多肽金团簇的构建及其在细胞核成像与抗菌中的应用
发布时间：2021-11-09 12:31
贵金属纳米团簇材料是一种尺寸小于2 nm,由几个到上百个贵金属原子组成的小尺寸原子聚集体材料。由于其特殊尺寸效应,使其具有特殊的物理和化学性质,如精确的分子结构、良好的荧光特性。生物分子模版法合成的贵金属纳米团簇,由于其合成方法简单、重现性好、生物相容性好、荧光可调性等特点,在生物医学应用与细胞成像等领域引起了广泛关注。根据功能多肽合成的贵金属纳米团簇可以保持多肽的生物活性及贵金属纳米团簇的荧光特性、催化活性等物化性能,本课题开发了一系列功能多肽模板合成的贵金属纳米团簇,并成功研发了实现细胞核多模式成像的成像探针。结合本课题组前期工作贵金属团簇在治疗癌症、炎症等生物效应的基础上,进一步研究了贵金属团簇材料的抑菌效果。具体内容如下:（1）功能多肽金团簇构建及细胞核多模式成像在此实验中,使用了具有特异靶向细胞核能力的SV多肽（NH2-CCYGGPKKKRKVV-COOH）为模板,合成了两种不同类型的金团簇,一种具有红色荧光发射(λex=560 nm,λem=657 nm),粒径为1.7±0.27 nm;一种具有蓝色荧光发射(...
【文章来源】：山东农业大学山东省
【文章页数】：64 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
符号说明
中文摘要
Abstract
1 前言
1.1 金纳米团簇
1.2 金纳米团簇的制备与结构
1.2.1 金纳米团簇的制备
1.2.1.1 基于有机小分子化学合成
1.2.1.2 蛋白质为模板合成
1.2.1.3 多肽作为模板合成
1.2.2 金纳米团簇的结构
1.3 金纳米团簇的应用
1.3.1 细胞成像
1.3.2 生物体组织成像
1.3.3 生物检测分析
1.3.4 抗肿瘤治疗与抗菌
1.4 课题研究目的与意义
2 材料与方法
2.1 试剂与仪器
2.1.1 实验试剂
2.1.2 实验仪器
2.2 SV-Au NCs的合成及对细胞核多模式成像
2.2.1 不同荧光发射的金纳米团簇的合成
2.2.1.1 最佳反应条件的探索
2.2.1.2 金纳米团簇的最佳反应条件
2.2.2 金纳米团簇的表征
2.2.3 TMB测定金纳米团簇的类过氧化物酶活性
2.2.4 细胞培养
2.2.4.1 冻存细胞的复苏
2.2.4.2 细胞的培养与传代
2.2.4.3 细胞的冻存
2.2.5 金纳米团簇的毒性
2.2.6 金团簇的细胞摄取
2.2.7 金团簇的靶向细胞核研究
2.2.7.1 探索最佳孵育浓度
2.2.7.2 探索最佳孵育时间
2.2.7.3 最佳孵育条件
2.2.8 DAB法测定金团簇染色细胞核的浓度依赖性和时间依赖性
2.2.9 不同成像模式下细胞核成像效果的对比
2.3 CCY-Au NCs的合成及抗菌性研究
2.3.1 金团簇的合成
2.3.2 金团簇的表征
2.3.3 CCY-Au NCs的稳定性研究
2.3.4 金团簇的浓度测定
2.3.5 CCY-Au NCs细胞毒性研究
2.3.6 细菌培养
2.3.7 金团簇的体外抗菌研究
2.3.8 细菌摄入金团簇量检测
3 结果与分析
3.1 基于SV多肽合成金团簇及细胞核多模式成像
3.1.0 金团簇的合成
3.1.1 金团簇形貌表征
3.1.2 紫外可见光谱与红外光谱分析
3.1.3 金团簇荧光光谱
3.1.4 金团簇细胞毒性与靶向细胞核荧光成像
3.1.5 金团簇的类过氧化物酶活性
3.1.6 DAB法标记细胞核成像
3.1.7 不同成像模式下细胞核成像效果的对比
3.2 基于CCY多肽合成金团簇及其抗菌性研究
3.2.1 金团簇的合成与表征
3.2.2 CCY-Au NCs的细胞毒性
3.2.3 CCY-Au NCs体外抗菌性研究
4 讨论
4.1 SV多肽为模板合成金纳米团簇与多模式细胞成像
4.1.1 以SV多肽为模板合成不同尺寸的金团簇
4.1.2 对细胞核的多模式成像
4.2 金团簇的抗菌性研究
5 结论
5.1 SV-Au NCs的合成与细胞多模式成像
5.2 CCY-Au NCs的合成与抗菌性研究
6 创新之处
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间论文发表情况
【参考文献】：
期刊论文
[1]Specific detection and effective inhibition of a single bacterial species in situ using peptide mineralized Au cluster probes[J]. Xiangchun Zhang,Li Liu,Ru Liu,Jing Wang,Xuhu Hu,Qing Yuan,Juanjuan Guo,Gengmei Xing,Yuliang Zhao,Xueyun Gao. Science China（Chemistry）. 2018(05)
