海洋微生物酶法合成2-氧-α-D-葡萄糖基-L-抗坏血酸条件的研究

发布时间：2021-08-22 09:21

　　L-抗坏血酸（又名维生素C）是一种人体必须的营养元素,在人体多种生理活动中均起到重要作用,但由于其不稳定性极大限制了应用。2-O-α-D-葡萄糖基-L-抗坏血酸（AA-2G）是一种L-抗坏血酸衍生物,具有稳定性好、生理活性与L-抗坏血酸最接近等优势。AA-2G主要通过酶法合成,环糊精葡萄糖基转移酶（CGTase）被认为是合成AA-2G的最佳酶源。本研究利用海洋微生物Y112所产的CGTase催化L-抗坏血酸和β-环糊精合成AA-2G,首先采用单因素试验优化游离酶合成AA-2G的条件,进一步通过响应面法对AA-2G的转化条件进行了考察。然后采用吸附交联包埋法固定化CGTase,研究了固定化CGTase的稳定性,并探讨了与游离酶相比利用固定化CGTase转化合成AA-2G的优势,为今后酶法转化合成AA-2G的研究提供了理论基础。研究结果分述如下:游离CGTase转化合成AA-2G的条件优化:采用单因素试验初步优化游离酶合成AA-2G的条件,考察pH、加酶量、底物浓度、温度、底物配比、反应时间对AA-2G产量的影响,并通过Plackett-Burman试验设计对影响AA-2G合成的6个因素进... 

【文章来源】：上海海洋大学上海市

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

AA-2G标准样品、VC标准品及转化反应液HPLC图

18h，24 h，36h，42 h，48h。由图2-3 可知，AA-2G 的产量随着反应时间的延长而逐渐增大，当反应时间延长至 24 h时，AA-2G 的产量最高，超过 24 h 后 AA-2G 产量开始减少，所以选择 24 h 进行后续酶法转化合成 AA-2G 条件优化研究。(b)VCAA-2G(c)VC

图 2-3 转化时间对合成 AA-2G 的影响Fig. 2-3 Effect of time on the synthesis ofAA-2G度对酶法转化合成 AA-2G 的影响度对 CGTase 酶法转化合成 AA-2G 的影响，保持其他条件为 15℃，25℃，30℃，35℃，40℃，45℃，50℃，55 ℃进，随着转化温度的升高，AA-2G 的产量也在不断增加，温继续升高温度，AA-2G 的产量呈现下降的趋势，这可能是转化反应速度加快，而超过 40℃后温度过高造成酶活有部 40℃进行后续酶法转化合成 AA-2G 条件优化研究。

【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
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本文编号：3357473