基于Au纳米颗粒/还原氧化石墨烯C-反应蛋白免疫传感器的研制
发布时间：2021-06-18 13:51
采用还原氧化石墨烯-金纳米颗粒（RGO-Au NPs）作为免疫传感器的固定基质,将C-反应蛋白（CRP）抗体固定在玻碳电极表面,用蒽醌二羧酸作为标记物,制成夹心型的CRP免疫传感器。在最优实验条件下,通过示差脉冲伏安法对CRP的含量进行检测。该传感器在0.25100 ng/m L范围内具有良好的线性关系,检出限为0.08 ng/m L,线性系数为0.997。该传感器为C-反应蛋白的检测提供了一种新的手段。
【文章来源】：分析测试学报. 2017,36(03)北大核心CSCD
【文章页数】：6 页
【部分图文】：
免疫传感器的制备流程
m)打磨干净，将电极表面在不同粒径大小的Al2O3粉末上抛光，再将电极分别用硝酸水溶液(1∶1)、无水乙醇、水各超声洗涤5min，自然风干后，将电极放在氧化石墨烯溶液中通过电沉积的方法沉积，在－1.4～1.2V范围内采用循环伏安法沉积，电极上得到ＲGO;取出电极用PBS缓冲液清洗干净，放入HAuCl4溶液中用同样的方法，在－0.8～2.0V范围内采用循环伏安法沉积上Au纳米颗粒。电沉积完成后用PBS溶液冲洗干净，自然风干，在电极表面滴加CＲP抗体10.0μL，图1免疫传感器的制备流程Fig.1Stepwiseoffabricatingimmunosensor图3扫描速度对传感器响应电流的影响Fig.3Effectofscanratesonresponsecurrentofimmunosensorscanrate(a－g):20，40，60，80，100，120，140mV/s;inset:theplotofpeakcurrentvs.v1/2置于冰箱中在4℃条件下过夜。将已修饰好CＲP抗体的玻碳电极用PBS缓冲液冲洗3次，自然晾干，在电极上滴加10μL1%的BSA溶液，将电极放在恒温箱中(温度为37℃)封闭1h。封闭好的电极用PBS溶液冲洗3次，自然晾干后，用于CＲP的测定。CＲP免疫传感器的制备流程如图1所示。1.4检测方法在该免疫传感器上滴加不同浓度的CＲP抗原，图2氧化石墨烯的透射电镜图Fig.2TEMimageofGO将电极放在恒温箱中(温度为37℃)培育，培育完之后取出并用PBS冲洗干净，自然晾干。然后滴加10.0μL蒽醌二羧酸标记的CＲP抗体，置于上述恒温箱中培育。之后取出并用PBS冲洗干净，自然晾干。该传感器作为工作电极，与铂电极、甘汞电极组成三电极系统，置于pH值为6.5的醋酸缓冲溶液中，通过示差脉冲伏安法(DPV)进行测定，得到DPV曲线，根据传感器响应电流值与CＲP浓度成正比的关系，实现对CＲP的定量测定。每次测定完后用4mol/L尿素洗脱30min，用PBS缓?
r图3扫描速度对传感器响应电流的影响Fig.3Effectofscanratesonresponsecurrentofimmunosensorscanrate(a－g):20，40，60，80，100，120，140mV/s;inset:theplotofpeakcurrentvs.v1/2置于冰箱中在4℃条件下过夜。将已修饰好CＲP抗体的玻碳电极用PBS缓冲液冲洗3次，自然晾干，在电极上滴加10μL1%的BSA溶液，将电极放在恒温箱中(温度为37℃)封闭1h。封闭好的电极用PBS溶液冲洗3次，自然晾干后，用于CＲP的测定。CＲP免疫传感器的制备流程如图1所示。1.4检测方法在该免疫传感器上滴加不同浓度的CＲP抗原，图2氧化石墨烯的透射电镜图Fig.2TEMimageofGO将电极放在恒温箱中(温度为37℃)培育，培育完之后取出并用PBS冲洗干净，自然晾干。然后滴加10.0μL蒽醌二羧酸标记的CＲP抗体，置于上述恒温箱中培育。之后取出并用PBS冲洗干净，自然晾干。该传感器作为工作电极，与铂电极、甘汞电极组成三电极系统，置于pH值为6.5的醋酸缓冲溶液中，通过示差脉冲伏安法(DPV)进行测定，得到DPV曲线，根据传感器响应电流值与CＲP浓度成正比的关系，实现对CＲP的定量测定。每次测定完后用4mol/L尿素洗脱30min，用PBS缓冲液洗干净，重复上述实验过程。2结果与讨论2.1氧化石墨烯的微观形貌对合成的氧化石墨烯材料进行透射电镜(TEM)表征，如图2所示，可以看出该材料是一种层状结构，片层中存在褶皱，说明氧化石墨烯的层数很少。表面非常光滑，呈透明的薄片状。2.2氧化还原峰电流与扫描速度的关系为考察QC－labeledanti-CＲP/CＲP/anti-CＲP/ＲGO/GCE免疫传感器的电化学行为，实验考察了扫描速度对氧化还原峰电流的影响，当扫描速度在20～140mV/s范围内变化时，传感器在HAc－NaAc缓冲溶液(pH5.5)中的循环伏安曲线如图3所示。可以看?
