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N-乙酰神经氨酸的提纯、转晶及稳定性研究

发布时间:2021-04-24 20:03
  唾液酸是神经氨酸的衍生物,包含80多种九碳酸性单糖,其中N-乙酰神经氨酸是最普遍存在的一种单糖。N-乙酰神经氨酸位于膜糖蛋白的末端,参与细胞粘附、糖蛋白稳定性、神经元萌发和可塑性、病原体捕获和细胞信号转导等多种生物学过程。近年来,利用酶催化法制备N-乙酰神经氨酸的研究主要集中在菌种构建和酶催转化两方面。对于如何分离纯化高纯度的N-乙酰神经氨酸以及其中的结晶机理还有待深入研究。此外,N-乙酰神经氨酸的稳定性之前也未见系统的报道。因此,深入探索并研究出N-乙酰神经氨酸的结晶机理和稳定性有着重大意义。本文从N-乙酰神经氨酸的后处理工艺和稳定性两个方面进行探究,取得了以下的研究成果:第一,酶催化法转化的N-乙酰神经氨酸高纯度产品的后处理提纯工艺开发以及其结晶机理的研究。酶催化法的杂质主要为前体物质,本研究采用过膜和树脂法相结合的工艺,最大程度的去除了转化液中的丙酮酸钠和N-乙酰氨基葡萄糖这两种前体物质。采用异丙醇结晶得到了高纯度的N-乙酰神经氨酸。对N-乙酰神经氨酸异丙醇结晶机理的研究表明,N-乙酰神经氨酸在水-异丙醇混合物中的二水和无水状态与水的活度和温度有关。这可以为确定获得所需的无水或水... 

【文章来源】:中国科学技术大学安徽省 211工程院校 985工程院校

【文章页数】:126 页

【学位级别】:博士

【文章目录】:
摘要
Abstract
第一章 绪论
    1.1 简介
        1.1.1 唾液酸的发现和概述
        1.1.2 N-乙酰神经氨酸无水物和N-乙酰神经氨酸二水合物的比较
        1.1.3 N-乙酰神经氨酸功能和应用的研究
        1.1.4 N-乙酰神经氨酸的生产方法
        1.1.5 N-乙酰神经氨酸的检测方法的研究
        1.1.6 N-乙酰神经氨酸的分离纯化
        1.1.7 溶剂介导的无水/水合物体系的相变
        1.1.8 N-乙酰神经氨酸盐
    1.2 本课题研究目的与研究内容
        1.2.1 本课题研究目的
        1.2.2 本课题研究内容
第二章 酶催化法N-乙酰神经氨酸分离提纯工艺研究
    2.1 引言
    2.2 实验材料与实验方法
        2.2.1 菌种
        2.2.2 主要实验仪器及试剂
        2.2.3 实验研究方法
    2.3 结果与讨论
        2.3.1 酶催制备转化液
        2.3.2 三种物质高效液相检测标曲绘制
        2.3.3 转化液过膜实验
        2.3.4 离子树脂实验
        2.3.5 N-乙酰神经氨酸异丙醇结晶
    2.4 本章小结
第三章 N-乙酰神经氨酸在水-异丙醇溶液中无水物和二水合转晶机理研究
    3.1 引言
    3.2 实验材料与实验方法
        3.2.1 主要实验仪器及试剂
        3.2.2 实验研究方法
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 无水N-乙酰神经氨酸和N-乙酰神经氨酸二水合表征的比较
        3.3.2 N-乙酰神经氨酸在水和异丙醇混合体系中的溶解度
        3.3.3 溶剂介导的无水-水合物相变的热力学驱动力
        3.3.4 固相稳定性与水活度相关性的研究
    3.4 本章小结
第四章 乙腈结晶N-乙酰神经氨酸二水合工艺研究
    4.1 引言
    4.2 实验材料与实验方法
        4.2.1 主要实验仪器及试剂
        4.2.2 实验研究方法
    4.3 结果与讨论
        4.3.1 筛选结晶N-乙酰神经氨酸二水合物的有机溶剂
        4.3.2 丙酮和乙腈对饱和N-乙酰神经氨酸水溶液结晶能力比较
        4.3.3 乙腈结晶生成N-乙酰神经氨酸二水合物晶体的研究
        4.3.4 乙腈结晶生成N-乙酰神经氨酸二水合物晶体的转晶点研究
        4.3.5 乙腈结晶工艺中的溶解焓、熔融焓和混合焓
    4.4 本章小结
第五章 N-乙酰神经氨酸稳定性研究
    5.1 引言
    5.2 实验材料与实验方法
        5.2.1 主要实验仪器及试剂
        5.2.2 实验研究方法
    5.3 结果与讨论
        5.3.1 强光、高温、高湿对N-乙酰神经氨酸二水合晶体的影响
        5.3.2 N-乙酰神经氨酸二水合晶体长期放置实验
        5.3.3 人工胃液和人工肠液对N-乙酰神经氨酸的影响
        5.3.4 N-乙酰神经氨酸二水合晶体在食品中的应用实验
        5.3.5 N-乙酰神经氨酸水溶液稳定性研究及降解动力学研究
        5.3.6 N-乙酰神经氨酸水溶液褐变研究及抑制褐变研究
2O2对N-乙酰神经氨酸水溶液稳定性的影响">        5.3.7 H2O2对N-乙酰神经氨酸水溶液稳定性的影响
        5.3.8 25℃和50℃下的货架期测定
    5.4 本章小结
第六章 N-乙酰神经氨酸钙盐
    6.1 引言
    6.2 实验材料和实验方法
        6.2.1 主要实验仪器及试剂
        6.2.2 实验研究方法
    6.3 结果与讨论
        6.3.1 N-乙酰神经氨酸钙盐制备
        6.3.2 N-乙酰神经氨酸钙盐表征
        6.3.3 N-乙酰神经氨酸钙盐溶解度和稳定性研究
        6.3.4 制备工艺优化
        6.3.5 放大试验
    6.4 本章小结
        6.4.1 总结
        6.4.2 制备原理
        6.4.3 钙盐工艺流程图
结论与展望
参考文献
致谢
在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果


