基于鸟嘌呤猝灭荧光适配体传感器检测OTA
发布时间:2021-10-25 19:10
赭曲霉毒素A(OTA)是一种由青霉菌属和曲霉菌属次级代谢产生的霉菌毒素,广泛存在于诸如谷物、咖啡、可可、酒类及果汁等。OTA具有肾毒性、肝毒性、DNA损伤以及抑制RNA和蛋白质合成等危害。以高效液相色谱(HPLC)为代表的仪器分析及以抗体为代表的免疫分析是检测OTA传统方法,但是这些方法耗时、繁琐、价格昂贵等限制了它们在即时检测中的应用。因此,迫切地需要简单、快速、高灵敏、高选择性的检测方法。近年来,新兴的核酸适配体作为抗体替代物成为分析化学家研究的热点,核酸适配体具有高亲和性、高特异性、易于化学合成及修饰、热稳定性好等优点,同时鸟嘌呤(Guanine)对于荧光素(FAM)具有一定的猝灭能力,以鸟嘌呤为猝灭基团可以有效降低设计及合成难度,降低检测成本。本论文基于核酸适配体特异性识别能力,利用鸟嘌呤猝灭FAM荧光建立了单标记检测OTA的新方法。根据实验数据及文献分析,预测OTA与适配体形成反平行G四链体结构且尾端有3对互补碱基,所以原36个碱基的核酸适配体可以去掉3’端5个碱基,并以此31个碱基的序列为核心结构设计了两条新型单标记OTA核酸适配体序列OTXAsF1、OTXAsF2,这两组...
【文章来源】:大连理工大学辽宁省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】:80 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
Abstract
引言
1 文献综述
1.1 赭曲霉毒素A简介
1.1.1 OTA理化性质
1.1.2 OTA的毒性
1.1.3 OTA限量标准
1.2 OTA检测方法
1.2.1 OTA的标准检测方法
1.2.2 OTA的仪器检测方法
1.2.3 OTA的免疫分析方法
1.3 基于核酸适配体的OTA检测方法
1.3.1 核酸适配体简介
1.3.2 OTA的核酸适配体
1.3.3 基于核酸适配体检测OTA的光学方法
1.3.4 基于核酸适配体检测OTA的电化学方法
1.4 基于鸟嘌呤猝灭荧光的研究
1.4.1 鸟嘌呤做猝灭团研究实例
1.4.2 鸟嘌呤猝灭FAM荧光原理
1.5 研究目的与意义
2 基于末端突出鸟嘌呤猝灭荧光的核酸适配体生物传感方法
2.1 实验仪器与试剂
2.1.1 实验仪器
2.1.2 实验试剂
2.1.3 实验中用到的DNA序列
2.2 实验原理及方法
2.2.1 实验原理
2.2.2 OTXAsF1生物传感器最佳反应条件选择方法
2.2.3 OTXAsF1生物传感器工作曲线及特异性测定方法
2.2.4 OTXAsF2生物传感器最佳反应条件选择方法
2.2.5 OTXAsF2生物传感器工作曲线及特异性测定方法
2.3 实验结果与讨论
2.3.1 OTXAsF1生物传感器最佳反应条件选择
2.3.2 OTXAsF1生物传感器工作曲线分析
2.3.3 OTXAsF1生物传感器选择性分析
2.3.4 OTXAsF2生物传感器最佳反应条件选择
2.3.5 OTXAsF2生物传感器工作曲线分析
2.3.6 OTXAsF2生物传感器选择性分析
2.4 本章小结
3 基于G四链体猝灭荧光的核酸适配体生物传感方法
3.1 实验仪器与试剂
3.1.1 实验仪器
3.1.2 实验试剂
3.1.3 实验中用到的DNA序列
3.2 实验原理及方法
3.2.1 实验原理
3.2.2 OTXAsF10生物传感器最佳反应条件选择方法
3.2.3 OTXAsF10生物传感器工作曲线及特异性测定方法
3.2.4 OTXAsF20生物传感器最佳反应条件选择方法
3.2.5 OTXAsF20生物传感器工作曲线及特异性测定方法
3.3 实验结果与讨论
3.3.1 OTXAsF10生物传感器最佳反应条件选择
3.3.2 OTXAsF10生物传感器工作曲线分析
3.3.3 OTXAsF10生物传感器选择性分析
3.3.4 OTXAsF20生物传感器最佳反应条件选择
3.3.5 OTXAsF20生物传感器工作曲线分析
3.3.6 OTXAsF20生物传感器选择性分析
3.4 本章小结
4 四种核酸序列的比较
结论
参考文献
攻读硕士学位期间发表学术论文情况
致谢
【参考文献】:
期刊论文
[1]四参数Logistic模型潜在特质参数的Warm加权极大似然估计[J]. 孟祥斌,陶剑,陈莎莉. 心理学报. 2016(08)
