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硫酸马钱子碱抑菌活性及促成骨细胞增殖机理研究

发布时间:2021-04-19 16:16
  随着我国交通及体育等事业的不断发展,创伤、感染、肿瘤等引起的骨缺损病例逐年增加,临床上对骨损伤治疗的要求日益迫切。骨损伤治疗的药物主要解决损伤修复及预防术后感染这两大问题,目前临床用药虽然疗效良好,但受药理作用单一等因素的影响,需多种药物联合应用同时,也增加不良反应等用药风险。若一种药物既能修复骨损伤,又能预防术后感染,这将为临床治疗骨损伤提供新的思路。现代药理研究表明,中药马钱子提取物具有镇痛抗炎、抗菌、抗肿瘤及促进软骨细胞增殖等作用。马钱子碱作为马钱子的主要有效成分,是否进一步抗临床耐药菌及能否促进成骨细胞增殖?目前尚未深入研究。故本文旨在探索马钱子碱的硫酸盐硫酸马钱子碱(brucine sulfate,BS)的体外抑菌活性及对成骨细胞增殖的影响。研究内容主要包括以下两个方面:第一部分,首先通过回流、酸提、萃取、纯化及结晶等步骤制备BS,用高效液相色谱法(HPLC)对BS进行定性及定量分析。其次,采用牛津杯法初步考察BS对大肠杆菌(E.coli)和金黄色葡萄球菌(S.aureus)抑制作用,比浊法研究BS对E.coli和S.aureus(标准株及耐药株)的抑菌浓度曲线及时间曲线,同... 

【文章来源】:湘潭大学湖南省

【文章页数】:63 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
abstract
第1章 绪论
    1.1 细菌感染及治疗
        1.1.1 中药抑菌的有效部位
        1.1.2 中药抑菌机制
    1.2 骨组织损伤及治疗
        1.2.1 骨损伤的修复过程
        1.2.2 中药促成骨细胞增殖机制
    1.3 马钱子的研究
        1.3.1 马钱子的性质及应用
        1.3.2 马钱子碱的药理活性
    1.4 本课题研究思路
第2章 硫酸马钱子碱的制备及抑菌活性研究
    2.1 实验材料
        2.1.1 仪器与设备
        2.1.2 药品与试剂
        2.1.3 细菌来源
    2.2 实验方法
        2.2.1 硫酸马钱子碱的制备
        2.2.2 硫酸马钱子碱的鉴定
        2.2.3 硫酸马钱子碱抑菌作用
    2.3 硫酸马钱子碱的提取鉴定及抑菌活性的结果
        2.3.1 硫酸马钱子碱的鉴定结果分析
        2.3.2 硫酸马钱子碱抑菌圈结果
        2.3.3 硫酸马钱子碱抑菌浓度曲线
        2.3.4 硫酸马钱子碱抑菌时间曲线
        2.3.5 硫酸马钱子碱抑菌机制
    2.4 讨论
    2.5 本章小结
第3章 硫酸马钱子碱促成骨细胞增殖机理研究
    3.1 实验材料
        3.1.1 仪器与耗材
        3.1.2 药品与试剂
        3.1.3 qPCR主要引物信息
        3.1.4 蛋白免疫印迹主要抗体信息
    3.2 实验方法
        3.2.1 主要溶液配置
        3.2.2 hFOB1.19成骨细胞培养
        3.2.3 CCK8实验
        3.2.4 细胞免疫荧光
        3.2.5 蛋白免疫印迹
        3.2.6 实时荧光定量PCR
    3.3 结果
        3.3.1 硫酸马钱子碱促进hFOB1.19成骨细胞分裂增殖
        3.3.2 硫酸马钱子碱促进β-catenin蛋白累积及入核
        3.3.3 硫酸马钱子碱上调Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达
        3.3.4 硫酸马钱子碱上调Wnt/β-catenin信号通路基因表达
    3.4 讨论
    3.5 本章小结
第4章 结论与展望
    4.1 结论
    4.2 展望
参考文献
致谢
个人简历、硕士期间科研成果



本文编号:3147888

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