[2]Assessment of the MT1-MMP expression level of different cell lines by the naked eye[J]. Xiangchun Zhang,Qing Yuan,Xueyun Gao. Science China（Life Sciences）. 2018(04)
本文编号：3485346
【文章来源】：山东农业大学山东省
【文章页数】：64 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
符号说明
中文摘要
Abstract
1 前言
1.1 金纳米团簇
1.2 金纳米团簇的制备与结构
1.2.1 金纳米团簇的制备
1.2.1.1 基于有机小分子化学合成
1.2.1.2 蛋白质为模板合成
1.2.1.3 多肽作为模板合成
1.2.2 金纳米团簇的结构
1.3 金纳米团簇的应用
1.3.1 细胞成像
1.3.2 生物体组织成像
1.3.3 生物检测分析
1.3.4 抗肿瘤治疗与抗菌
1.4 课题研究目的与意义
2 材料与方法
2.1 试剂与仪器
2.1.1 实验试剂
2.1.2 实验仪器
2.2 SV-Au NCs的合成及对细胞核多模式成像
2.2.1 不同荧光发射的金纳米团簇的合成
2.2.1.1 最佳反应条件的探索
2.2.1.2 金纳米团簇的最佳反应条件
2.2.2 金纳米团簇的表征
2.2.3 TMB测定金纳米团簇的类过氧化物酶活性
2.2.4 细胞培养
2.2.4.1 冻存细胞的复苏
2.2.4.2 细胞的培养与传代
2.2.4.3 细胞的冻存
2.2.5 金纳米团簇的毒性
2.2.6 金团簇的细胞摄取
2.2.7 金团簇的靶向细胞核研究
2.2.7.1 探索最佳孵育浓度
2.2.7.2 探索最佳孵育时间
2.2.7.3 最佳孵育条件
2.2.8 DAB法测定金团簇染色细胞核的浓度依赖性和时间依赖性
2.2.9 不同成像模式下细胞核成像效果的对比
2.3 CCY-Au NCs的合成及抗菌性研究
2.3.1 金团簇的合成
2.3.2 金团簇的表征
2.3.3 CCY-Au NCs的稳定性研究
2.3.4 金团簇的浓度测定
2.3.5 CCY-Au NCs细胞毒性研究
2.3.6 细菌培养
2.3.7 金团簇的体外抗菌研究
2.3.8 细菌摄入金团簇量检测
3 结果与分析
3.1 基于SV多肽合成金团簇及细胞核多模式成像
3.1.0 金团簇的合成
3.1.1 金团簇形貌表征
3.1.2 紫外可见光谱与红外光谱分析
3.1.3 金团簇荧光光谱
3.1.4 金团簇细胞毒性与靶向细胞核荧光成像
3.1.5 金团簇的类过氧化物酶活性
3.1.6 DAB法标记细胞核成像
3.1.7 不同成像模式下细胞核成像效果的对比
3.2 基于CCY多肽合成金团簇及其抗菌性研究
3.2.1 金团簇的合成与表征
3.2.2 CCY-Au NCs的细胞毒性
3.2.3 CCY-Au NCs体外抗菌性研究
4 讨论
4.1 SV多肽为模板合成金纳米团簇与多模式细胞成像
4.1.1 以SV多肽为模板合成不同尺寸的金团簇
4.1.2 对细胞核的多模式成像
4.2 金团簇的抗菌性研究
5 结论
5.1 SV-Au NCs的合成与细胞多模式成像
5.2 CCY-Au NCs的合成与抗菌性研究
6 创新之处
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间论文发表情况
【参考文献】：
期刊论文
[1]Specific detection and effective inhibition of a single bacterial species in situ using peptide mineralized Au cluster probes[J]. Xiangchun Zhang,Li Liu,Ru Liu,Jing Wang,Xuhu Hu,Qing Yuan,Juanjuan Guo,Gengmei Xing,Yuliang Zhao,Xueyun Gao. Science China（Chemistry）. 2018(05)
[2]Assessment of the MT1-MMP expression level of different cell lines by the naked eye[J]. Xiangchun Zhang,Qing Yuan,Xueyun Gao. Science China（Life Sciences）. 2018(04)
本文编号：3485346
本文链接：https://www.wllwen.com/kejilunwen/huaxue/3485346.html
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