法成功地拆分了手性农药杀菌剂己唑醇对映体,并考察了流动相组成、ph值、柱温等对手性分离的影响。结果表明,以甲醇-水(60:40,v/v)为流动相,流速0.5ml/min,柱温20oc,检测波长230nm时,己唑醇对映体的分离度2.26,分析时间在15min内。在优化的色谱条件下建立了快速测定苹果中己唑醇对映体含量的新方法。己唑醇对映体在0.5~125μg/ml浓度范围内呈良好的线性关系(r≥0.9998),按3倍于噪声信号推算,苹果中己唑醇最小检出量均小于25μg/kg,两种对映体的加标回收率为88.0%~97.2%,相对标准偏差(rsd)分别小于0.98%和1.2%(n=5)。研究发现脲基环糊精固定相的化学性能和色谱性能稳定,对三唑类农药选择性好,该手性柱的制备方法简便,成本也较低。4、本文制备和表征含磺丁基β-环糊精毛细管电色谱开管柱,内壁修饰带负电荷磺丁基β-环糊精可增强电渗流,结合固定相和流动相中手性配体的协同作用,成功地实现了心血管药物尼卡地平对映体的快速拆分,手性分析时间在8min以内。考察了流动相组成、添加剂用量、操作电压和进样方式对分离度的影响,实现了快速拆分。同时建立了片剂中尼卡地平对映体含量测定。测得第一种尼卡地平药片对映体的含量分别为:19.65mg/片,19.26mg/片;第二种尼卡地平药片对映体的含量分别为:19.34mg/片,19.62mg/片,方法有较高的重现性。开管电色谱柱制备方法简便,溶剂耗量少,有一定的实用性。5、除药物分析外,也把磺丁基醚β-环糊精修饰的开管电色谱柱推广到果蔬中常用手性杀菌剂粉唑醇对映体含量的测定。考察了添加剂浓度、ph值、施加电压、温度及有机调节剂的含量对电色谱手性分离的影响。优化的流动相组成为10mmol/l硼酸钠(ph=9.2),含3.0mmol/l磺丁基醚β-环糊精和体积分数为15%甲醇,施加电压15kv,温度20oc,压力进样(3psi×3s),检测波长204nm。在上述条件下,粉唑醇对映体分离度可达1.85,分析时间仅为8~12min。黄瓜、梨、苹果和西红柿果蔬样品用乙腈提取,磁性石墨化炭净化,在上述优化条件下测定果蔬中粉唑醇对映体的残留量。粉唑醇对映体在1.3~250μg/m L范围呈良好的线性关系,实际样品中粉唑醇加标回收率均大于94.6%,RSD小于1.79%。按三倍的噪声信号推算出粉唑醇对映体的检测限为25μg/kg。该电色谱方法是一种操作简单,分离测定快速,溶剂耗量小,测试成本低,环境污染小的新方法。
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：TQ460.72;O657.72

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 程彪平;李来生;周仁丹;李良;张宏福;;两种β-环糊精单臂键合固定相液相色谱法拆分三唑类手性农药[J];高等学校化学学报;2015年05期

2 聂桂珍;李来生;程彪平;周仁丹;张宏福;;乙二胺β-环糊精键合SBA-15电色谱拆分β-受体阻滞剂的研究[J];分析试验室;2014年07期

3 周仁丹;李来生;程彪平;聂桂珍;张宏福;;新型双β-环糊精键合SBA-15液相手性固定相的制备及评价[J];化学学报;2014年06期

4 张仟春;肖小华;李攻科;;样品前处理-色谱在线分析农药残留的研究进展[J];分析科学学报;2013年04期

5 苏丹;宋永贵;;手性配体高效液相色谱拆分肌肽对映体[J];中国现代应用药学;2013年01期

6 许志刚;刘智敏;陆遥;郭围;;β-环糊精类液相色谱固定相及其手性拆分应用研究进展[J];化学研究与应用;2012年08期

7 李武宏;张欣荣;吴思;谭光国;刘超美;朱臻宇;柴逸峰;;新型三唑类抗真菌活性化合物毛细管电泳手性拆分及手性识别机理分子模拟研究[J];分析化学;2012年07期

8 吕仁江;丁会敏;李英杰;丁爽;邓磊;侯学功;;丙烯酰胺-β-环糊精毛细管电色谱手性整体柱的制备及应用[J];应用化学;2012年05期

9 李萌;金勉勉;李娟;陈新;商少明;刘瑛;毛明星;;离子液体和β-环糊精修饰反向微乳毛细管电动色谱分析化妆品中的激素[J];分析试验室;2012年02期

10 宁方刚;许晨;许建中;陈清西;;强阴离子交换固相萃取柱分离纯化柚皮苷[J];食品科学;2011年22期

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 聂桂珍;环糊精在手性电色谱中的应用研究[D];南昌大学;2014年

，

本文编号：1246585