【参考文献】:
期刊论文
[1]N-乙酰神经氨酸醛缩酶的固定化及固定化酶性质研究[J]. 王惠兰,吴金勇,陈祥松,袁丽霞,朱薇薇,姚建铭.  生物技术通报. 2020(06)
[2]醇-水介质中离子交换法制备盐酸小檗碱树脂复合物[J]. 赵美慧,王绍宁,李雪慧,梁宏玉,马俊媛,徐晖.  沈阳药科大学学报. 2019(07)
[3]中、碱性条件下L-抗坏血酸自降解非酶褐变过程动力学研究[J]. 余科,杨艳,余爱农,刘玉平.  化学研究与应用. 2019(06)
[4]大孔树脂纯化天麻多糖的工艺研究[J]. 陈琛,李鑫鑫,魏唯,刘祥,田慧玲,冯振斌,胡红忠,郑红星.  四川大学学报(自然科学版). 2018(05)
[5]蓝莓多酚稳定性及热降解动力学研究[J]. 矫馨瑶,李恩惠,王月华,李冬男,孟宪军,李斌.  中国食品学报. 2018(01)
[6]西咪替丁在人工模拟胃肠液的稳定性研究[J]. 张毅,张丽,蔡进,汤磊.  广州化工. 2017(20)
[7]蓝莓花色苷降解动力学及稳定性[J]. 李恩惠,矫馨瑶,王晨歌,王月华,王维生,刘刚,李冬男,孟宪军,李斌.  食品科学. 2018(05)
[8]常山碱稳定性及其降解动力学研究[J]. 张继远,刘晓谦,杨立新,冯伟红,王智民,李春.  中国中药杂志. 2017(16)
[9]超声降解葡聚糖及过程动力学研究[J]. 陈华磊,侯殿志,李素霞,于玥,黄双霞,蓝尉冰,王帅静,陈山.  食品科技. 2017(07)
[10]紫苏花色苷纯化工艺研究[J]. 崔丽霞,张志军,李晓君,李会珍.  食品科技. 2017(05)

硕士论文
[1]N-乙酰-D-神经氨酸的酶法制备[D]. 胡世元.兰州大学 2006



本文编号:3157991

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