【参考文献】：
期刊论文
[1]鞣酸功能化石墨烯修饰电极上芦丁的电化学行为及灵敏检测[J]. 李惠茗,张惠怡,赖祥文,梁立,刘坤平,苟小军. 分析测试学报. 2016(03)
[2]聚合物/定向石墨烯复合材料研究进展[J]. 吕青,颜红侠,刘超. 工程塑料应用. 2016(02)
[3]基于Pd/COF-LZU1非标记型C-反应蛋白免疫传感器的研制[J]. 刘婷知,夏介仁,李瑶,陈文凯,张帅,刘仪,郑丽,杨云慧. 高等学校化学学报. 2015(10)
[4]聚脱氧腺苷酸/还原石墨烯纳米复合膜电化学传感器检测核黄素[J]. 庄欠粉,王勇,倪永年. 高等学校化学学报. 2015(09)
[5]石墨烯的制备方法及其性能研究[J]. 肖淑娟,于守武,谭小耀. 化学世界. 2015(06)
[6]氧化石墨烯的制备方法及应用研究进展[J]. 魏红敏,田志宏. 长江大学学报(自科版). 2015(15)
[7]石墨烯在传感器中的应用研究进展[J]. 周超,陈思浩,楼建中,王继虎,杨秋杰,刘传荣,黄大鹏,朱同贺. 材料导报. 2014(S1)
[8]纳米石墨烯修饰电极电化学发光法测定盐酸氯丙嗪的研究[J]. 李焘,谭学才,胡琪,吴佳雯,方晓雪,刘绍刚,余会成,黄在银. 分析测试学报. 2014(02)
[9]可再生使用的磁性纳米修饰C反应蛋白电流型免疫传感器[J]. 侯建国,曹玉廷,周汉坤,孟令花,胡富陶,干宁. 传感技术学报. 2011(10)
[10]氧化石墨烯在辣根过氧化物酶传感器中的应用研究[J]. 冯亚娟,魏玉萍,赵晓慧,符雪文,黄亮亮,杨华,杨云慧. 化学研究与应用. 2011(04)
本文编号：3236777
【文章来源】：分析测试学报. 2017,36(03)北大核心CSCD
【文章页数】：6 页
【部分图文】：
免疫传感器的制备流程
m)打磨干净，将电极表面在不同粒径大小的Al2O3粉末上抛光，再将电极分别用硝酸水溶液(1∶1)、无水乙醇、水各超声洗涤5min，自然风干后，将电极放在氧化石墨烯溶液中通过电沉积的方法沉积，在－1.4～1.2V范围内采用循环伏安法沉积，电极上得到ＲGO;取出电极用PBS缓冲液清洗干净，放入HAuCl4溶液中用同样的方法，在－0.8～2.0V范围内采用循环伏安法沉积上Au纳米颗粒。电沉积完成后用PBS溶液冲洗干净，自然风干，在电极表面滴加CＲP抗体10.0μL，图1免疫传感器的制备流程Fig.1Stepwiseoffabricatingimmunosensor图3扫描速度对传感器响应电流的影响Fig.3Effectofscanratesonresponsecurrentofimmunosensorscanrate(a－g):20，40，60，80，100，120，140mV/s;inset:theplotofpeakcurrentvs.v1/2置于冰箱中在4℃条件下过夜。将已修饰好CＲP抗体的玻碳电极用PBS缓冲液冲洗3次，自然晾干，在电极上滴加10μL1%的BSA溶液，将电极放在恒温箱中(温度为37℃)封闭1h。封闭好的电极用PBS溶液冲洗3次，自然晾干后，用于CＲP的测定。CＲP免疫传感器的制备流程如图1所示。1.4检测方法在该免疫传感器上滴加不同浓度的CＲP抗原，图2氧化石墨烯的透射电镜图Fig.2TEMimageofGO将电极放在恒温箱中(温度为37℃)培育，培育完之后取出并用PBS冲洗干净，自然晾干。然后滴加10.0μL蒽醌二羧酸标记的CＲP抗体，置于上述恒温箱中培育。之后取出并用PBS冲洗干净，自然晾干。该传感器作为工作电极，与铂电极、甘汞电极组成三电极系统，置于pH值为6.5的醋酸缓冲溶液中，通过示差脉冲伏安法(DPV)进行测定，得到DPV曲线，根据传感器响应电流值与CＲP浓度成正比的关系，实现对CＲP的定量测定。每次测定完后用4mol/L尿素洗脱30min，用PBS缓?
