椴树蜜多酚类化合物的分析鉴定研究

发布时间：2020-06-24 15:27

【摘要】：蜂蜜营养物质丰富,具有抗氧化、抗衰老、抑菌消炎等多种生物活性,被广泛认为是天然保健品。近年来,大量研究表明蜂蜜的这些生物活性与其自身含有的多酚类化合物密不可分。椴树是我国东北地区的主要蜜源植物,椴树蜜又分为紫椴蜜与糠椴蜜,是我国实行等级划分后唯一确定过的特等蜂蜜。因此,本论文主要对30个收集于我国东北不同地区的椴树蜜样品中的多酚类化合物进行了分析,包括15个紫椴蜜样品和15个糠椴蜜样品,主要研究结果如下:建立了鉴定我国椴树蜜中多酚类化合物的高效液相色谱串联质谱(high performance liquid chromatography,HPLC-MS)的分离检测方法。通过Strata-X-A固相萃取柱富集椴树蜜样品中的多酚类化合物,在280 nm的UV检测波长下对其进行分析,共鉴定出13种多酚类化合物和2种脱落酸,包括4-羟基苯甲酸、香兰素、没食子酸、p-香豆酸、丁香酸甲酯、反,反-脱落酸、顺,反-脱落酸、肉桂酸、5-甲氧基短叶松素、短叶松素、山奈酚、松属素、短叶松素-3-乙酸酯、柯因以及高良姜素。根据内标法等对这些成分的定量分析结果显示,我们初步推测4-羟基苯甲酸、香兰素、没食子酸、p-香豆酸、丁香酸甲酯、反,反-脱落酸、顺,反-脱落酸、肉桂酸以及柯因是紫椴蜜中的主要多酚类化合物;没食子酸、p-香豆酸、反,反-脱落酸、顺,反-脱落酸、短叶松素、松属素以及柯因是糠椴蜜中主要的多酚类化合物。结合气相色谱串联质谱(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)在椴树蜜样品中检测出一种新成分,即5号色谱峰。通过质谱裂解机理以及离子归属原理等对其分析,鉴定出该色谱峰为混合组分,分别为m/z 164,4-异丙基-1,3-环己二烯酸;m/z 163,N-苯乙酰胺。该混合组分是首次在我国椴树蜜中被报道,因此将两种物质暂时共同命名为椴树素。由于其大量稳定的存在于所有椴树蜜样品中,因此,初步推测其可以作为判断我国椴树蜜植物来源的特征性成分之一。采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(A版)分别构建了我国紫椴蜜与糠椴蜜中多酚类化合物的HPLC指纹图谱。通过相似度评价系统对紫椴蜜与糠椴蜜的HPLC色谱图的数据统计分析,紫椴蜜样品的相似度在0.618~0.962之间,糠椴蜜样品的相似度在0.667~0.945之间,说明花源相同的椴树蜜样品间相似度较高。根据共有峰结果显示,确定紫椴蜜的特征性成分是4-羟基苯甲酸、香兰素、p-香豆酸、反,反-脱落酸、顺,反-脱落酸以及椴树素,糠椴蜜的特征性成分是没食子酸、p-香豆酸、反,反-脱落酸、顺,反-脱落酸、短叶松素、柯因以及椴树素。另外,紫椴蜜样品中椴树素与顺,反-脱落酸的峰面积比值为2.15~7.93,而其在糠椴蜜样品中为0.21~1.86。因此,利用紫椴蜜与糠椴蜜中多酚类化合物的HPLC指纹图谱,可以有效地辨别我国紫椴蜜与糠椴蜜,这也是目前唯一能够成功区分我国紫椴蜜与糠椴蜜的方法。
【学位授予单位】：河北工程大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：O657.63
【图文】：

HPLC色谱,紫椴,短叶松素,样品

20图 2-1 紫椴蜜样品的 HPLC 色谱图Fig. 2-1 HPLC chromatogram of tilia amurensis honey samples注：1. 4-羟基苯甲酸；2. 香兰素；3. 没食子酸；4. p-香豆酸；5. 椴树素；6. 丁香酸甲酯7. 反，反-脱落酸；8. 顺，反-脱落酸；9. 肉桂酸；10. 5-甲氧基短叶松素；11. 短叶松素12. 山奈酚；13. 松属素；14. 短叶松素-3-乙酸酯；15. 柯因；16. 高良姜素

HPLC色谱,糠椴,短叶松素,样品

24图 2-2 糠椴蜜样品的 HPLC 色谱图Fig. 2-2 HPLC chromatogram of tilia mandshurica honey samples注：1. 4-羟基苯甲酸；2. 香兰素；3. 没食子酸；4. p-香豆酸；5. 椴树素；6. 丁香酸甲酯7. 反，反-脱落酸；8. 顺，反-脱落酸；9. 肉桂酸；10. 5-甲氧基短叶松素；11. 短叶松素12. 山奈酚；13. 松属素；14. 短叶松素-3-乙酸酯；15. 柯因；16. 高良姜素

【参考文献】