野生青钱柳的成分研究

发布时间：2020-11-15 15:54

　　 本文以贵州雷山地区青钱柳(Cyclocarya paliurus(batal)IIjinskaja,C.paliurus)叶为原材料,优化了青钱柳叶总糖和总黄酮的超声辅助提取的工艺,并对其化学成分进行了提取分离及成分分析,收集了全国11个产地的青钱柳叶,采用高效液相色谱(HPLC)对其进行了指纹图谱研究:1.本实验采用Box-Behnken方法对青钱柳叶总糖和总黄酮的纤维素酶超声提取工艺进行了响应面优化,以溶剂类型、料液比、超声时间和纤维素酶用量四个单因素为依据,采用四因素三水平的方法优化出最佳工艺,并以最佳工艺条件结合标准曲线测定了不同月份青钱柳叶中总糖和总黄酮的含量,建立其变化曲线图。总糖和总黄酮的最佳工艺分别是:(1)总糖:水提料液比为1:8.38(g/mL),超声时间为27.3 min,纤维素酶量为0.2%。(2)总黄酮:乙醇浓度为75%,料液比为1:44.5(g/mL),超声时间为29 min,纤维素酶用量为0.454%。在此条件下,测得多糖提取率为3.746%,黄酮提取率为5.472%。对比不同月份青钱柳中总糖和总黄酮含量可知,多糖含量4月份最高,6月份最低,黄酮含量8月份最高,4月份最低;对比不同地区青钱柳中总糖和总黄酮含量可知,九十九地区的青钱柳叶多糖和黄酮含量普遍高于独南地区;对比不同种源青钱柳中总糖和总黄酮含量可知,种播的青钱柳叶多糖含量普遍高于野生移植,而野生移植的青钱柳叶黄酮含量普遍高于种播。2.利用气质联用(GC-MS)对青钱柳叶的石油醚提取物进行了成分分析,一共得到了44种物质,将这44种物质归类为6大类,分别是脂肪类、芳香类、类芳香、生物碱类、甾体类和萜类。3.利用高效液相色谱(HPLC)分别考察了波长、流动相、提取部位对色谱图的影响情况,最终优化出最佳的色谱条件:检测样品为50%甲醇提取物,色谱柱为DIONEX C18(250×4.6 mm),流动相分别为:乙腈(A)-0.1%磷酸溶液(B);梯度洗脱:0~8 min,2%~10%A;8~39 min,10%~25%A;39~57 min,25%~32%A;57~70 min,32%~60%A;70~85 min,60%~90%A;85~90 min,90%~95%A;体积流量:1.0 mL/min,柱温:35℃,进样量10μL,检测波长 254 nm 。在此色谱条件下,对11个产地的青钱柳叶进行了HPLC检测,应用国家药典委员会《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》评价了11个批次青钱柳药材的指纹图谱,发现11个产地的青钱柳叶共有峰有20个,采用聚类分析可以将其分成5类,Ⅰ类有S1(湖南)、S2(浙江)、S11(江西)、S5(贵州),Ⅱ类有S3(广西)、S9(湖北)、S6(贵州),Ⅲ类有S4(江西)、S10(贵州),Ⅳ类有S7(河南),Ⅴ类有S8(浙江);主成分分析认为峰14、峰18、峰8是青钱柳叶的特征峰。
【学位单位】：武汉工程大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：O657.72;TQ914.1
【部分图文】：

图 2.3 葡萄糖标准曲线Fig.2.3 Standard curve of glucose图 2.4 芦丁标准曲线Fig.2.4 Standard Curve of rutin

19图 2.4 芦丁标准曲线Fig.2.4 Standard Curve of rutin由图 2.3 和 2.4 可知，葡萄糖标准曲线为 A=0.0244c（c 的位 μg/mL ），R2=0.9994，这说明了吸光度 A 在 0~40 μg/mL 的度范围内有着良好的线性关系；黄酮标准曲线为 A=0.0241c（c 的位 μg/mL ），R2=0.9992，这说明了吸光度 A 在 0~41 μg/mL 的度范围内有着良好的线性关系。2.2.2 提取率的计算方法青钱柳提取率计算公式如下：

武汉工程大学硕士学位论文 100%1.24745.0525100.0096/%14 VMAV多糖提取率 100%0.25871.028100.0299/%14 VMAV黄酮提取率式中：A 为吸光度，V1为测定体积，V 为测试液体积，M 为样质量。2.2.3 单因素实验结果与分析2.2.3.1 探究最适溶剂浓度
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本文编号：2884940