r图3扫描速度对传感器响应电流的影响Fig.3Effectofscanratesonresponsecurrentofimmunosensorscanrate(a－g):20，40，60，80，100，120，140mV/s;inset:theplotofpeakcurrentvs.v1/2置于冰箱中在4℃条件下过夜。将已修饰好CＲP抗体的玻碳电极用PBS缓冲液冲洗3次，自然晾干，在电极上滴加10μL1%的BSA溶液，将电极放在恒温箱中(温度为37℃)封闭1h。封闭好的电极用PBS溶液冲洗3次，自然晾干后，用于CＲP的测定。CＲP免疫传感器的制备流程如图1所示。1.4检测方法在该免疫传感器上滴加不同浓度的CＲP抗原，图2氧化石墨烯的透射电镜图Fig.2TEMimageofGO将电极放在恒温箱中(温度为37℃)培育，培育完之后取出并用PBS冲洗干净，自然晾干。然后滴加10.0μL蒽醌二羧酸标记的CＲP抗体，置于上述恒温箱中培育。之后取出并用PBS冲洗干净，自然晾干。该传感器作为工作电极，与铂电极、甘汞电极组成三电极系统，置于pH值为6.5的醋酸缓冲溶液中，通过示差脉冲伏安法(DPV)进行测定，得到DPV曲线，根据传感器响应电流值与CＲP浓度成正比的关系，实现对CＲP的定量测定。每次测定完后用4mol/L尿素洗脱30min，用PBS缓冲液洗干净，重复上述实验过程。2结果与讨论2.1氧化石墨烯的微观形貌对合成的氧化石墨烯材料进行透射电镜(TEM)表征，如图2所示，可以看出该材料是一种层状结构，片层中存在褶皱，说明氧化石墨烯的层数很少。表面非常光滑，呈透明的薄片状。2.2氧化还原峰电流与扫描速度的关系为考察QC－labeledanti-CＲP/CＲP/anti-CＲP/ＲGO/GCE免疫传感器的电化学行为，实验考察了扫描速度对氧化还原峰电流的影响，当扫描速度在20～140mV/s范围内变化时，传感器在HAc－NaAc缓冲溶液(pH5.5)中的循环伏安曲线如图3所示。可以看?
【参考文献】：
期刊论文
[1]鞣酸功能化石墨烯修饰电极上芦丁的电化学行为及灵敏检测[J]. 李惠茗,张惠怡,赖祥文,梁立,刘坤平,苟小军. 分析测试学报. 2016(03)
[2]聚合物/定向石墨烯复合材料研究进展[J]. 吕青,颜红侠,刘超. 工程塑料应用. 2016(02)
[3]基于Pd/COF-LZU1非标记型C-反应蛋白免疫传感器的研制[J]. 刘婷知,夏介仁,李瑶,陈文凯,张帅,刘仪,郑丽,杨云慧. 高等学校化学学报. 2015(10)
[4]聚脱氧腺苷酸/还原石墨烯纳米复合膜电化学传感器检测核黄素[J]. 庄欠粉,王勇,倪永年. 高等学校化学学报. 2015(09)
[5]石墨烯的制备方法及其性能研究[J]. 肖淑娟,于守武,谭小耀. 化学世界. 2015(06)
[6]氧化石墨烯的制备方法及应用研究进展[J]. 魏红敏,田志宏. 长江大学学报(自科版). 2015(15)
[7]石墨烯在传感器中的应用研究进展[J]. 周超,陈思浩,楼建中,王继虎,杨秋杰,刘传荣,黄大鹏,朱同贺. 材料导报. 2014(S1)
[8]纳米石墨烯修饰电极电化学发光法测定盐酸氯丙嗪的研究[J]. 李焘,谭学才,胡琪,吴佳雯,方晓雪,刘绍刚,余会成,黄在银. 分析测试学报. 2014(02)
[9]可再生使用的磁性纳米修饰C反应蛋白电流型免疫传感器[J]. 侯建国,曹玉廷,周汉坤,孟令花,胡富陶,干宁. 传感技术学报. 2011(10)
[10]氧化石墨烯在辣根过氧化物酶传感器中的应用研究[J]. 冯亚娟,魏玉萍,赵晓慧,符雪文,黄亮亮,杨华,杨云慧. 化学研究与应用. 2011(04)
本文编号：3236777
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