[2]采用Origin软件计算DXI 800发光仪的四参数logistic定标数据[J]. 王强,马小红,翁秀妹. 检验医学. 2014(06)
[3]胶体金免疫层析技术研究现状及进展[J]. 任娟. 新疆畜牧业. 2011(12)
[4]国内外真菌毒素检测标准制修订现状与进展[J]. 王松雪,鲁沙沙,张艳,谢刚,王海鸥. 食品工业科技. 2011(03)
本文编号:3458012
【文章来源】:大连理工大学辽宁省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】:80 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
Abstract
引言
1 文献综述
1.1 赭曲霉毒素A简介
1.1.1 OTA理化性质
1.1.2 OTA的毒性
1.1.3 OTA限量标准
1.2 OTA检测方法
1.2.1 OTA的标准检测方法
1.2.2 OTA的仪器检测方法
1.2.3 OTA的免疫分析方法
1.3 基于核酸适配体的OTA检测方法
1.3.1 核酸适配体简介
1.3.2 OTA的核酸适配体
1.3.3 基于核酸适配体检测OTA的光学方法
1.3.4 基于核酸适配体检测OTA的电化学方法
1.4 基于鸟嘌呤猝灭荧光的研究
1.4.1 鸟嘌呤做猝灭团研究实例
1.4.2 鸟嘌呤猝灭FAM荧光原理
1.5 研究目的与意义
2 基于末端突出鸟嘌呤猝灭荧光的核酸适配体生物传感方法
2.1 实验仪器与试剂
2.1.1 实验仪器
2.1.2 实验试剂
2.1.3 实验中用到的DNA序列
2.2 实验原理及方法
2.2.1 实验原理
2.2.2 OTXAsF1生物传感器最佳反应条件选择方法
2.2.3 OTXAsF1生物传感器工作曲线及特异性测定方法
2.2.4 OTXAsF2生物传感器最佳反应条件选择方法
2.2.5 OTXAsF2生物传感器工作曲线及特异性测定方法
2.3 实验结果与讨论
2.3.1 OTXAsF1生物传感器最佳反应条件选择
2.3.2 OTXAsF1生物传感器工作曲线分析
2.3.3 OTXAsF1生物传感器选择性分析
2.3.4 OTXAsF2生物传感器最佳反应条件选择
2.3.5 OTXAsF2生物传感器工作曲线分析
2.3.6 OTXAsF2生物传感器选择性分析
2.4 本章小结
3 基于G四链体猝灭荧光的核酸适配体生物传感方法
3.1 实验仪器与试剂
3.1.1 实验仪器
3.1.2 实验试剂
3.1.3 实验中用到的DNA序列
3.2 实验原理及方法
3.2.1 实验原理
3.2.2 OTXAsF10生物传感器最佳反应条件选择方法
3.2.3 OTXAsF10生物传感器工作曲线及特异性测定方法
3.2.4 OTXAsF20生物传感器最佳反应条件选择方法
3.2.5 OTXAsF20生物传感器工作曲线及特异性测定方法
3.3 实验结果与讨论
3.3.1 OTXAsF10生物传感器最佳反应条件选择
3.3.2 OTXAsF10生物传感器工作曲线分析
3.3.3 OTXAsF10生物传感器选择性分析
3.3.4 OTXAsF20生物传感器最佳反应条件选择
3.3.5 OTXAsF20生物传感器工作曲线分析
3.3.6 OTXAsF20生物传感器选择性分析
3.4 本章小结
4 四种核酸序列的比较
结论
参考文献
攻读硕士学位期间发表学术论文情况
致谢
【参考文献】:
期刊论文
[1]四参数Logistic模型潜在特质参数的Warm加权极大似然估计[J]. 孟祥斌,陶剑,陈莎莉. 心理学报. 2016(08)
[2]采用Origin软件计算DXI 800发光仪的四参数logistic定标数据[J]. 王强,马小红,翁秀妹. 检验医学. 2014(06)
[3]胶体金免疫层析技术研究现状及进展[J]. 任娟. 新疆畜牧业. 2011(12)
[4]国内外真菌毒素检测标准制修订现状与进展[J]. 王松雪,鲁沙沙,张艳,谢刚,王海鸥. 食品工业科技. 2011(03)
本文编号:3458012
本文链接:https://www.wllwen.com/kejilunwen/huaxue/3458012.html
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