超声萃取-微波消解-原子荧光分光光度法测保健食品中有机硒和总硒

发布时间：2020-06-10 00:28

【摘要】：背景和目的:硒(Se)是人类和动物必需的微量元素之一,人体缺硒可降低GSH-Px,减弱组织细胞抗氧化损伤能力,影响人体细胞的分裂、繁殖、遗传及生长,进而干扰核酸、蛋白质、多糖及酶的合成及代谢。现在市场销售的含硒保健食品种类繁多,但是因其价态和形态的不同具有的毒性和生物活性也差距较大。无机硒中硒的价态主要是以四价和六价存在,被动吸收后才能够还原为硒化物,逐渐转化为可溶性的硒代蛋氨酸硒;有机硒中硒的价态通常是以负二价形式存在,即以硒代胱氨酸和硒代蛋氨酸等还原形态存在,可以被肠道主动形式吸收。而有机硒不仅没有良好的生物活性,而且毒性强、吸收率低和环境污染大等缺陷。目前,中国国家卫生和计划生育委员会联合国家食品药品监督管理总局于2017年4月发布及2017年10月实施的《GB 5009.93-2017食品安全国家标准食品中硒的测定》中只有食品中总硒的检测方法,即检测食品中有机硒和无机硒,混淆了食品中的有机硒和无机硒的含量差异与功能。本课题拟采用超声萃取-微波消解-原子荧光分光光度法检测富硒保健食品中有机硒和总硒,检测思路为选择合适的有机溶剂,以最佳方式进行萃取,将溶解至水相的无机硒剔除,将溶解至有机相的有机硒进行消解,采用原子荧光分光光度法检测富硒保健食品中有机硒,富硒保健食品中的总硒无需有机溶剂萃取,直接进行消解后采用原子荧光分光光度法检测。方法:根据硒原子由六价硒还原成四价时发射特征波长的荧光的特点,利用原子荧光光度计,建立原子荧光法(atomic fluorescence spectrometry,AFS)测定保健食品中的有机硒及总硒的检测方法,摸索样品前处理方法及原子荧光色谱系统条件,确定样品最佳处理方法及检测方法。结果:分别使用甲苯和环己烷两种有机溶剂对15批富硒保健品样品进行萃取,两种方法测定有机硒含量差异没有统计学意义(P0.05),选择环己烷作为提取有机溶剂。分别采用经典分液漏斗萃取法和超声萃取法15批富硒保健品样品进行萃取,与经典分液漏斗萃取法比,超声萃取15批富硒保健品样品的有机硒含量较高(P0.05),选择环己烷超声萃取为萃取方法。分别采用湿法消解和微波消解对15份样品进行消解,与湿法消解比,微波消解法获得的有机硒和总硒较高(P0.05)。当NaBH_4浓度为20g/L时,硒的荧光强度达到峰值。HCl的体积分数为5%~15%范围,荧光值趋于最高水平且稳定,采用体积分数5%的HCl作为载流液。硒标准曲线为Y=159.14X+27.5,线性范围0μg/L~120μg/L,相关系数为0.999,检出限为0.008μg/L。硒标准溶液精密度相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为2.09%,稳定性试验RSD为2.96%,重复性试验RSD为1.59%及加样回收率范围95.1%~106.2%,RSD为3.19%。原子荧光光谱条件:灯电流:100mA,负高压:340V,原子化温度:800℃,石英炉炉高:8mm,载气氩气流量:500ml/min,屏蔽气氩气流量≥1000ml/min,载流:5%HCl,还原剂NaBH_4:15.0g/L。15批富硒保健食品的有机硒范围为3.80mg/kg~4.85 mg/kg,总硒含量范围为5.42mg/kg~6.86 mg/kg,有机硒占总硒的百分含量范围为59.61%~73.79%。结论:采用正己烷-超声萃取-微波消解-原子荧光光谱法测定富硒保健品中有机硒和总硒具有毒性小、重现性好、灵敏和简便等优点,适合富硒食品中的有机硒和总硒测定。
【图文】：

荧光强度,浓度,原子荧光光谱,体积分数

图 1.NaBH4浓度对硒荧光强度影响2.2.2.1.6 原子荧光光谱条件中 HCl 用量的选择采用已知浓度的硒对照分别采用体积分数为 0%、3%、5%、7%、9%、11%、15%和 20%的 HCl，以“2.原子荧光光谱条件”项下进行检测。HCl 用量增加时荧光值同步增加，体积5%～15%时，荧光值趋于最高水平且稳定，采用体积分数 5%HCl 作为载流液见图 2。

体积分数,原子荧光光谱,用量,条件

图 1.NaBH4浓度对硒荧光强度影响2.2.2.1.6 原子荧光光谱条件中 HCl 用量的选择采用已知浓度的硒对照品溶分别采用体积分数为 0%、3%、5%、7%、9%、11%、15%和 20%的 HCl，，以“2.2.2.2原子荧光光谱条件”项下进行检测。HCl 用量增加时荧光值同步增加，体积分数5%～15%时，荧光值趋于最高水平且稳定，采用体积分数 5%HCl 作为载流液。结见图 2。
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：O657.31;TS218

【参考文献】